国家自然科学基金(90201001)
- 作品数:8 被引量:21H指数:3
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- 鱼腥藻PCC7120细菌光敏色素缺失突变体的自催化重组研究被引量:1
- 2005年
- 采用聚合酶链式反应(PCR)从鱼腥藻PCC 7120 DNA中扩增出细菌光敏色素缺失突变体基因aphA(26-320)、aphA(27-320)、aphA(28-320)、aphA(29-320)和aphA(32-320),利用表达载体pET 30a进行高效表达,获得的A phA缺失突变体脱辅基蛋白在一定的反应体系下与藻蓝胆素进行了体外重组的研究。研究表明:A phA(26-320)体外重组获得的色素蛋白具有与植物光敏色素相似的可逆光致变色效应,同时酸性尿素变性实验和Zn2+荧光电泳实验显示藻蓝胆素和以上蛋白质发生共价连接。A phA(26-320)与藻蓝胆素重组产物的P r/P fr吸收峰处于660/610nm。其他4个缺失突变体,A phA(27-320)、A phA(28-320)、A phA(29-320)、A phA(32-320)和藻蓝胆素的重组产物中则没有发现可逆光致变色信号,表明这些缺失突变体不能和藻蓝胆素发生自催化重组。维系细菌光敏色素A phA与色素自催化连接的裂合酶结构域位于A phA(26-320)包含的肽链之中。
- 甘春晖冉勇赵开弘
- 关键词:细菌光敏色素缺失突变体体外重组
- 鱼腥藻PCC7120藻红蓝蛋白操纵子A、E和F基因的克隆、表达和活性分析被引量:3
- 2004年
- 通过PCR技术从鱼腥藻PCC712 0总DNA中扩增藻红蓝蛋白A基因 (pecA)、E基因 (pecE)、F基因 (pecF) ,将pecA、pecE、pecF分别克隆于pBluescript,然后将pecA、pecE、pecF基因分别插入表达载体pET30a进行高效表达。pecA表达产物藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白PecA与藻蓝胆素PCB在pecE/pecF表达产物裂合异构酶PecE/PecF催化下进行体外重组 ,产物经提纯后 ,用紫外可见吸收光谱和荧光光谱检测 ,结果表明生成的色素藻胆蛋白具有藻红蓝蛋白α 亚基所特有的光谱性质和可逆光致变色性质。
- 孙亚楠武栋周明赵开弘
- 关键词:鱼腥藻PCC7120藻红蓝蛋白操纵子体外重组
- 集胞藻PCC6803细菌光敏色素体外重组和光化学活性研究被引量:4
- 2004年
- 采用聚合酶链式反应 (PCR)从集胞藻PCC680 3总DNA中扩增出细菌光敏色素全片段cph1及cph1(C 43 5) ,克隆于pBluescriptSK(+ ) ,然后插入表达载体pET3 0a进行高效表达。获得的脱辅基蛋白Cph1、Cph1(C 43 5)在合适的缓冲体系下分别与藻蓝胆素 (PCB)进行体外重组。光化学研究表明 ,两种脱辅基蛋白都能与PCB进行正确的重组 ,重组产物表现出 650~ 70 0nm可逆光致变色效应。锌电泳证实得到的细菌光敏色素辅基色素为PCB 。
- 董依然冉勇赵开弘周明
- 关键词:集胞藻PCC6803细菌光敏色素体外重组光化学活性藻蓝胆素
- 层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基的固定化与光化学稳定性研究被引量:2
- 2004年
- 研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基(α PEC)的可逆光致变色活性的pH稳定性、热稳定性及耐疲劳性等光化学性质。将α PEC固定于琼脂糖、明胶、海藻酸钠和聚乙烯醇-海藻酸钠等不同载体上,检测了固定化α PEC在不同时间、不同可逆光致变色循环次数后的剩余光化学活性,经过对凝胶的机械强度,稳定性及制作工艺等的比较,发现琼脂糖是α PEC的一种较好的固定化载体。
- 王宇飞周明赵开弘冉勇
- 关键词:层理鞭枝藻藻红蓝蛋白Α亚基固定化藻胆蛋白包埋剂
- 藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白β亚基半胱氨酸的定点突变及体外重组研究被引量:10
- 2004年
- 为研究藻蓝蛋白 (PC)和藻红蓝蛋白 (PEC) β亚基 (分别简称为 β PC、β PEC)生物合成、结构与功能的关系 ,用MegaprimerPCR定点突变技术设计 β PC、β PEC中与藻蓝胆素连接的第二个半胱氨酸的定点突变蛋白质 β PC(C15 5I)和 β PEC(C15 5I)。将相应的基因片段亚克隆于表达载体pET 30a,并转化大肠杆菌BL2l(DE3)。经IPTG诱导后 ,β PC(C15 5I)和 β PEC(C15 5I)在大肠杆菌中均得到了高效表达。β PC(C15 5I)和 β PEC(C15 5I)与藻蓝胆素的重组结果表明两个突变体的结构基本没发生改变 ,有利于对 β PC和 β PEC的生物合成进行进一步研究。
- 宋波朱菁萍周明赵开弘
- 关键词:藻胆蛋白藻蓝蛋白半胱氨酸定点突变体外重组
- 藻红蓝蛋白α-亚基体外重组体系的优化被引量:2
- 2002年
- 对我们建立的藻红蓝蛋白α-亚基体外重组体系进行了优化.实验表明:让表达的不具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α-亚基连接/异构酶E亚基(简称PecE)与具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α-亚基连接/异构酶F亚基(简称Histag-PecF)共同变性再复性,然后通过Ni2+金属鳌合亲和层析提纯PecE/Histag-PecF复合物,该PecE/Histag-PecF具有更好的催化活性.
- 周明武栋赵开弘
- 关键词:藻红蓝蛋白基因重组藻类植物色素蛋白
- 生物光电材料及其在生物光电器件中的应用
- 2003年
- 讨论了几种主要的生物光电材料:细菌视紫红质、藻红蓝蛋白和光敏色素,分别讨论了相关分子结构、光谱特性和光电转换原理等,并对其在生物光电器件方面的应用进行了展望。
- 周明王宇飞冉勇赵开弘
- 关键词:细菌视紫红质藻红蓝蛋白光敏色素
- 基于报废显微镜的双层类脂膜制备装置
- 2005年
- 本文介绍了一种将废旧普通光学显微镜改装为双层类脂膜成膜装置的方法.改造完成的装置在双层类脂膜制备过程中,有效地提高了成膜效率和成膜质量.
- 周明冉勇赵开弘金嘉禾
- 关键词:显微镜双层类脂膜