国家自然科学基金(30470817)
- 作品数：11 被引量：36H指数：4
- 相关作者：李果骆天红罗敏顾燕云张宏利更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院同济大学青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 单纯餐后高血糖型糖尿病的胰岛素分泌与敏感性被引量：1
- 2006年
- 目的评估单纯餐后高血糖型糖尿病(IPH)的胰岛素分泌与敏感性的特征,并进一步探讨进展为IPH的相关因素。方法850例受试者按75 g葡萄糖耐量试验分为:糖耐量正常(NGT)557例;单纯糖耐量异常(iIGT)146例;IPH 147例。比较各组的代谢指标及胰岛素分泌和胰岛素敏感性指数。结果早期相胰岛素分泌和胰岛素敏感性指数从NGT→iIGT→IPH逐渐降低,校正年龄和BM I后差异有统计学意义(P<0.05)。对iIGT和IPH患者作线性回归分析显示早期相胰岛素分泌和胰岛素敏感性指数与2hBG密切相关。结论初发的IPH有显著的早期相胰岛素分泌缺陷和胰岛素敏感性降低。β细胞胰岛素分泌缺陷和胰岛素抵抗均是从NGT→iIGT→IPH的进展过程中的决定因素。
- 田景琰顾燕云张贤玲李鸿周伟斌张宏利王晓骆天红李果罗敏
- 关键词：2型糖尿病胰岛素敏感性指数
- 甲状腺癌蛋白质差异表达的观察被引量：3
- 2005年
- 目的由于甲状腺结节的高发率和鉴别良恶性的困难,所以需要寻找一种比较特异的分子标志。本研究的目的就是利用蛋白组学方法,建立人甲状腺癌和癌旁正常组织的双向凝胶蛋白图谱,寻找差异表达的蛋白质。方法双向凝胶电泳分离人甲状腺癌及其周围正常组织的总蛋白质,通过图形软件分析比较,找出差异表达的蛋白质,利用质谱对差异表达的蛋白质进行鉴定。结果建立双向凝胶图谱,平均蛋白质点数约为1000个左右。发现只在肿瘤表达的点有263个,表达上调2倍及以上的点有134个。在对差异点进行的质谱鉴定中发现了热休克蛋白27在肿瘤中表达下调。结论建立了人甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织的双向电泳图谱,并鉴定了一些与肿瘤相关的蛋白质。
- 李华峰孙卫华谢晓燕苗志敏罗敏
- 关键词：甲状腺癌双向凝胶电泳蛋白质组
- 长期体外培养大鼠胰岛的动态研究
- 2006年
- 目的观察长期体外培养大鼠胰岛在分泌功能、基因表达及免疫荧光组织化学染色法的动态变化。方法采用胶原酶灌注消化和nextran密度梯度离心分离、纯化获得大鼠胰岛,连续培养20 d,定期检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);实时聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光组织化学染色法检测胰高糖素(Glu)、胰岛素、胰腺十二指肠同源盒基因(PDX)-1、葡萄糖转运蛋白(Glut)-2基因mRNA及蛋白水平的表达。结果连续培养胰岛的GSIS水平持续下降;但RT-PCR及免疫荧光显示随培养时间延长,胰岛内关键基因表达并未见明显减弱。结论长期体外培养大鼠胰岛的胰岛素分泌功能持续下降,并非由胰岛素含量减少所致,可能存在更深层次的原因。
- 李凤英李鸿周伟斌顾燕云张迪周文中骆天红李果陈名道罗敏
- 关键词：原代培养胰岛
- ATP结合盒转运体A1基因多态性与2型糖尿病及肥胖的相关性
- 2006年
- 目的研究上海地区汉族人群中,ATP结合盒转运体A1(ABCA1)基因位点rs2020927的单核苷酸多态性与2型糖尿病(T2DM)及肥胖发病的相关性。方法选取上海地区无亲缘关系的T2DM患者440例,根据体质量指数(BM I)分为肥胖组(n=252,BM I>25 kg/m2)和正常体质量组(n=188,BM I<25 kg/m2);另选取正常对照者315例。采用等位基因特异的实时PCR,对ABCA1基因位点rs2020927进行基因分型,并通过相关和Logistic回归分析,研究该位点与T2DM及肥胖的相关性。结果ABCA1基因rs2020927位点基因型频率在不同组间有显著性差异(P=0.001),其中AA、AG、GG基因型频率在对照组人群中分别为43.8%、35.9%和20.3%;在正常体质量的T2DM组中分别为33%、53.2%和13.8%;在肥胖的T2DM组中分别为40.9%、47.2%和11.9%。基因型GG在T2DM肥胖组和对照组中有显著性差异(P=0.009),而T2DM正常体质量组和对照组之间无显著性差异(P>0.05)。结论中国上海汉族人群中,ABCA1基因多态性位点rs2020927可能与T2DM及肥胖的发病相关。
- 张霞任颖刘伟郑升骆天红罗敏
- 关键词：2型糖尿病肥胖单核苷酸多态性胰岛素抵抗
- 大鼠BTCe蛋白原核表达及功能鉴定
- 2006年
- 目的原核表达获得大量具有生物活性的大鼠BTCe蛋白。方法RT-PCR法从大鼠肾脏中扩增出150bp BTCe片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-BTCe。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法纯化获得融合蛋白,凝血酶酶切后获得目的蛋白,经SDS-PAGE、Western blot及质谱鉴定。以0.5nmol/L BTCe作用于3T3-L1细胞连续培养4d,MTT法检测其促增殖能力。结果融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中。酶切后的目的蛋白经质谱证实其与BTCe蛋白氨基酸序列相符;作用于3T3-L1细胞可明显促进其增殖。结论大鼠BTCe蛋白在pGEX-4T-2原核表达载体可获得高效表达,所纯化蛋白具有促进3T3-L1细胞体外增殖的作用。
- 李鸿周伟斌顾燕云周文中张迪骆天红李果罗敏
- 关键词：克隆融合蛋白
- 胰淀素对大鼠胰岛素和胰高血糖素分泌的影响被引量：7
- 2006年
- 目的 研究胰淀素对大鼠胰岛素和胰高血糖素分泌的影响。方法 应用胶原酶消化和不连续密度梯度离心技术建立离体大鼠胰岛模型，研究不同浓度胰淀素对胰岛素和胰高血糖素分泌的影响。结果 不同浓度的葡萄糖增加胰岛素的分泌，抑制胰高血糖素的分泌，并都呈线性相关。葡萄糖浓度为0、5．6、11．2mmol／L时，孵育1h，胰淀素（10^-10～10^-5mol／L）显著抑制胰高血糖素的分泌（P〈0．05），且胰高血糖素的分泌与胰淀素浓度呈负相关（P〈0．01）。葡萄糖浓度为5．6mmol／L时，不同浓度的胰淀素增加胰岛素分泌，而且两者呈正相关（P〈0．05）；但葡萄糖浓度为11．2和16．7mmol／L时，10^-5mol／L胰淀素对胰岛素的分泌有明显抑制作用（P〈0．05）。结论 胰淀素对胰高血糖素的分泌有直接抑制作用；在葡萄糖浓度为5．6mmol／L时，胰淀素能增加胰岛素分泌，抑制胰高血糖素分泌；高糖时，高浓度的胰淀素抑制胰岛素分泌。
- 田景琰张宏利顾燕云李风英徐佳王晓骆天红李果罗敏
- 关键词：胰淀素胰高血糖素胰岛素
- 大鼠BTCe对体外培养胰岛保护作用及对糖尿病大鼠降糖作用的研究被引量：1
- 2006年
- β细胞素(betacellulin,BTC)是目前较受关注的胰岛再生因子,但其促胰腺、胰岛再生的机制不清.BTCe是betacellulin的功能片段,促细胞增殖能力与BTC相同.实验通过原核表达方法获得BTCe蛋白,MTT法证实其促3T3-L1细胞增殖能力.将BTC或BTCe作用于原代培养的大鼠胰岛,观察其对胰岛分泌的急性及长期影响作用,实时定量PCR及免疫荧光检测胰岛内关键基因的表达.将质粒pcDNA3.1-BTCe注射入链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肌肉中,观察对大鼠血糖的影响作用.加入BTC或BTCe可明显提高体外培养大鼠胰岛的GSIS水平,但实时定量PCR及免疫荧光显示胰岛内4种关键基因的表达并无明显变化;pcDNA3.1-BTCe转染糖尿病大鼠15～20天后血糖出现下降,糖耐量明显改善;免疫荧光显示:胰腺内有大量PDX-1+的导管细胞及胰岛素阳性细胞出现.推测BTC及BTCe对体外长期培养的大鼠胰岛具有一定的保护作用,可能通过促进胰腺内PDX-1+的导管细胞及胰岛素阳性细胞的增殖、诱导对STZ诱导的糖尿病大鼠的高血糖具有一定缓解作用.
- 李鸿周伟斌李凤英顾燕云田璟琰钱镭张迪周文中吴国亭骆天红李果罗敏
- 关键词：BETACELLULIN胰岛转染糖尿病
- 胰腺发育相关maf基因在胰腺导管和胰岛的表达被引量：4
- 2008年
- 为探讨胰岛功能和发育相关maf基因在胰腺导管上皮中的表达情况,对新鲜小鼠胰腺组织切片进行显微切割,分离纯化胰腺组织中的导管和胰岛,以及外分泌腺组织细胞作为对照,利用荧光实时定量PCR的方法完成对目的基因的相对定量.结果显示,mafamRNA,mafbmRNA水平在胰岛及导管中非常接近,无统计学差异.而c-maf在导管的表达高于胰岛(P<0.05),外分泌腺则无上述基因的表达.胰腺导管中mafa,mafb,cmaf均有表达,肯定了导管上皮细胞向内分泌细胞分化的潜能,而c-maf在导管中的表达高于胰岛,提示导管上皮c-maf的下调可能有助于导管上皮细胞向内分泌细胞的分化成熟.
- 张贤玲顾燕云周文中张宏利李果
- 关键词：激光显微切割胰腺导管上皮细胞实时定量PCR
- β细胞素对体外培养大鼠胰岛的影响被引量：1
- 2007年
- 研究β细胞素（BTC）对体外培养大鼠胰岛的作用。BTC无促胰岛急性分泌作用，但对长期培养大鼠胰岛的葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）具有一定保护效力；实时PCR及免疫荧光检测胰高血糖素、胰岛素、PDX-1、葡萄糖转运子2的表达未随培养时间延长而丰度下降，BTC可能不是通过调节上述基因的表达来维护胰岛GSIS功能的。
- 李鸿周伟斌李凤英顾燕云田璟琰吴国亭张迪周文中骆天红李果罗敏
- 关键词：Β细胞素胰岛
- PKBα／Akt1基因多态性与2型糖尿病的相关性研究被引量：7
- 2008年
- 目的研究蛋白激酶Bα亚型（PKBα，也称Akt1）基因单核苷酸多态性（SNP）与上海地区汉族人群2型糖尿病易感性的关系。方法利用等位基因特异PCR技术对460例2型糖尿病患者及444名正常对照者（NC组）Akt1基因3个标签SNP位点rs2494743、rs2494738和rs3001371进行基因分型。结果位点rs2494738和rs3001371的基因型分布在糖尿病组和NC组之间呈现显著性差异（均P〈0．01）；rs2494738和rs3001371等位基因频率在2型糖尿病组和NC组的分布也呈现显著性差异（均P〈0．01）；rs2494738的多态性与2型糖尿病发生风险呈等位基因计量效应关系。但rs2494743基因型和等位基因分布在NC组与2型糖尿病组中差异无统计学意义。单倍型分析结果显示3个单倍型频率在2型糖尿病组和NC组之间也存在显著差异（均P〈0．01）。结论在上海地区的汉族人群中，Akt1基因可能是2型糖尿病的易感基因之一；其SNP位点rs2494738和rs3001371变异可能与2型糖尿病发病相关。
- 许丽红骆天红赵萸钱镭张芹李文毅张宏利徐佳简蔚霞郑升张贤玲李果
- 关键词：AKT1易感性基因
