浙江省自然科学基金(Y2090753)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：温州医学院温州医科大学教育部更多>>
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- MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响
- 2015年
- Mitoferrin-1(MFRN1)是溶质携带蛋白家族的一员,是线粒体内膜上最主要的铁运输蛋白。为了观察MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响,采用包装慢病毒和感染293T细胞的方法构建MFRN1稳定过表达的细胞模型(293T-MFRN1),并对其线粒体功能进行评价。构建的稳定细胞株293T-MFRN1中MFRN1转录水平及蛋白表达水平显著增加(P<0.01),MFRN1过表达细胞线粒体内总铁的含量明显增加(P<0.05);电镜显示线粒体结构损伤,线粒体嵴减少、空泡化;线粒体能量代谢受抑制,细胞ATP含量显著下降,腺苷酸池总量(ATP+ADP+AMP)比对照组减少约40%;细胞生长受到抑制,在细胞培养48 h后高表达组细胞数量显著低于对照组;细胞内羟自由基(·OH)含量增加;线粒体DNA发生明显的氧化损伤。以上表明,MFRN1表达量的稳定对细胞功能极为重要,表达量异常增加将导致细胞线粒体功能障碍、细胞增殖抑制。
- 杨宇陈琳张小勤张柳章万林施孟如吕建新李伟
- 关键词：稳定转染线粒体功能活性氧能量代谢
- 超高效液相色谱-质谱法测定细胞中嘌呤核苷酸的方法探究被引量：7
- 2013年
- 建立了检测细胞中嘌呤核苷酸（ATP、ADP、AMP、NAD＋和NADP＋）的超高效液相色谱-质谱（UP-LC-MS）分析方法.采用KinetexTM HILIC柱（50 mm ×4.6 mm,2.1 μm）进行分离,对细胞样品的萃取方法、流动相组成及质谱参数进行优化.方法学确证表明：各待测物在1.0 ～ 100 μmol/L范围内线性关系良好,相关系数（r）均大于0.99,平均回收率为95.7％～101.1％,相对标准偏差为1.2％～6.1％.本方法的灵敏度高、简便快速、重复性好,可用于细胞中能量代谢的研究.
- 姜丹丹李伟周怀彬张婷许芳武佳吕建新
- 关键词：细胞ATPADPAMP
