广东省自然科学基金(04020438)
- 作品数：12 被引量：37H指数：4
- 相关作者：陆晓和袁伟宫玉波张永强周瑾更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医科大学南方医院济南军区青岛第一疗养院更多>>
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- CD25单克隆抗体对大鼠角膜移植术后房水中细胞因子表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的研究CD25单克隆抗体对大鼠角膜的毒性以及对同种异体大鼠角膜移植后房水中细胞因子的影响,探讨其对大鼠角膜移植免疫排斥反应的防治效果。方法①将12只SD大鼠随机分为生理盐水对照组、50μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、100μg CD25单克隆抗体结膜下注射组、200μg CD25单克隆抗体结膜下注射组,每组3只。各组大鼠均右眼用药,分别于0、2、4、6、8 d结膜下注射生理盐水及不同剂量的CD25单克隆抗体,共5次。每日行裂隙灯显微镜检查,观察角膜有无水肿、混浊发生,并于第9天取右眼角膜行病理及透射电镜观察角膜各层的变化。②以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体建立角膜移植实验模型。将93只SD大鼠随机分为五组,A组:正常组;B组:角膜移植对照组;C组:CD25单克隆抗体治疗组;D组:CD25单克隆抗体联合地塞米松治疗组;E组:地塞米松治疗组。B组术后给予生理盐水;C组术后给予CD25单克隆抗体100μg;D组术后给予CD25单克隆抗体100μg联合地塞米松50μg治疗;E组术后给予地塞米松100μg;各共用5次,分别于术后0、2、4、6、8 d经球结膜下注射给药。用裂隙灯观察移植排斥情况。利用逆转录-多聚酶链反应检测植片内IFN-γmRNA的表达,酶联免疫吸附法检测房水中IFN-γ和IL-4的浓度。结果①50μg CD25单克隆抗体和100μg CD25单克隆抗体对角膜基本无影响;200μg的CD25单克隆抗体组透射电镜检查发现角膜基质细胞及内皮细胞有不同程度的肿胀。②C、D、E组发生排斥反应时间分别为(13.167±1.169),(17.333±2.160),(16.417±1.379)d较B组发生排斥反应时间(10.583±1.084)d明显延迟,差异有统计学意义(P<0.05)。正常角膜无IFN-γmRNA的表达,术后11天,B组移植角膜植片内IFN-γmRNA的表达较C、D、E组明显增强(P<0.05)。C、D、E组术后6 d及11 d房水IFN-γ的含量明显低于同期的B组(P<0.05);同C组相比,术后11d D、E组房水IFN-γ的含量�
- 宫玉波陆晓和柯晓云周瑾袁伟汤明芳罗晓阳崔国华
- 关键词：CD25单克隆抗体细胞因子角膜移植
- 基因治疗与角膜移植免疫耐受
- 2006年
- 张永强陆晓和
- 关键词：高危角膜移植基因治疗技术移植免疫耐受术后免疫排斥反应移植免疫排斥反应免疫学技术
- γ-干扰素、白细胞介素4与CD25在角膜移植免疫排斥反应中的作用被引量：8
- 2008年
- 目的:角膜移植免疫排斥反应是一个多因素参与的调节过程,近年来研究表明细胞因子在角膜移植免疫中起重要作用。实验拟验证γ-干扰素、白细胞介素4及CD25在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法:①实验于2006-10/2007-05在南方医科大学南方医院实验动物中心完成。选用Wistar大鼠24只,SD大鼠54只,实验方法符合动物伦理学要求。②将54只SD大鼠按随机数字表法分为3组,正常组6只,角膜移植组及地塞米松组均24只。后两组制备Wistar→SD角膜移植大鼠模型,受体选择右眼手术,供体提供双眼角膜。③用裂隙灯观察移植排斥情况;利用反转录-聚合酶链反应检测植片内γ-干扰素、CD25mRNA的表达;应用酶联免疫吸附实验检测房水和血清中γ-干扰素、白细胞介素4含量;应用流式细胞术检测移植前后不同时相外周血淋巴细胞CD25的表达;术后第11天,应用免疫组织化学方法检测角膜CD4+,CD8+和CD25+T细胞的表达。结果:54只SD大鼠全部进入结果分析。①地塞米松组大鼠发生角膜移植排斥反应的时间长于角膜移植组(P=0.000)。②正常角膜植片无CD25、γ-干扰素mRNA表达,角膜移植组术后第11天角膜植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达较地塞米松组增强(P<0.05)。③角膜移植组角膜移植术后6,11d血清γ-干扰素含量高于正常组(P<0.05);术后11d含量高于术后6,24d(P<0.01);地塞米松组术后6,11d低于同期角膜移植组(P<0.05)。④角膜移植组角膜移植术后6,11,24d房水γ-干扰素、白细胞介素4含量均高于正常组(P<0.05);地塞米松组术后6,11d均低于同期角膜移植组(P<0.05～0.01)。⑤地塞米松组术后6,11d外周血CD3+CD25+T/CD3+T比值低于同期角膜移植组(P<0.05)。⑥术后第11天角膜移植组植片内CD4,CD8及CD25明显表达,地塞米松组CD4,CD8及CD25表达明显减弱。结论:CD25、γ-干扰素和白细胞介素4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的�
- 宫玉波陆晓和周瑾袁伟柯晓云崔国华
- 关键词：角膜移植干扰素类白细胞介素4移植免疫
- 青藤碱防治角膜移植排斥反应的实验研究被引量：9
- 2005年
- 目的观察青藤碱滴眼液对大鼠穿透性角膜移植术后急性排斥期免疫排斥反应的影响。方法建立Wistar→SD大鼠同种异体穿透性角膜移植动物模型,受者随机分为生理盐水对照组(A组),0.5%SIN(B组),1%SIN(C组),2%SIN(D组),术后连续观察,并对各组大鼠角膜植片存活情况和排斥反应指数进行评分比较,评价药效。结果术后各组角膜移植排斥指数及发生角膜移植排斥时间,A组与B组,A组与C组,A组与D组,B组与C组,C组与D组比较差异均有显著性(P均<0.05);B组与D组比较差异无显著性(P>0.05)。结论SIN滴眼液可以有效的防治角膜移植免疫排斥反应,1%SIN滴眼液更有效。
- 姚建兵陆晓和
- 关键词：青藤碱角膜移植排斥反应
- IL-1RA对急性排斥期大鼠角膜移植物TRAIL及其受体DR_4表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)对急性排斥期角膜移植物肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体-4(DR4)表达的影响。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,设生理盐水处理组和IL-1RA治疗组。免疫组织化学法检测急性排斥期角膜植片TRAIL及DR4表达,并以正常大鼠角膜作对照。结果TRAIL及DR4在正常角膜均有表达,主要分布于上皮层。急性排斥期角膜植片各层TRAIL及DR4 表达均增高;与IL 1RA治疗组相比,生理盐水处理组TRAIL及DR4表达增高更明显。结论TRAIL及DR4的表达参与角膜移植免疫排斥反应的发生,IL-1RA可通过调节其表达抑制角膜移植免疫排斥反应。
- 袁伟陆晓和张永强宫玉波彭小娟
- 关键词：IL-1RADR4移植免疫排斥反应角膜植片正常角膜
- 转基因技术在器官移植中的应用被引量：1
- 2005年
- 余洪华陆晓和张永强
- 关键词：转基因技术器官移植靶细胞急性排斥反应免疫抑制药
- 1型重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因转染人脐静脉内皮细胞的体外研究被引量：2
- 2008年
- 目的评价1型重组腺相关病毒(rAAV1)作为新生血管性角膜病变基因治疗载体的可行性。方法rAAV1-EGFP按转染倍数(MOI)5×103,5×104,5×105转染ECV304细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察ECV304细胞中GFP阳性表达情况和细胞生长形态特点等,流式细胞仪检测rAAV1-EGFP对EVE304细胞的转染效率。MTT法检测rAAV1-EGFP对EVC304细胞增殖的影响。结果转染后2d,MOI=5×105组细胞中的GFP开始表达;表达强度随MOI值的增高而增强,同时GFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强,转染后第7天达到高峰,此时流式细胞仪检测rAAV1-EGFP对ECV304细胞的转染率分别为45.90%(MOI=5×103),58.56%(MOI=5×104),68.31%(MOI=5×105)。AAV1-EGFP转染ECV304细胞后,细胞生长及形态正常,MTT法显示转染后72、96h各转染组与未转染组之间A值无显著性差异。结论rAAV1-EGFP对ECV304细胞转染稳定、有效,重组腺相关病毒对细胞增殖无明显抑制,重组腺相关病毒可作为基因治疗角膜新生血管性病变的载体。
- 汤明芳陆晓和高基民钟彦彦罗微周明乾
- 关键词：腺相关病毒绿色荧光蛋白基因脐静脉内皮细胞
- ICOS共刺激通路参与角膜移植免疫排斥反应的研究被引量：6
- 2009年
- 目的研究可诱导共刺激分子(ICOS)共刺激通路与角膜移植急性免疫排斥反应的关系。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,分别于术后7d、14d取植片进行病理学观察,采用RT-PCR法检测植片组织ICOS mRNA的表达情况,免疫组织化学法检测植片组织淋巴细胞ICOS蛋白水平;同时采用流式细胞术检测外周血CD3+ICOS+T/CD3+T的表达情况。均以正常大鼠作为正常对照。结果正常大鼠角膜组织未检测到ICOS蛋白及ICOS mRNA的表达,移植术后植片组织可以检测到ICOS蛋白及ICOS mRNA的表达,且术后14d高于术后7d(P=0.000);与正常大鼠外周血CD3+ICOS+T/CD3+T的表达相比术后表达皆升高(方差齐性,P=0.156),且术后14d外周血CD3+ICOS+T/CD3+T的表达高于术后7d的表达(P=0.000)。结论共刺激分子ICOS与角膜移植急性免疫排斥反应密切相关。
- 袁伟陆晓和宫玉波周瑾杨旭冉汤明芳
- 关键词：角膜移植排斥反应可诱导共刺激分子
- 正常大鼠角膜组织TRAIL及其受体DR4的表达及意义
- 2005年
- 目的观察大鼠角膜组织肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)及其死亡受体4(deathreceptor4,DR4)的表达及分布情况,分析其临床意义。方法取正常大鼠角膜组织片,采用免疫组织化学方法检测TRAIL及其受体DR4在角膜组织中的表达状况。结果在正常角膜组织中TRAIL及其受体DR4均有表达,主要分布于上皮层及内皮层,基质层也有少量表达。结论正常大鼠角膜组织中有TRAIL及其受体DR4的表达。
- 袁伟陆晓和张永强宫玉波彭小娟
- 关键词：角膜组织正常大鼠DR4组织片内皮层
- IL-1ra和CsA对大鼠角膜移植物TRAIL及DR4表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的比较研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)和环孢素A(CsA)对急性排斥期角膜移植物肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体4(DR4)表达的影响。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,设生理盐水处理组、CsA治疗组和IL-1ra治疗组。免疫组织化学法检测急性排斥期角膜植片TRAIL及DR4的表达,并以正常大鼠角膜作为对照。结果TRAIL及DR4在正常角膜中均有表达,主要分布于上皮层,基质层及内皮层有少量表达。急性排斥期角膜植片各层TRAIL及DR4表达均增高;与正常大鼠相比,生理盐水组TRAIL及DR4蛋白表达增高最为明显,CsA组次之,IL-1ra组TRAIL及DR4蛋白表达轻度增高。结论IL-1ra、CsA均可通过调节TRAIL及DR4的表达抑制角膜移植排斥反应,且IL-1ra的效果优于CsA。
- 袁伟陆晓和张永强柯晓云宫玉波黄淑馨
- 关键词：白细胞介素-1受体拮抗剂角膜移植肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
