黑龙江省科技攻关计划(GB05B104)
- 作品数：9 被引量：70H指数：5
- 相关作者：朱延明崔杰李滨胜王冬冬盛慧更多>>
- 相关机构：哈尔滨工业大学东北农业大学黑龙江省森林植物园更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 甘蔗全长丙酮酸磷酸二激酶(PPDK)基因的克隆被引量：1
- 2007年
- 和C3植物相比,C4植物具有明显的生长优势及水分和营养利用率,生物产量也较高。甘蔗是典型的C4作物之一。以甘蔗叶片提取的基因组DNA为模板,以GenBank公布的甘蔗PPDK基因cDNA序列设计引物,进行LA-PCR(Long Acute PCR)扩增。将PCR产物克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109,测序,得到了13.5kb的甘蔗全长PPDK基因序列。为方便后续实验,在引物中引入可利用的XhoI和NotI酶切位点,将全长PPDK基因分两段克隆到pMD18-TSimple载体中,转化大肠杆菌JM109,完成了甘蔗全长丙酮酸磷酸二激酶(PPDK)基因的完整克隆,为将其导入C3作物中奠定了研究基础。
- 杨福明徐德昌侯爱菊
- 关键词：甘蔗
- 苜蓿高效再生体系的建立被引量：2
- 2007年
- 以黑龙江主栽苜蓿品种肇东苜蓿、敖汉苜蓿、公农1号苜蓿、公农2号苜蓿为受体材料,分别研究了外植体类型对不定芽分化的影响,基因型、PGRs的不同配比对子叶节不定芽分化的影响,并确定了芽分化、芽伸长及再生植株生根时的最佳培养基。结果表明,当BA浓度为1.0mg/L时最适于子叶节的分化;当BA浓度为0.5mg/L时植株生长最佳。芽分化培养基为:MS+1.0mg/L BA,30g/L蔗糖,0.8%琼脂,pH5.8;芽伸长培养基为:MS+0.5mg/LBA,30g/L蔗糖,0.8%琼脂,pH5.8;再生植株生根培养基为:MS+1.5mg/L IBA,15g/L蔗糖,0.8%琼脂,pH5.8。
- 柏锡盛慧王冬冬李杰朱延明
- 关键词：植株再生体系不定芽分化基因型
- DREB2A基因对苜蓿遗传转化的研究被引量：28
- 2007年
- 以黑龙江紫花苜蓿Medicago sativa主栽品种:肇东苜蓿、敖汉苜蓿、公农1号和公农2号为受体材料,系统地探讨了除菌剂种类和浓度以及卡那霉素筛选浓度等,建立了高效的苜蓿再生体系和遗传转化体系;分别构建了由诱导型启动子rd29A和组成型启动子E12调控的DREB2A基因的2个植物表达载体pB2A29A和pB2AE12;采用农杆菌介导法进行遗传转化,获得大量转基因抗性植株并进行了分子生物学(PCR和Southern blot)检测。结果表明,DREB2A基因已整合到苜蓿基因组中。
- 盛慧朱延明李杰柏锡才华
- 关键词：苜蓿农杆菌介导转基因植株
- 植物甜菜碱醛脱氢酶基因工程研究进展被引量：8
- 2006年
- 对近年来研究较多,在植物甜菜碱合成中起关键作用的酶—甜菜碱醛脱氢酶(BADH)及其基因工程研究进展从不同角度进行了综述及分析,讨论了其基因工程研究的意义。
- 崔杰李滨胜史淑芝鲁兆新
- 关键词：植物甜菜碱醛脱氢酶基因工程抗逆性
- 酵母单杂交系统在植物抗渗透胁迫转录因子研究中的应用被引量：3
- 2007年
- 酵母单杂交系统是由酵母双杂交系统衍生来的研究DNA与蛋白质之间相互作用的新型系统。系统阐述了单杂交系统的基本原理和技术路线,详细综述了其在植物抗渗透胁迫转录因子各个研究领域的应用进展,即克隆抗渗透胁迫类转录因子基因,确定已知DNA蛋-白质的相互作用,定位已证实的具有相互作用的DNA结合结构域以及验证转录激活作用。分析了当前该系统在植物抗渗透胁迫转录因子研究中存在的问题,进而对解决问题的途径进行了探讨。
- 王琪朱延明王冬冬
- 关键词：酵母单杂交系统植物渗透胁迫DREB
- 酵母单杂交系统在植物基因工程研究中的应用被引量：10
- 2008年
- 酵母单杂交系统是由酵母双杂交系统衍生来的研究DNA与蛋白质之间相互作用的新型系统。该文系统阐述了单杂交系统的基本原理和技术路线,详细综述了其在植物基因工程各个领域的应用研究进展,即克隆抗渗透胁迫类转录因子基因,确定已知DNA与蛋白质之间的相互作用,定位已证实的具有相互作用的DNA结合结构域以及验证转录激活作用;并分析了当前该系统在植物基因工程研究中存在的问题,进而结合自己的研究对解决问题的途径进行了探讨。
- 王琪朱延明王冬冬
- 关键词：酵母单杂交植物基因工程DNA结合结构域
- 甜菜种质资源耐盐性筛选被引量：8
- 2008年
- 利用0、100mM、200mM、300mM、400mM浓度的NaCl处理两份血缘关系较远的甜菜二倍体材料,结果表明:068(代号1)材料芽期耐盐性较强,自300mM始对甜菜种子发芽具有明显的抑制作用;抗1(代号2)材料耐盐性较弱,自200mM始对甜菜种子发芽具有明显的抑制作用,且用400mM处理的病芽率也达极显著水平。利用甜菜对盐敏感临界浓度300 mM对14份二倍体材料进行抗盐筛选,其中,代号1、3、8、12四份材料为抗盐胁迫种质,其它材料为盐胁迫敏感型种质。
- 史淑芝崔杰鲁兆新程大友罗成飞
- 关键词：甜菜种质盐胁迫相对发芽率
- 甜菜叶绿体基因组研究进展被引量：2
- 2008年
- 对植物叶绿体基因组的特征、叶绿体编码基因以及叶绿体基因转化、甜菜叶绿体基因组研究现状及其编码基因研究等内容进行了介绍和评述。并对基于甜菜叶绿体基因工程作为遗传育种及生物反应器研究进行了探讨。
- 李滨胜崔杰吴永英
- 关键词：甜菜叶绿体基因组
- 甜菜(Beta vulgaris L.)叶绿体转化体系建立及抗虫和抗除草剂植株的获得被引量：8
- 2008年
- 为建立外源基因甜菜叶绿体转化体系,利用分子生物学方法构建了包含有编码苏云金芽孢杆菌晶体蛋白基因Btcry1Ac和编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar的甜菜叶绿体转化载体pSKARBt/bar,以甜菜叶绿体基因组中atpB/rbcL做同源片段,以甜菜叶绿体16S启动子和终止子为调控基因,以bar基因为筛选标记基因.基因枪法转化甜菜叶柄,经筛选获得抗性转基因植株.对转基因植株进行外源基因Btcry1Ac和bar的PCR检测、DNA印迹分析,结果表明:外源基因Btcry1Ac和bar确已导入到甜菜叶绿体基因组中.转基因植株除草剂抗性鉴定及其离体叶片虫试鉴定结果表明:转基因植株具有较强的杀虫活性和抗除草剂特性,表达了相应的蛋白质.研究结果还表明:bar基因在植物叶绿体转化中,既可以用作抗性基因,又可用作转化体筛选的标记基因.建立了甜菜叶绿体转化体系.
- 崔杰李滨胜杨谦程大友
- 关键词：甜菜叶绿体转化BAR基因同质化
