山东省自然科学基金(Y2001D07)
- 作品数：4 被引量：19H指数：3
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- 鸡IFN-α基因的多点突变及其在毕赤酵母中的高效表达
- 2008年
- 根据毕赤酵母基因的密码子选择偏爱性,在不改变其编码的氨基酸序列的前提下,对鸡IFN-α序列进行PCR介导的定点突变优化,将鸡IFN-α成熟肽序列中136～143位相近的4个Arg密码子和N端的6个稀有密码子突变为毕赤酵母高表达优越密码子,构建了含正确突变和未突变序列的克隆载体pMD-IFNm、pMD-IFN和酵母表达载体pPICZ-IFNm、pPICZ-IFN,电击转化毕赤酵母X-33菌株,经筛选、鉴定表明鸡IFN-α基因已整合到酵母基因组中。通过表达产物的抗病毒活性测定,筛选出突变与未突变高表达酵母转化子各1株。经密码子优化的突变重组酵母菌株PP-IFNm于BMMY培养基中诱导72h上清中抗病毒活性单位可达410U/mL,其活性比未优化重组酵母株PP-IFN(48.33U/mL)提高了约10倍。
- 宋敏训吴静史玉颖汪明
- 关键词：基因多点突变毕赤酵母抗病毒活性
- 禽类干扰素及其基因工程研究进展被引量：9
- 2006年
- 干扰素是由干扰素诱生剂诱导生物细胞所产生的一类高活性多功能的糖蛋白。干扰素自被发现以来,由于其广谱抗病毒、抗肿瘤活性及其强大的免疫调节作用而受到研究者们的重视,在其基因结构、作用机理以及体外重组表达等方面都取得了巨大突破。作者综述了干扰素的基因结构、基因工程及重组干扰素的应用研究进展。
- 吴静李玉峰宋敏训黄兵马秀丽
- 关键词：干扰素基因基因表达
- 重组鸡α-干扰素对鸡外周血T淋巴细胞亚类的影响被引量：6
- 2006年
- 重组鸡α-干扰素（rChIFN-α）静脉注射4～6周龄SPF鸡,24 h后采血分离淋巴细胞,通过流式细胞术测定不同时间外周血中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞的百分率.结果显示,rChIFN-α可以在48～72 h内明显提高CD4^＋T淋巴细胞的百分率,并下词CD8^＋T淋巴细胞的百分率,证明rChIFN-α具有显著的免疫调节作用.
- 李玉峰吴静王春玲李峰宋敏训
- 关键词：CD4+T淋巴细胞CD8+T淋巴细胞免疫调节
- 鸡α-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及其抗病毒活性测定被引量：4
- 2006年
- 本试验将已构建的鸡α-干扰素重组酵母表达质粒pPIC-ChIFNα克隆至Pichia pastorisGS115基因组中,从阳性转化子中筛选出2株能高效表达鸡α-干扰素的重组酵母菌株,并对表达产物进行了纯化和抗病毒活性的测定。结果表明,Pichia pastoris表达的重组ChIFNα具有较高的抗病毒活性,其活性单位为570×104U/ml,结合蛋白定量计算其比活性为2 980×104U/mg。
- 吴静李玉峰宋敏训黄兵马秀丽李峰
- 关键词：PICHIAPASTORIS抗病毒活性
