国家自然科学基金(81100300)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：西安交通大学医学院第二附属医院第四军医大学唐都医院西安交通大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组双链及单链腺相关病毒介导Exendin-4表达效率的比较
- 2015年
- 比较双链腺相关病毒(Double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)及单链AAV(Singlestranded adeno-associated virus,ss AAV)介导Exendin-4分泌表达效率。应用基因工程方法构建ds AAV/p SSHG/Exendin-4,与重组ss AAV比较转染NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清Exendin-4浓度,免疫组化检测Exendin-4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功,测定重组ds AAV p SSHG/Exendin-4滴度为2.5×1011pfu,较重组ss AA滴度高(2.5×109pfu);ds AAV/p SSHG/GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强;ELISA法检测感染重组ds AAV的NIH3T3细胞上清中Exendin-4的浓度为181.1±8.75pmol/ml,较重组ss AAV分泌浓度(133.81±8.09pmol/ml)升高(P<0.05);重组ds AAV及ss AAV转染NIH3T3细胞Exendin-4表达均为阳性。重组ds AAV可分泌表达Exendin-4并较ss AAV具有更高效转染能力,为研究Exendin-4功能及应用于临床打下基础。
- 王俊红问姣董鹏张静焦杨郭永红
- 关键词：EXENDIN-4腺相关病毒
- Gremlin-1在原发性肝癌及肝硬化患者中的表达及意义被引量：4
- 2014年
- 目的检测Gremlin-1在原发性肝癌及肝硬化患者外周血单个核细胞(PBMC)及肝脏组织中的表达。方法收集2012年6-12月在第四军医大学唐都医院就诊的21例原发性肝癌及17例肝硬化患者血样,15名健康志愿者作为对照。采用RT-PCR技术检测PBMC中Gremlin-1的表达;免疫组织化学方法检测10例原发性肝癌肝组织中Gremlin-1的表达。组间比较采用ANOVA方差分析。结果 Gremlin-1在原发性肝癌及肝硬化患者PBMC中表达显著升高,分别为正常对照的3.5及4.4倍,与正常对照相比差异有统计学意义(P=0.003 4,0.002 6);Gremlin-1在肝癌患者肝组织中高表达,阳性率为72.5%,在正常肝组织中低表达或无表达,阳性率为12.1%,差异有统计学意义(P<0.001),Gremlin-1在高分化及低分化肿瘤表达差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学显示Gremlin-1主要表达在肝肿瘤细胞膜及细胞质,部分表达在血管内皮细胞、成纤维细胞等间质细胞。结论Gremlin-1的表达与肝硬化及原发性肝癌密切相关。
- 郭永红陈琳张颖贾晓黎翟松周云何瑜纪光晰贾战生
- 关键词：肝肿瘤肝硬化
- 利用PCR扩增及基因合成构建Adnectin半随机核糖体展示文库
- 2015年
- 目的构建Adnectin半随机的核糖体(mRNA)展示文库。方法分析Adnectin核糖体展示文库结构序列的编码氨基酸序列,利用无意突变建立酶切位点,使用PCR扩增和基因合成两种方法相结合,构建Adnectin半随机核糖体展示文库,通过限制性内切酶及DNA测序证实序列正确性,对文库转化菌的滴定和插入失活蓝白菌斑筛查和计数测定计算文库的库容。结果经测序证实文库结构的正确性,文库的库容为1.54×1013/m L。结论成功构建Adnectin半随机的核糖体展示文库,方法简单,库容量大,该文库的建成为亲和各种相关蛋白的Adnectin结合序列奠定基础。
- 郭永红问娇王俊红
- 关键词：PCR扩增基因合成
