教育部科学技术研究重点项目(211101)
- 作品数：18 被引量：72H指数：5
- 相关作者：王成涛张婵刘国荣尹胜卜旺雨更多>>
- 相关机构：北京工商大学河南大学山东中惠食品有限公司更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金北京市教委科技计划面上项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学化学工程更多>>
- ARO10基因在Saccharomyces cerevisiae中的克隆表达及其对3-甲硫基丙醇合成代谢的影响被引量：5
- 2012年
- 研究了脱羧酶ARO10基因克隆与过量表达对酿酒酵母INVSc1 3-甲硫基丙醇合成途径的代谢流量影响。将脱羧酶基因ARO10与穿梭质粒pYES2连接,构建其酿酒酵母表达质粒(载体)pYES2-ARO10,LiAc/SSD-NA/PEG方法转化酿酒酵母菌株INVSc1中进行表达,验证ARO10基因过量表达对发酵产物3-甲硫基丙醇影响。结果表明,构建的酿酒酵母转化子SC10-1发酵120 h时,3-甲硫基丙醇生成量达到0.90 g/L,与未导入脱羧酶ARO10基因的对照菌株相比,3-甲硫基丙醇产量提高55.2%。因此,S.cerevisiae s288c中脱羧酶(EC 4.1.1.72)是3-甲硫基丙醇生物合成途径的关键限速酶,其增强脱羧酶基因ARO10的克隆及基因表达,有利于提高3-甲硫基丙醇的合成代谢流量。
- 温明显王成涛杨雪莲赵磊刘国荣童军茂
- 关键词：3-甲硫基丙醇
- 豆豉纤溶酶载纳米脂质体的制备与表征被引量：2
- 2014年
- 为提高豆豉纤溶酶口服生物利用度,建立了豆豉纤溶酶载纳米脂质体系统,并对其表征进行评价。采用硫酸铵梯度法制备的豆豉纤溶酶纳米脂质体的包封率为(52.74±4.24)%,粒径(72.04±31.2)nm,平均Zeta电位-44.2 mV,PdI 0.237。试验结果表明:豆豉纤溶酶纳米脂质体在体外稳定性好,在人工肠液中的释放符合一级动力学释放规律,豆豉纤溶酶在12 h后释放接近完全,无突释现象。豆豉纤溶酶及载酶纳米脂质体肠吸收液酶活性测定结果表明:豆豉纤溶酶及其载酶纳米脂质体在小肠均有吸收,吸收后仍具有纤溶活性。纳米脂质体可有效促进豆豉纤溶酶的吸收。
- 张婵李小东王成涛
- 关键词：豆豉纤溶酶纳米脂质体包封率粒径大小
- 儿茶酚对运动发酵单胞菌抗氧化防御体系的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:研究不同溶氧量条件下儿茶酚对运动发酵单胞菌在抗氧化防御体系中的保护作用。方法:在全自动发酵罐(容积10 L)的发酵液(5 L)中添加0.1 mg/ml儿茶酚,控制发酵液溶氧量分别为0,15%,30%,50%,70%,温度30℃,pH 5.5,发酵36 h,分析菌体的超氧阴离子(O2·-)、羟基自由基(HO·)、DPPH自由基等清除率及丙酮酸、乙醇等代谢产物。结果:儿茶酚能明显增强菌体SOD活性(P<0.05)和稳定性,提高O2·-、HO·、DPPH等自由基清除率(P<0.05或0.01),降低菌体丙二醛(MDA)含量(P<0.05),减缓细胞膜脂质过氧化反应、细胞氧化损伤;儿茶酚能促进菌体的生长和乙醇发酵,增加丙酮酸到乙醇发酵的代谢流量。结论:在发酵液中添加儿茶酚,有利于提高有氧环境中的抗氧胁迫能力,保护细胞功能结构和正常代谢,提高其乙醇代谢流量和产率。
- 王成涛张婵尹胜陈玲孙宝国
- 关键词：儿茶酚运动发酵单胞菌溶氧量
- CYS3基因的敲除及其对Saccharomy cescerevisiae3-甲硫基丙醇合成代谢的影响被引量：2
- 2014年
- 研究胱硫醚γ-裂解酶基因CYS3敲除对S.cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢的影响。将编码胱硫醚-γ-裂解酶的CYS3基因和抗性标记基因Zeocin克隆,构建敲除组件CYS3Δ:Zeocin,醋酸锂法将其转化导入S.cerevisiae S288C表达,构建CYS3基因敲除的工程菌。结果表明:摇瓶发酵120 h时,工程菌S.cerevisiae C3和S.cerevisiae S288C的3-甲硫基丙醇生成量分别为0.60 g/L和0.94 g/L,S.cerevisiae C3较野生型S288C的3-甲硫基丙醇生成量降低36.2%。说明CYS3基因敲除对S.cerevisiae的3-甲硫基丙醇有较大影响,并呈现负调节作用。
- 刘丽张婵梁婧如王成涛赵吉兴
- 关键词：胱硫醚-Γ-裂解酶
- 4株红曲霉发酵产生次级代谢产物的分析被引量：2
- 2014年
- 目的为研究评价红曲霉产生次级代谢产物能力,选育优良菌株。方法通过建立的发酵液中γ-氨基丁酸(GABA)、红曲色素、monacolin K和桔霉素的比色法和高压液相色谱检测方法,比较了紫色红曲霉(Monascus purpureus)、丛毛红曲霉(Monascus pilosus)、红色红曲霉(Monascus ruber)、橙色红曲霉(Monascus aurantiacus)的液体发酵产生上述次级代谢产物能力。结果不同红曲霉菌株产生上述4种次级代谢产物的能力是不同的,4种红曲霉均可产生的红曲色素、monacolin K和桔霉素3种次级代谢产物,其中M.pilosus J2的monacolin K产量最高(8.1 mg/L)、桔霉素生成量最低(0.09 mg/L);M.purpureus Y4的红曲色素色价最高,为380U/mL;仅有紫色红曲霉Y4可代谢产生γ-氨基丁酸,产量约为0.2 g/L。结论不同红曲霉菌株产生γ-氨基丁酸、红曲色素、monacolin K和桔霉素这4种次级代谢产物能力存在较大差异。
- 张郡莹杨强张婵刘国荣王成涛赵吉兴
- 关键词：红曲霉次级代谢产物Γ-氨基丁酸红曲色素桔霉素
- 葡萄糖硬脂酸酯的非水相酶法制备
- 2012年
- 考察了脂肪酶催化合成葡萄糖硬脂酸酯(GSAE)的非水相转化条件及其效果。从7种商品化脂肪酶中筛选适于非水相酶法制备GSAE的酶,分别探讨脂肪酶种类及用量、助溶剂种类及用量、底物摩尔比、水分、分子筛用量、摇床速率、反应温度、反应时间等因素对GSAE合成反应产率的影响。结果表明,丙酮是适宜的助溶剂,在丙酮反应体系中固定化脂肪酶Novozyme 435是适宜GSAE酯化反应的最好催化剂,水分明显降低脂肪酶活性和酯化反应产率,底物、助溶剂和反应过程的除水对于该酯化反应是十分必要的。正交实验设计优化的酯化反应条件为:Novozyme 435酶用量0.08 g、分子筛用量0.8 g、n(硬脂酸)∶n(葡萄糖)=3∶1、反应温度45℃、丙酮用量10 mL、摇床转速150 r/min、反应时间5 h。该条件下最大反应速率Vm=0.749μmol/(min.g)和Km=0.020 3mmol/L,GSAE产率达64.11%。
- 王成涛刘国荣赵磊刘媛徐宝财
- 关键词：脂肪酶酶法合成动力学
- 大豆脂肪氧合酶强化香菇风味基料的风味成分研究被引量：5
- 2014年
- 研究大豆脂肪氧合酶(LOX)强化香菇风味基料风味成分的影响因素。SDE装置抽提、GCMS分析鲜香菇的主要风味成分,并以此作为考察指标,研究LOX酶促过程的因素条件对香菇风味基料风味成分产生的影响,优化其工艺条件。结果表明,鲜香菇中八碳化合物占挥发成分的44.13%、含硫化合物为21.53%、酯类化合物为7.60%。八碳化合物中1-辛烯-3-醇、1-辛醇、3-辛酮、2-辛烯-1-醇等对鲜香菇风味的贡献率为最大,1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷等含硫化合物也是香菇的重要风味组成。酶促体系的pH、温度、搅拌速度、通氧速率等因素条件对风味成分产生有一定影响,试验确定酶促强化风味的工艺条件为:质量分数0.5%LOX粗酶液、质量分数0.4%葵花籽油水解液、pH 5.0、温度40℃、搅拌速度500 r/min、通氧速率50 mL/min、时间40min。添加葵花籽油水解液和LOX酶处理可明显提升香菇风味基料的风味成分组成。
- 张婵安晶晶王成涛文雁君
- 关键词：影响因素
- 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的Candida tropicalis过量表达及其对木糖醇合成代谢的影响被引量：1
- 2014年
- 研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因g6pd过量表达对Candida tropicalis木糖醇生物合成代谢的影响。克隆Candida tropicalis CT16的g6pd基因,并将其与表达载体pYES-pgk重组连接,构建重组载体pYES-pgk-g6pd,LiAc/ssDNA/PEG方法转化导入C.tropicalis CT16,筛选阳性转化子,实现g6pd基因的过量表达。结果表明:发酵62 h,阳性转化子C.tropicalis SYG5的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力提高了300%,发酵液中木糖醇质量浓度达到79.90 g/L,较野生型对照菌株的木糖醇产量提高了12.41%,木糖醇产率提高了44.94%。因此,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在C.tropicalis木糖醇的合成代谢途径中发挥重要作用,增强g6pd基因的表达,可以明显提高菌体NADPH供应量和还原力,有利于木糖醇的生物合成。
- 高雪楠张婵尹胜张秋晨王成涛徐宝财
- 关键词：CANDIDATROPICALIS葡萄糖-6-磷酸脱氢酶木糖醇
- 食管鳞癌的蛋白质组学
- 2012年
- 大部分食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)确诊时已发展至中晚期,临床治疗效果差,是导致我国华北地区ESCC死亡率居高不下的主要原因之一.因此,亟需筛查ESCC特异性、敏感性的生物标志物,以期用于ESCC早期诊断、个体化分子靶向治疗和预后评价.与相对稳定、携带遗传信息的基因组不同,蛋白质组具有时空变化特性,由此构成生命活动复杂性的物质基础.在病理情况下,蛋白质组能够精确反映患病组织器官的功能状态,因此为疾病的监测提供了窗口.本文总结了ESCC蛋白质组研究现状及差异表达的蛋白质谱,并探讨了ESCC候选分子标志物的潜在临床应用价值.
- 张娟卜旺雨齐义军
- 关键词：食管鳞癌蛋白质组质谱生物标志物
- 豆豉纤溶酶纳米脂质体的肠吸收效率研究被引量：2
- 2014年
- 采用外翻肠囊法和大鼠在体单向灌注法,以肠吸收速率(Ka)和表观渗透系数(Papp)为指标,考察豆豉纤溶酶纳米脂质体的小肠吸收部位及效率。结果显示,由外翻肠囊法测得豆豉纤溶酶纳米脂质体的回肠段Ka和Papp分别为3.25×10-2μg/s和2.355×10-6cm/s,且吸收速率随着浓度的升高而降低,最终出现饱饮现象。由大鼠在体单向灌注法测得的Ka和Papp分别为(1.49±0.22×10-3)μg/s和(7.90±1.46)×10-5cm/s。上述两种方法均表现出豆豉纤溶酶纳米脂质体在回肠的吸收效率为最高,这可能与回肠中大量存在Peyer’s淋巴结有关,而Peyer’s淋巴结中存在的M细胞可能导致饱饮现象。
- 张婵李小东王成涛
- 关键词：豆豉纤溶酶纳米脂质体肠吸收
