国家重点基础研究发展计划(2003CB716003)
- 作品数:22 被引量:291H指数:10
- 相关作者:赵学明陈洵陈涛班睿王靖宇更多>>
- 相关机构:天津大学中国科学院清华大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程理学轻工技术与工程更多>>
- 蜡样芽孢杆菌ATCC14579核黄素操纵子的克隆及在枯草芽孢杆菌中的表达被引量:4
- 2004年
- 利用BLAST从B cereusATCC14 5 79的基因组中找到一段与枯草芽孢杆菌核黄素操纵子具有较高相似性的4 6kb大小的基因组DNA片段 ,该片段中含有完整的核黄素操纵子。该操纵子结构基因的编码产物的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌核黄素操纵子相应结构基因的编码产物的氨基酸序列具有 99%的同源性。该片段被克隆到大肠杆菌 -枯草芽孢杆菌穿梭载体pHP13M中。表达分析的结果表明B cereusATCC14 5 79核黄素操纵子可在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达。利用PCR方法用来自枯草杆菌的sacB基因的启动子替换B cereusATCC14 5 79核黄素操纵子原有的启动子使其更好表达。替换启动子后的核黄素操纵子在本文使用的发酵条件下有较好的表达 ,核黄素产量从 39 5mg L增加到 6 1 7mg L。
- 王靖宇陈涛班睿陈洵赵学明
- 关键词:核黄素蜡样芽孢杆菌核黄素操纵子枯草芽孢杆菌
- 奶制品中蛋白质测定的毛细管电泳法研究被引量:50
- 2006年
- 本文利用毛细管电泳法研究了奶制品中蛋白成分的分离与测定。采用柠檬酸缓冲体系,对牛奶中的α-乳白蛋白(α-La)、β-乳球蛋白(β-Lg)、α-酷蛋白(α-CN)、β-酪蛋白(β-CN)、酪蛋白(κ-CN)五种蛋白进行了很好的分离,其迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别小于0.2%和5%;检出限分别为0.01、0.03、0.02、0.02、0.02mg/mL;加标回收率范围为84%~103%。应用该法测定了多种奶制品中的蛋白质含量。本法简便、快速、准确,为牛奶及奶制品质量的监控提供了一种新的手段。
- 唐萍田晶佘振宝翁前锋许国旺
- 关键词:毛细管电泳牛奶奶粉
- 发酵生物制氢研究进展被引量:28
- 2005年
- 综述了近年来发酵生物制氢领域的研究进展。在菌种方面,除了对现有产氢菌种的深入研究外,还采用生物学,分子生物学及生物信息学手段建立产氢菌种库;在氢酶的研究方面,已逐步从基因确定、功能研究拓展到基因工程构建高效产氢菌研究;而在与废弃生物质处理相结合的反应过程方面,研究主要集中在利用不同种类的废弃物的产氢和高效产氢反应器上。此外,还初步总结了目前对发酵制氢可行性和经济性的评价,并对其发展方向提出了新的看法。
- 邢新会张翀
- 关键词:生物制氢菌种氢酶反应器
- 辅酶再生体系的研究进展被引量:29
- 2004年
- 辅酶再生是实现氧化还原酶催化反应的必需步骤 ,是关系到氧化还原酶工业应用的关键。通过介绍酶法再生和电化学方法再生的机理 ,分别总结了有关还原态辅酶和氧化态辅酶再生方法的研究现状 ,包括酶学再生过程中涉及到的酶、自由酶和整体细胞再生及其反应器的设计 ;以及电化学再生中电极修饰及中间体选择等。
- 张翀邢新会
- 关键词:辅酶再生电化学生物催化
- 核黄素操纵子在B.subtilis 24R7染色体上整合对核黄素合成的影响被引量:1
- 2005年
- 构建含有B.subtilis 24核黄素操纵子的整合型核黄素质粒pRB40、pRB61和pRB63,研究了核黄素操纵子分别在B.subtilis 24R7染色体的rib、amyE和thrC位点整合对核黄素合成的影响.结果表明,核黄素操纵子通过单交换重组方式整合在上述位点可使核黄素合成量增加14%~19%,而通过双交换重组方式整合在amyE或thrC位点可使核黄素合成量增加40%~44%.增强核黄素操纵子在B.subtilis 24R7染色体上的稳定性可以提高核黄素的合成量.
- 陈涛王靖宇班睿陈洵赵学明
- 关键词:核黄素操纵子染色体质粒
- 低氮促进红发夫酵母合成虾青素机理的研究被引量:6
- 2009年
- 培养基中初始氮(硫酸铵)浓度对红发夫酵母虾青素合成有明显的影响,低氮能够促进红发夫酵母合成虾青素。运用代谢通量分析的方法,定量分析不同氮浓度下红发夫酵母的中心碳代谢表明:生成乙酰辅酶A的反应的通量与合成虾青素反应的通量正相关,并且这两个通量都随培养基中初始氮浓度的降低而升高。这说明乙酰辅酶A是红发夫酵母合成虾青素的一个限制因素。进一步测定红发夫酵母丙酮酸代谢相关酶的活性表明:参与丙酮酸脱氢酶旁路的两种酶———乙醛脱氢酶和乙酰辅酶A合成酶在红发夫酵母中的活性极低;然而,柠檬酸裂解酶的活性较高,并且与红发夫酵母虾青素的合成明显呈正相关。该结果说明,柠檬酸裂解反应决定着红发夫酵母细胞质中乙酰辅酶A的供给,从而显著影响着其虾青素的合成。低氮条件能够提高柠檬酸裂解酶的活性和限制蛋白质的合成,从而增加乙酰辅酶A的供给,促进红发夫酵母合成虾青素。
- 胡建中巩继贤董庆霖陈洵赵学明
- 关键词:红发夫酵母虾青素丙酮酸代谢
- 高产虾青素红法夫酵母的选育及代谢通量分析被引量:13
- 2006年
- 以野生型红法夫酵母As2.1557为出发菌株,依次进行两轮紫外线诱变和亚硝基胍诱变,并以10-4与10-3mol/Lβ-紫罗酮作为筛选剂,得到突变株UV-N2-7,其虾青素产量和含量分别较出发菌株提高81.7%和2.25倍。采用Plackett-Burman设计法及响应面分析法对发酵培养基的组分及发酵条件进行了优化,突变株的虾青素产量由从初始的2.674 mg/L提高到了6.338 mg/L。建立了红法夫酵母的代谢网络,并对比了突变株和野生株间歇培养条件下对数生长期的代谢通量分布。结果表明:突变株与野生株相比,PP途径通量有所减小,而EMP途径和TCA循环有所增强,突变株用于菌体生长的通量有所减小;二者的丙酮酸脱氢酶的活性均较低,分泌至胞外的丙酮酸的代谢通量约为32%。因此预计通过遗传改造和发酵控制提高丙酮酸脱氢酶的活性可能会进一步提高虾青素的产率。
- 孙乃霞董庆霖赵学明
- 关键词:虾青素红法夫酵母诱变发酵优化代谢通量分析
- 巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶在新型环氧载体ZH-HA上的固定化被引量:3
- 2008年
- 巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶共价结合在新型环氧-氨基型载体ZH-HA上,通过对酶浓度、固定化时间、pH以及缓冲液浓度等条件的考察,确定了最优固定化条件:50 mg比活力6000U/g的巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶蛋白和1g ZH-HA悬浮于pH9.0 1 mol/L磷酸缓冲液,室温搅拌6 h,制得固定化巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶,活力2126 U/g湿载体,活力回收率7.67%。比较研究了固定化酶与原酶性质,原酶最适温度45℃,最适pH为8.0。固定化酶则分别是50℃和9.0,分别比溶液酶偏移5℃、1.0个pH单位。经过40批连续水解青霉素G钾盐,固定化巨大芽孢杆菌青霉素酰化酶仍保持80%的活力,显示出良好的工作稳定性。
- 孙健周毅频陶家权袁中一许国旺
- 关键词:固定化巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶
- β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化甘草酸多样性的研究
- 甘草是豆科甘草属(Glycyyhiza)植物。甘草酸(glycyrrhizin,GL)作为甘草的一种主要成分,为三萜皂甙,其糖基部分为通过β-1,2糖苷键和β-1,3糖苷键相连接的两个葡萄糖醛酸。甘草酸具有抗炎症、抗病毒...
- 张琦冯世江王小艳李春
- 关键词:催化多样性
- 文献传递
- Rapid Quantification of Light-labeled Intelligent Biocatalysts for Industrial Biotechnology and Environmental Biotechnology
- <正>Bioprocess engineering for production of useful biosubstances is being shifted from the conventional pure c...
- Xin-Hui XingMinsheng LiuChong ZhangYin ChenBing HanSangtian YanKai Lou
- 文献传递