国家自然科学基金(30572069)
- 作品数：17 被引量：41H指数：4
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- ER-β基因RNA干扰重组表达载体的构建及鉴定
- 2007年
- 目的:构建针对人雌激素受体-β(estrogen receptor-β,ER-β)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达载体质粒。方法:根据GeneBank数据库提供的ER-β基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡结构RNA的DNA序列,将此双链DNA片段克隆至载体pSilencer3.1-H1-neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,提取质粒进行序列测定。结果:经测序证明与设计的相同,获得人ER-β基因的siRNA表达载体质粒。结论:成功构建了针对ER-β基因的RNA干扰重组表达载体,为下一步ER-β基因的RNA干扰奠定了基础。
- 梁莉丁寅余继锋王燕杜锐王光
- 关键词：ER-ΒRNA干扰质粒小干扰RNA
- 雌激素受体基因多态性与慢性牙周炎相关性研究被引量：8
- 2010年
- 目的探讨雌激素受体基因多态性与陕西地区慢性牙周炎易感性的关联。方法收集陕西地区109例慢性牙周炎患者和99例牙周健康对照组的颊黏膜拭子,用Chelex-100方法提取全基因组DNA,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测雌激素α和β受体基因型分布。结果慢性牙周炎组与正常对照组在ER-α受体XbaⅠ基因型分布上有统计学差异,慢性牙周炎组XX型基因频率明显高于正常对照组,尤其在女性患者中此差异显著,男性患者中未见不同;ER-β受体RsaⅠ和AluⅠ基因型在患者组与对照组中分布未见差异。结论慢性牙周炎易感性与雌激素XbaⅠ基因型分布相关,汉族女性群体中ER-α受体XX基因型可能为慢性牙周炎的易感因子。
- 张璇龙铟李红燕李晓娟丁寅
- 关键词：雌激素Α受体雌激素Β受体基因多态性慢性牙周炎
- 雌激素受体β对牙周膜成纤维细胞RANKL表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament,HPLF)核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表达的影响。方法:采用基因干涉方法抑制了HPLF细胞中ERβ基因的表达,用雌激素干预ERβ抑制的和未抑制的HPLF细胞,研究细胞RANKL表达的情况。结果:雌激素明显降低了ERβ抑制的HPLF细胞RANKL的表达,但对ERβ未抑制的HPLF细胞RANKL的表达没有显著影响。结论:雌激素可能通过ERβ抑制牙周膜成纤维细胞RANKL的表达。
- 梁莉周威余继锋丁寅
- 关键词：牙周膜成纤维细胞
- 不同周龄大鼠骨髓基质干细胞成骨与成脂分化平衡的研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究不同周龄大鼠骨髓基质干细胞成骨与成脂肪能力。方法不同周龄(幼年组:2周,成年组:3个月,老年组:18个月)大鼠骨髓基质干细胞原代培养,成骨诱导分化,矿化结节染色,计算矿化率。成脂肪诱导分化,显微镜下观察脂肪滴及检测油红-O染色阳性细胞率。结果全骨髓细胞贴壁的方法得到大鼠骨髓基质干细胞,幼年组成骨分化的矿化率最高,老年组最低。成脂肪诱导油红-O染色阳性率老年组最高,幼年组最低。结论随着年龄的增长骨髓基质干细胞成骨能力减弱,成脂肪能力增强。
- 郑红丁寅马佳
- 关键词：骨髓基质干细胞成骨分化成脂肪分化
- Correlation of estrogen receptor alpha gene polymorphisms and bone mineral density in Chinese women with chronic periodontitis被引量：2
- 2010年
- ZHANG XuanDAI JuanLONG YinWU HaoLI Xiao-juanDING Yin
- 关键词：雌激素受体Α骨密度仪限制性片段长度多态性基因组DNA提取
- 雌激素受体β基因小干扰RNA表达载体的构建及表达研究被引量：2
- 2007年
- 目的构建针对人雌激素受体(estrogen receptor,ER)β基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达载体,转染人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast cells,HPLFs)后观察其对ER-β基因表达的抑制作用。方法设计并合成针对ER-β基因siRNA的寡核苷酸序列,插入载体pSilencer3.1-H1-neo中形成重组载体。重组载体经测序鉴定后转染HPLFs,western blot检测转染前后ER-β蛋白的表达情况。结果测序结果与所合成的寡核苷酸完全一致,证实成功构建了针对ER-β基因的siRNA表达载体。Western blot检测显示转染HPLFs后可使其ER-β蛋白表达显著下调。结论针对ER-β基因的siRNA表达载体成功构建,并能有效抑制HPLFs中ER-β基因的表达。
- 梁莉丁寅王燕杜锐余继锋马兆峰
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA牙周膜成纤维细胞
- 骨质疏松大鼠正畸牙齿移动模型中牙根吸收的比较研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察骨质疏松大鼠牙齿移动模型中,牙根吸收与体内雌激素水平的关系。方法 45只2个月龄雌性SD大鼠随机分为3组,每组15只,分别接受卵巢切除术,卵巢切除术后补充雌激素和假卵巢切除术处理,待骨质疏松模型建立后,3组大鼠均在上颌第一磨牙和切牙之间安置拉簧,力值0.784 N,分别于加力后的第5天、第10天和第14天各组处死5只大鼠,取上颌第一磨牙处标本制作切片,苏木精-伊红染色,处死前取血测定体内雌激素水平。结果各组标本均可观察到牙根吸收现象,而且在骨质疏松组更为普遍,程度也更重。结论骨质疏松时,正畸牙根吸收具有更大的风险性,体内雌激素水平的高低是影响正畸牙移动时,牙根吸收的一个重要因素。
- 张娟王兴杨乐王维佳丁寅
- 关键词：骨质疏松雌激素牙齿移动牙根吸收SD大鼠
- 人牙周膜干细胞雌激素受体表达检测的实验研究被引量：6
- 2008年
- 目的:检测体外分离纯化的人牙周膜干细胞(PDLSCs)是否有雌激素受体(ER)表达。方法:采用免疫细胞化学染色、Western blot、RT-PCR技术检测PDLSCs中雌激素受体ER-α、ER-β的表达。结果:免疫细胞化学检测显示ER-α、ER-β在牙周膜干细胞内均呈棕黄色阳性染色,定位于细胞核;Western blot与RT-PCR测定结果显示,PDLSCs中ER-α及ER-β表达高于相同来源的牙周膜细胞,PDLSCs中ER-α表达高于ER-β,且在雌激素作用下ER-α及ER-β表达均增加。结论:体外分离纯化的PDLSCs中存在雌激素受体(ERα、ERβ)的表达,且受雌激素的调控。
- 潘峰丁寅张瑞倪华
- 关键词：干细胞牙周膜干细胞雌激素雌激素受体
- 大鼠正畸牙齿在不同骨转换率下牙周组织变化被引量：1
- 2012年
- 目的:研究在不同骨转换率的条件下,大鼠牙齿移动过程中,牙周组织形态的变化。方法:健康成年雄性威斯塔大鼠30只,体重180～220 g。随机分成3组:高骨转换率组,低骨转换率组,正常对照组。高骨转换率组将甲状腺片研末,0.9%氯化钠注射液配制成2 mg/mL混悬液。每只大鼠2 mL/d灌胃。低骨转换率组动物1%丙硫氧嘧啶2mL/d灌胃,对照组蒸馏水2 mL/d灌胃。20 d后,大鼠麻醉下加力,加力21 d后处死。组织学切片,HE染色,光镜下观察。结果:各组对照侧牙周膜排列整齐,牙槽骨表面破骨细胞少见。没有明显成骨及破骨现象,张力侧成骨细胞、成纤维细胞,功能旺盛;压力侧破骨细胞增多,成纤维细胞,间充质细胞、活跃的巨噬细胞增多。高骨转换率组表现更强的组织反应性。结论:高骨转换率能增加牙周组织反应,有利于正畸牙齿的移动。
- 郑红李静丁寅
- 关键词：骨转换率牙齿移动牙周组织
- 体外培养人牙周膜成纤维细胞雌激素受体表达的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察雌激素受体在体外培养的人牙周膜成纤维细胞中的表达,为探讨雌激素对牙周组织的作用提供依据。方法用免疫细胞化学法对原代细胞爬片雌激素受体(estrogenreceptors,ER)-α、β行 SABC 染色;用反转录聚合酶链反应法检测 ER-α、ER-β mRNA 在人牙周膜成纤维细胞中的表达;用 Western blot 法检测 ER-α、ER-β蛋白的表达。结果 ER-α和 ER-β在人牙周膜成纤维细胞中均有表达,ER-β表达强于 ER-α。分别计算 ER-α、ER-β对应蛋白条带灰度值与内参β-肌动蛋白条带灰度值的比值,得到 A 组细胞 ER-α、ER-β相对灰度值的均值为(0.80±0.08)和(1.05±0.11),B 组细胞则为(0.95±0.09)和(1.13±0.10),ER-α和 ER-β相比差异有统计学意义(P<0.05),说明 ER-β的条带较 ER-α对应的蛋白条带浓,即 ER-β蛋白的相对丰度大于 ER-α。但对于同一受体亚型,无论是 ER-α或 ER-β,A、B 组间蛋白条带灰度值差异均无统计学意义(P>0.05),说明雌激素非处理组和经雌激素处理组在 ER 蛋白表达水平上无明显差异。结论雌激素可能通过其受体 ER-α、ER-β对人牙周膜成纤维细胞的生物学性状产生影响。
- 曹猛丁寅束嫘李嘉张伟郭涛
- 关键词：受体雌激素成纤维细胞逆转录聚合酶链反应
