国家海洋公益性行业科研专项(201305018)
- 作品数：13 被引量：82H指数：5
- 相关作者：吴燕燕杨贤庆李来好胡晓王晶更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院南海水产研究所上海海洋大学广东海洋大学更多>>
- 发文基金：国家海洋公益性行业科研专项广东省科技计划工业攻关项目海南省重点科技项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 三种物理法辅助蛋白酶水解合浦珠母贝蛋白的效果评价被引量：2
- 2015年
- 目的:研究了微波法(W)、超声法(U)与传统水浴法(H)3种模式辅助7种常用酶(Alcalase 2.4L蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶和枯草蛋白酶)酶解合浦珠母贝蛋白的效果。方法:通过RPHPLC法与Tricine-SDS-PAGE电泳实验,结合水解度、DPPH·清除率、·OH自由基清除率等评价指标。结果:物理辅助酶解能有效促进水解,微波结合木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和枯草蛋白酶处理,其作用效果优于超声波法和传统水浴法;Alcalase 2.4L蛋白酶与复合风味蛋白酶在三种辅助模式下相似。结论:综合各指标结果得出,微波助解合浦珠母贝蛋白最佳的酶为Alcalase 2.4L蛋白酶与复合风味蛋白酶。
- 吴燕燕王晶李来好
- 远东拟沙丁鱼抗氧化肽对Caco-2细胞氧化应激损伤的影响被引量：9
- 2016年
- 对远东拟沙丁鱼（Sardinopssagax）蛋白进行蛋白酶解和膜分离，得到分子质量100~3000u（F1）、3000~10000u（F2）和大于10000u（F3）的多肽组分。在生化水平上测定各组分对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）、羟基自由基和过氧自由基清除能力；在细胞水平上，以H2O2对Caco-2细胞的毒性及细胞内抗氧化体系的影响为检测指标，筛选最适浓度的H2O2建立细胞氧化应激模型；在建立该模型的基础上，进一步检测蛋白多肽F1对氧化应激损伤细胞的修复功能。结果表明：组分F1对DPPH、ABTS、羟基自由基和过氧自由基清除能力最强，清除率分别为56.03±0.14、86.26±0.32、38.34±1.70、54.85±0.75；100μmol/L的H2O2对细胞毒性作用较小，并可降低细胞中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化物酶（POD）的活性和谷胱甘肽（GSH）的含量，增加丙二醛（MDA）的含量，细胞氧化应激模型选择H2O2浓度为100μmol/L；在该模型条件下，F1对受损的Caco-2细胞中抗氧化体系中的GSH-Px、T-SOD、POD的活性和MDA、GSH的含量有一定恢复作用，可调节细胞中失衡的抗氧化体系。远东拟沙丁鱼多肽FI对细胞氧化应激受损有一定保护作用。
- 李亚会吉薇吉宏武苏伟明王晶晶
- 关键词：远东拟沙丁鱼抗氧化肽CACO-2细胞氧化应激
- 合浦珠母贝肉酶解产物的抗氧化稳定性与功能特性被引量：5
- 2014年
- 酶解合浦殊母贝内蛋白制备抗氧化肽的粗提产物，以合浦珠母贝清除DPPH自由基、OH自由基、超氧阴离子能力变化为指标，测定其抗氧化稳定性和功能特性。化学稳定性包括受温度、贮藏浓度、pH、不同干燥方式的影响，生物稳定性为胃肠道消化耐受度，以及功能特性包括乳化性、吸水保湿能力和吸油能力。结果表明：合浦珠母贝酶解产物具有较弱的耐热性，低温条件下最佳贮藏浓度为10－50mg／mL，在碱性环境中8h会丧失活性，而冷冻干燥较有利于保持其抗氧化活性。产物还含有较强的乳化性和吸油吸水保湿能力，但在模拟胃肠道消化过程中活性保持较差，这些性质均有利于其在化妆品中的应用，而不适用于口服抗氧化功能食物药物，将为其后续相应的工业化应用提供依据。
- 王晶吴燕燕李来好杨贤庆胡晓
- 关键词：抗氧化稳定性功能特性
- 远东拟沙丁鱼蛋白多肽(Sardinops sagaxp olypeptide)的制备及其对酪氨酸酶的抑制作用被引量：5
- 2016年
- 以远东拟沙丁鱼为原料,采用动物蛋白水解酶和风味酶联合水解,通过膜分离等工序制备远东拟沙丁鱼蛋白多肽（Sardinops sagax Polypeptide/SSP）,测定其分子量的分布,以生化水平上对酪氨酸酶的抑制率、细胞水平上对小鼠B16细胞中酪氨酸酶活性及黑色素含量的抑制率为检测指标,研究SSP对酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。结果显示：SSP的重均分子量为1664 u,其分子量区间主要为500～3000 u;无论是在生化水平还是细胞水平上,SSP对酪氨酸酶都具有一定的抑制作用,且SSP还能在一定程度上抑制细胞中黑色素的合成,这一结果表明了SSP具有一定的美白功能,有望作为无毒副作用的天然酪氨酸酶抑制剂,在医药、食品、化妆品等行业具有广泛的应用前景。
- 李亚会吉薇吉宏武苏伟明王晶晶
- 关键词：远东拟沙丁鱼蛋白多肽酪氨酸酶活性黑色素含量
- 海洋贝类活性肽的研究现状和应用前景被引量：3
- 2013年
- 中国近海有丰富的贝类资源,贝肉以及其副产物主要用于冷鲜、干制品以及风味酱料加工,大部分下脚料加工利用率低,被丢掉后在一定程度上也造成了环境污染。酶法制备活性肽,研究其结构与功能活性的关系和活性肽的应用是当前国内外研究的热点。综述国内外相关的制备纯化和构效研究的进展,分析和探讨贝类活性肽在生产中存在的一些问题,并阐明海洋贝类活性肽在食品工业、医药、化妆品和饲料等领域中的潜在应用价值及前景,为进一步高值化开发利用海洋贝类提供参考。
- 王晶吴燕燕杨贤庆
- 关键词：活性多肽酶解制备纯化构效关系
- 合浦珠母贝肉抗氧化肽的结构分析被引量：4
- 2013年
- 为探明从合浦珠母贝肉中酶法制备得到的抗氧化肽的结构,采用基质辅助激光飞行时间质谱技术测定反相高效液相色谱(reverse phase High-performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离合浦珠母贝肉酶解产物所得各组分的分子量,并对其中具有较强抗氧化能力的组分进行了二级质谱结构解析。结果表明,水解液经RP-HPLC分离,得到抗氧化活性较强的五个肽段组分A、B、C、D和E,其对应的相对分子量分别为1022.54、1334.60、1494.75、1085.60、1288.82和1304.83u。其中对苯代苦味肼基自由基(DPPH·)具有最强清除能力的是C组分肽,其氨基酸序列为Val-Ala-Thr-Gly-Leu-Arg-Lys-Glu-Gly-Val-Val-Gly-Gly-Pro-Arg。以上研究结果初步揭示了合浦珠母贝肉抗氧化肽的结构与抗氧化活性的关系。
- 吴燕燕王晶尚军杨贤庆胡晓
- 关键词：抗氧化肽质谱分析
- 添加剂和光照对合浦珠母贝肉酶解液抗氧化活性的影响被引量：5
- 2015年
- 为了探明合浦珠母贝（Pinctada fucata）肉抗氧化肽在应用中是否受到食品添加剂和光照的影响,文章以清除DPPH·、·OH和O2-·等自由基的能力以及可溶性蛋白质量分数（SPC）为指标,测定合浦珠母贝肉酶解液的抗氧化稳定性受食品辅料（Na Cl、蔗糖和葡萄糖）、不同浓度防腐剂（苯甲酸钠和山梨酸钾）、金属离子（K＋、Ca2＋、Mg2＋、Zn2＋和Cu2＋）等添加剂以及光照的影响。结果表明：Na Cl（0.5%~4.0%）和蔗糖（2.0%~10.0%）对合浦珠母贝肉酶解液抗氧化性影响并不显著,长时间保存,葡萄糖的影响较大;防腐剂对其抗氧化活性和SPC也有一定的影响,0.6%的山梨酸钾和0.4%的苯甲酸钠有益于其保存,且苯甲酸钠的作用效果大于山梨酸钾;K＋、Ca2＋、Mg2＋对其清除自由基的能力影响较小,而Cu2＋的影响最大,0.05mg·m L-1以上浓度的Cu2＋和光照都会降低其抗氧化能力。
- 吴燕燕王晶李来好杨贤庆胡晓周婉君
- 关键词：抗氧化肽光照抗氧化稳定性
- 马氏珠母贝免疫活性肽的纯化与鉴定被引量：19
- 2017年
- 为制备马氏珠母贝免疫活性肽,以马氏珠母贝全脏器为原料,利用体外模拟消化的方法对其进行酶解,然后通过超滤系统收集分子量小于3 ku的酶解液。采用细胞培养方法,以体外免疫活性为指标,利用Sephadex G-25凝胶柱层析、Capto Q强阴离子交换色谱等对马氏珠母贝酶解液进行分离纯化与筛选,获得2个具有免疫活性的肽段,利用电喷雾静电场离子阱串联质谱分别对2个活性肽序列进行测定。结果表明:一个肽的相对分子质量为245.0,肽序列为Ala-Arg/Pro-Met;另一个别肽的相对分子质量为274.0,肽序列为Val-Arg。在浓度0.3 mg/m L时,2种肽能显著促进脾淋巴细胞的增殖与提高巨噬细胞的吞噬能力,表明这2种肽均具有较好的免疫活性。
- 邓志程张迪吉宏武曹文红苏伟明
- 关键词：马氏珠母贝分离纯化氨基酸序列
- 蓝圆鲹蛋白酶解物的螯合矿物离子活性研究被引量：12
- 2017年
- 以蓝圆鲹为原料,采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及碱性蛋白酶对其进行水解,研究酶解产物与钙、亚铁、锌离子的螯合活性。结果表明:蓝圆鲹经胰蛋白酶水解,水解度为23.14%时其产物具有较高螯合铁、锌离子的活性,其螯合率分别高达96.63%和94.28%;蓝圆鲹经木瓜蛋白酶水解,水解度为22.00%时,其产物具有较高螯合钙离子的活性,其螯合率高达96.78%;同时研究表明上述两种酶解物还具有较好的抗氧化活性,其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼半抑制浓度值分别为3.74 mg/m L和3.64 mg/m L。此外,氨基酸分析表明蓝圆鲹高螯合矿物离子活性的酶解物中天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸含量较高。
- 杨伊然胡晓杨贤庆李来好陈胜军吴燕燕林婉玲黄卉马海霞
- 关键词：蓝圆鲹酶解物抗氧化
- 重组大肠杆菌制备珍珠贝源抗氧化肽发酵条件优化被引量：1
- 2016年
- 为进一步提高实验室前期构建的产抗氧化肽重组工程菌株DE3-p EGX6p-1-PFMAP制备珍珠贝源抗氧化肽的制备效率,通过摇瓶发酵过程中发酵条件包括诱导温度、诱导时间、IPTG浓度、培养基、摇床转速和接种量的单因素优化实验确定最佳发酵条件,并进一步利用正交实验优化50 L发酵罐发酵条件,结果表明摇瓶和50 L发酵罐最佳发酵条件一致,均为诱导温度30℃、诱导时间4 h、IPTG浓度0.2 mmol/L、培养基p H7、摇床转速220 r/min和接种量5%(v/v)。该工艺操作方便、过程简单、时间短,能高效制备出目的蛋白,为珠母贝源抗氧化肽的下一步工业化应用提供了有力技术支撑。
- 马永凯吴燕燕李来好杨贤庆
- 关键词：重组大肠杆菌发酵条件
