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广东省重点攻关基金(199658)
作品数:
2
被引量:9
H指数:2
相关作者:
王斌
郁知非
曹丽萍
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相关机构:
中山医科大学
暨南大学
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发文基金:
广东省重点攻关基金
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相关领域:
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机构
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暨南大学
2篇
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作者
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郁知非
2篇
王斌
1篇
曹丽萍
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1篇
中国实验血液...
年份
1篇
1998
1篇
1997
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多药耐药基因QRT-PCR检测中内标准DNA和RNA模板的构建
被引量:2
1997年
利用多药耐药基因(MDR1)全基因质粒和分子克隆技术,经二次克隆将戊型肝炎病毒一段238bP的核苷酸序列插入MDR1 308 bp的目的 cDNA片段,构建了插入突变型MDR1-cDNA重组体作为定量PCR的DNA竞争模板;再经第三次克隆构建了插入突变型MDR1-RNA重组体,最后经体外转录出546 nt的正链RNA作为逆转录的RNA竞争模板。所建立的定量逆转录-多聚酶链反应(QRT-PCR)技术简便、快速、灵敏,可检出1fg水平的MDR1 mRNA,为临床MDR1表达的定量检测提供了确实可行的手段。
曹丽萍
王斌
郁知非
关键词:
多药耐药基因
DNA模板
白血病
MRP基因定量RT-PCR内标准DNA模板和RNA模板的构建
被引量:7
1998年
目的:构建定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)的内标准DNA模板和RNA模板,定量检测多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达的mRNA。方法和结果:利用现有的MRP全基因质粒和分子克隆技术经2次克隆将庚型肝炎病毒的一段238bp的核苷酸序列插入MRP292bp的目的cDNA片段,构建了插入突变型MRPcDNA重组体作为定量PCR的DNA竞争模板;再经第3次克隆构建了插入突变型MRPRNA重组体,最后经体外转录出530nt的正链RNA作为逆转录的RNA竞争模板。结论:所建立的RTPCR技术简便、快速、灵敏,可检出1fg水平的mRNA量。用DNA竞争模板定量检测比用RNA竞争模板更简便、经济、可靠。
曹丽萍
曹丽萍
王斌
关键词:
多药耐药基因
RT-PCR
白血病
DNA模板
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