国家自然科学基金(30860071)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：王爱英祝建波沈海涛冯玉杰彭晓明更多>>
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- 新疆甜瓜高效再生体系的建立及NPR1/HRP双价抗病基因转化被引量：3
- 2011年
- 以厚皮甜瓜5d龄无菌苗子叶为外植体,MS和1/2MS为基本培养基,研究了添加6-BA、IAA和卡那霉素不同浓度,进行甜瓜再生体系与根癌农杆菌介导的转化体系的建立。结果表明:甜瓜子叶最适宜的不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.3mg/L,芽伸长培养基为MS+6-BA 0.75mg/L+IAA 0.3mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.3mg/L,适宜的转化条件为外植体预培养48h,农杆菌菌液浓度为OD_(600)=0.3～0.4,侵染时间为15min,22℃暗培养48～55h。经75mg/L的卡那霉素筛选,共获得再生甜瓜幼苗21株,其中8棵经PCR鉴定证明NPR1/HRP双价抗病基因已经整合到甜瓜基因组中,即转化率为38%。
- 冯玉杰王爱英沈海涛祝建波
- 关键词：甜瓜农杆菌介导
- HRAP基因诱导型植物表达载体的构建及烟草转化被引量：2
- 2009年
- 系统获得性抗性是植物抵御病菌侵染的一种独特的防御机制。HRAP基因是一种从甜胡椒中克隆的蛋白质激发子,可以有效引发植物系统性抗性。SAR8.2b基因是烟草系统获得性抗性信号传导途径中下游响应基因,受病原物和水杨酸诱导。本试验根据Genebank发布SAR8.2b基因的启动子序列,利用PCR技术,克隆了SAR8.2b基因的完整启动子,命名为SAR8.2bP,然后将SAR8.2bP构建到pUC18-HRAP载体中命名为pUC18-SAR8.2bP-HRAP,然后用SAR8.2bP-HRAP替换p2300-121载体中的35S启动子和GUS基因,重组子命名p2300-SAR8.2bP-HRAP。将构建的植物表达载体转化农杆菌GV3101,利用叶盘法转化烟草,通过PCR筛选,获得了转基因植株。为进一步验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础。
- 王爱英缪建锟彭晓明沈海涛祝建波
- 关键词：系统获得性抗性转基因烟草
