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不同铁营养状态对小金海棠镉吸收的影响被引量：7: 2011年; 采用非损伤微测技术对不同铁营养状态(正常供铁、缺铁和高铁)下苹果小金海棠(Malus xiaojinensis)水培苗根部镉吸收速率和植株不同部位镉含量进行了测定,并采用半定量RT-PCR研究MxIRT1在不同铁营养状态下的表达变化。结果表明:正常供铁培养条件下,小金海棠根部各区镉吸收速率有明显差异,分生区>伸长区>成熟区;缺铁培养条件下,小金海棠植株根部分生区和伸长区镉吸收速率明显增加,成熟区无明显变化,植株地上部和根部镉积累增加;高铁培养条件下,小金海棠植株根部分生区和伸长区镉吸收速率明显降低,成熟区无明显变化,植株地上部和根部镉积累减少。铁转运蛋白编码基因MxIRT1在不同铁营养状态下表达水平存在明显差异,推测铁营养可能通过调控基因MxIRT1的表达影响重金属镉的吸收。; 高超王忆马丽张柳霞张新忠韩振海; 关键词：小金海棠铁镉非损伤微测技术

小金海棠ferritin基因的克隆和表达分析: 2013年; 本试验从小金海棠(Malus xiaojinensisensis)中克隆得到2个具有CDS全长的ferritin基因(1182bp和940bp)和4个具有CDS片段的ferritin基因(934bp、594bp、1070bp和834bp)。序列分析表明它们均具有真核生物铁蛋白保守区(Euk_Ferritin)这一典型的植物铁蛋白结构特征。预测蛋白质相对分子量在21.58kDa和34.32kDa之间。进化树分析表明小金海棠的ferritin基因与梨的ferritin基因在同一进化分支上。根据qPCR和半定量RT-PCR结果,可将小金海棠ferritin基因的时间表达模式划分为早期表达型(MxFer1)、晚期表达型(MxFer2)、组成表达型(MxFer6)和波动表达型(MxFer3-5);就组织部位而言,MxFer1的表达具有组织特异性,只在叶中特异表达,而MxFer2-6在根和叶中均有表达。; 卢彬彬王忆殷丽丽张新忠韩振海; 关键词：铁蛋白克隆小金海棠

苹果砧木中砧1号茎尖离体保存研究被引量：3: 2011年; 为了建立苹果砧木中砧1号茎尖离体保存技术,以M9和富士为对照,研究了培养基中添加不同浓度蔗糖或生长抑制剂对试管苗生长速率的影响以及包埋干燥法和玻璃化法预处理对试管苗茎尖超低温保存效果的影响。结果表明,不添加生长抑制剂,蔗糖浓度为20 g·L-1时,中砧1号试管苗离体保存效果比较好。常规培养基(蔗糖浓度30 g·L-1)中添加5 mg·L-1 CCC、0.1 mg·L-1 ABA或60 mg·L-1 B9,也可以达到相同的效果。用包埋干燥法和PVS3玻璃化液预处理,中砧1号超低温保存后的茎尖再生率较高。综合上述结果,中砧1号低温保存的适宜条件为培养基中蔗糖浓度20 g·L-1;超低温保存的适宜条件为包埋干燥法预培养蔗糖浓度0.3 mol·L-1,包埋干燥时间4 h。; 韩沙沙王忆张新忠韩振海; 关键词：苹果砧木离体保存超低温保存

小金海棠、番茄和葡萄缺铁应答反应调控机制的比较研究被引量：1: 2011年; 选取了3种铁高效园艺作物,木本小金海棠,藤本葡萄‘SO4’,草本番茄‘合作906’,对其缺铁应答反应机制进行了分析和比较。结果发现,3种植物中缺铁处理都可以诱导Fe3+还原酶活性升高及根际pH下降;但在缺铁加去顶双重处理时,除番茄Fe3+还原酶活性升高和根际pH下降外,苹果和葡萄没有变化,说明苹果和葡萄中缺铁应答反应的调控有赖于地上部系统信号的存在,而番茄中根系局部信号至少能够触发缺铁应答反应。分根处理表明,在苹果和番茄中部分根系缺铁可导致非缺铁根系产生缺铁应答反应,而葡萄中没有缺铁应答反应,说明苹果和番茄中系统信号可以诱发缺铁应答反应,而葡萄可能需要系统信号和根系局部信号的共同作用。研究还发现,缺铁可诱导苹果和番茄根毛的形成,葡萄则没有。以上结果表明,不同的物种缺铁应答反应的调控机制可能不同。; 肖大双李童音查倩卢彬彬邱昌朋贾文锁张新忠王忆韩振海; 关键词：小金海棠葡萄番茄系统信号

苹果属山荆子MbNramp1基因克隆、序列与表达分析被引量：4: 2010年; 以苹果属山荆子为试材,根据Nramp1同源序列保守区设计两对简并引物进行PCR,结合RACE技术获得了3'末端和5'末端片段,将3段片段序列拼接,根据拼接序列获取了MbNramp1基因全长cDNA序列。MbNramp1cDNA长2090bp,包含一个长度为1656bp的开放阅读框,编码551个氨基酸的多肽,分子量约为59.7kD。该基因编码的蛋白是一个膜蛋白,76%以上的氨基酸为非极性。MbNRAMP1与二价铁、锰转运蛋白NRAMP基因家族保守性很高,具有NRAMP1金属转运蛋白家族基因典型特征,即含有推断的N–端相连的糖基化位点、10个预测的跨膜结构域(TMs),在第6和第7跨膜结构域间有一个相同的转运基序(CTM)。低铁胁迫时MbNramp1在根中表达量增加。; 肖海华印莉萍韩振海; 关键词：山荆子

酵母异源互补法鉴定MbNramp1基因的功能: 2010年; 【目的】研究MbNramp1基因的功能。【方法】通过异源互补试验鉴定该基因转运铁的功能,并对MbNRAMP1蛋白进行亚细胞定位研究。【结果】MbNramp1基因转化酵母突变株DDY4在缺铁的培养基上恢复生长。在供试BPDS浓度的培养基上,MbNramp1基因转化酵母突变株DDY4生长状况均明显好于空载体转化后的突变株。培养基中BPDS增加到15μmol·L-1时,转化了MbNramp1的酵母细胞生长状况与野生型相差无几。在30μmol·L-1BPDS时,MbNramp1转化的细胞与低浓度BPDS相比生长延缓,但是明显优于空载体转化的DDY4突变株。与较低浓度BPDS相比,野生型酵母(DY1457)的生长量也减少了。亚细胞定位表明,MbNRAMP1主要位于部分质膜上而非整个膜上。【结论】初步证明MbNramp1编码具有功能的铁转运蛋白,能够使酵母吸收铁的突变株恢复突变,MbNRAMP1主要位于部分细胞膜上行使铁营养转运功能。; 肖海华印莉萍韩振海; 关键词：铁亚细胞定位

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