江西省教育厅科学技术研究项目(2006-87)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:杨桂玲王小中邹湉饶燕飞丁伟荣更多>>
- 相关机构:南昌大学第二附属医院江西省人民医院更多>>
- 发文基金:江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
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- 转染慢性粒细胞白血病总RNA对树突状细胞介导的抗白血病作用的体外研究被引量:2
- 2013年
- 目的体外诱导和鉴定慢性粒细胞白血病-树突状细胞(CML-DC),并探讨人慢性粒细胞白血病(CML)总RNA体外转染对其介导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对慢性粒细胞白血病细胞杀伤作用的影响。方法分离14例CML患者骨髓单个核细胞,加入rhIL-4、rhGM-CSF、rhTNF-α诱导培养CML-DC。分别于培养第1、3、6、14d用倒置显微镜进行形态学观察,流式细胞术检测免疫学表型,染色体G显带技术检测其染色体核型,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcr-abl融合基因。并于CML-DC培养第5d,加入CML细胞总RNA脂质体转染,或裸总RNA转染,或不加任何试剂继续培养的DC,共三种CML-DC,分别致敏T淋巴细胞,另设以IL-2培养的T淋巴细胞为对照组,比较不同组别的致敏T淋巴细胞的杀伤活性。结果CML骨髓单个核细胞诱导前CD1α、CD83表达均在5%以下。而诱导成熟的CML-DC细胞CD1a、CD83阳性表达率分别为20.13±3.43%、26.76±2.79%,较诱导前均明显增高(P<0.01)。CML-DC细胞均存在Ph1染色体,并表达bcr-abl融合基因。总RNA脂质体转染CML-DC、裸总RNA转染CML-DC、单纯CML-DC分别致敏的T淋巴细胞在效:靶比为20:1时对CML单个核细胞的杀伤效率分别为75.33±3.11%、37.23±2.92%、29.62±1.61%,均明显高于对照组(9.87±3.43%,P<0.01)。总RNA脂质体转染的CML-DC所诱导的CTL杀伤活性最强,与后三组杀伤活性均有显著性差异(P<0.001)。结论CML-DC既具有CML白血病源性,又具有DC细胞的特性,并能诱导特异性CTL杀伤白血病细胞。经脂质体转染CML细胞总RNA可以提高CML-DC介导的CTL特异性杀伤慢性粒细胞白血病细胞。
- 饶燕飞邹湉杨桂玲王小中丁伟荣
- 关键词:树突状细胞慢性粒细胞白血病总RNA