教育部“春晖计划”(Z2008-1-75002)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：王振海王国玮胡坤赵莉更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学宁夏医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：教育部“春晖计划”国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HCV刺激小胶质细胞后不同时间点TLR9的表达水平被引量：1
- 2011年
- 目的观察丙型肝炎病毒(HCV)刺激体外培养小鼠小胶质细胞(BV2)后不同时间Toll样受体9(TLR9)mRNA和TLR9蛋白表达的变化,初步探讨TLR9在HCV感染中枢神经系统(CNS)中的表达水平。方法体外培养BV2细胞,将BV2细胞随机分为HCV阳性血清组、健康人血清组、空白对照组,分别用不同血清刺激4、12、20、36 h后收集细胞,并用反转录PCR和流式细胞仪检测TLR9 mRNA和TLR9蛋白的表达。结果各组不同时间点BV2细胞均有TLR9 mRNA和TLR9蛋白的表达,且HCV阳性血清组高于健康人血清组和空白对照组(F=21.921,P<0.01;F=32.762,P<0.01);HCV阳性血清组4 h时TLR9 mRNA(F=8.364,P<0.05)和20 h时TLR9蛋白(F=16.517,P<0.01)表达量最高,其他时间点之间比较无统计学差异(P>0.05);健康人血清组和空白对照组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论 HCV阳性血清刺激可使体外培养的BV2细胞TLR9 mRNA和TLR9蛋白表达增高,TLR9可能在HCV感染CNS中起重要作用。
- 胡坤王国玮姚红霞王振海
- 关键词：BV2细胞肝炎病毒属TOLL样受体9
- HCV刺激小胶质细胞后TLR9蛋白的表达及其与MCP-1、TNF-α的关系被引量：5
- 2011年
- 目的:了解在体外培养条件下丙型肝炎病毒(HCV)刺激小鼠小胶质细胞(BV2)后Toll样受体9(TLR9)蛋白的表达变化及其对MCP-1(人单核细胞趋化蛋白-1)和TNF-α分泌的影响,探讨HCV感染中枢神经系统(CNS)后小胶质细胞TLR9蛋白的表达及其相应细胞因子的变化。方法:体外培养BV2细胞,分为HCV阳性血清组、正常人血清组、空白对照组。每组各20例细胞样本。在12h收集细胞和上清液,用流式细胞术检测TLR9蛋白的表达,ELISA法检测培养上清中MCP-1和TNF-α的含量,并应用SPSS11.0统计软件包进行统计学分析。结果:(1)各组BV2细胞均有TLR9蛋白的表达,HCV阳性血清组中TLR9蛋白的表达高于正常人血清组、空白对照组(P<0.01);正常人血清组和空白对照组无统计学差异(P>0.05);(2)HCV阳性血清组MCP-1和TNF-α含量高于正常人血清组、空白对照组(P<0.01);且HCV阳性血清组TLR9蛋白的表达量与MCP-1和TNF-α的分泌可能呈正相关。结论:HCV阳性血清刺激可使体外培养的BV2细胞表达TLR9蛋白增高,且可能诱导了MCP-1和TNF-α的分泌。TLR9蛋白可能参与了HCV在中枢神经系统感染中的早期固有免疫应答。
- 胡坤王国玮王振海
- 关键词：丙型肝炎病毒TOLL样受体9TNF-ΑMCP-1
- HCV感染小鼠小胶质细胞后TLR7mRNA和IL-6表达被引量：2
- 2011年
- 目的通过观察丙型肝炎病毒(HCV)感染小鼠小胶质细胞BV2后Toll样受体(TLR)7 mRNA及白细胞介素(IL)-6水平的动态变化,探讨HCV对中枢神经系统(CNS)的免疫发病机制。方法用20%(体积分数)的HCV阳性血清感染BV2细胞,在感染后6、12、244、8 h收集细胞,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA法检测TLR7 mRNA和IL-6表达,同时设空白对照组和正常血清组。结果 3组BV2细胞中均有TLR7 mRNA表达;HCV阳性血清感染BV2细胞后TLR7 mRNA表达随时间延长而逐渐增高,其中在12、24、48 h时表达水平均较其他两组增高(P<0.05)。IL-6表达在HCV阳性血清组也逐渐增高,48 h时与空白对照组、正常血清组48 h时比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BV2细胞可以表达TLR7 mRNA,HCV感染能上调BV2细胞TLR7 mRNA和IL-6表达。TLR7可能参与了HCV对CNS的病理生理过程。
- 赵莉王国玮王振海
- 关键词：TOLL样受体7白细胞介素6肝炎病毒属小胶质细胞
- 丙型肝炎病毒刺激小鼠小胶质细胞后Toll样受体9mRNA的表达及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的分泌
- 2011年
- 了解在体外培养条件下丙型肝炎病毒（HCV）刺激小鼠小胶质细胞（BV2）后Toll样受体9 mRNA（TLR9 mRNA）的表达变化及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）分泌的变化,为进一步探讨TLR9参与小胶质细胞抗HCV的免疫机制提供理论基础.方法 体外培养BV2细胞,随机分为HCV阳性血清组、正常人血清组、空白对照组,每组各20份细胞样本.分别在4、12、20、36 h收集细胞和上清液,以逆转录PCR（RT-PCR）法观察不同时间点TLR9 mRNA的表达,ELISA法检测不同时间点培养上清中TNF-α、IL-6的含量,并用SPSS 13.0统计软件包进行统计学分析.结果 （1）RT-PCR结果显示各组BV2细胞均有TLR9 mRNA的表达,各时间点HCV阳性血清组中TLR9mRNA的表达（0.85±0.11、0.55±0.08、0.58±0.09、0.61±0.07）高于正常人血清组、空白对照组,差异有统计学意义（F=17.258,P＜0.05＝,且HCV阳性血清刺激后4 h的TLR9 mRNA表达量（0.85±0.11）最高,较其他时间点差异有统计学意义（F=7.427,P＜0.05＝;正常人血清组和空白对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;12、20、36 h之间差异无统计学意义（P＞0.05）.（2）各时间点HCV阳性血清组TNF-α[（926±133）pg/ml、（327±59）pg/ml、（367±69）pg/ml、（354±71）pg/ml]、IL-6[（125±34）pg/ml、（84±20）pg/ml、（82±24）pg/ml、（87±18）pg/ml]含量高于正常人血清组、空白对照组（F=18.263～27.469,P＜0.05＝;且HCV阳性血清组TLR9 mRNA的表达量与TNF-α（r= 0.425,P〈0.01）、IL-6（r=0.489,P〈0.01）含量呈正相关.结论HCV阳性血清刺激可使体外培养的BV2细胞表达TLR9mRNA增高,4 h表达最高,且可能诱导了TNF-α、IL-6的分泌.提示TLR9可能增加了Th1和Th2细胞因子的分泌,并参与了HCV在中枢神经系统感染中的早期固有免疫应答.
- 胡坤王国玮王振海
- 关键词：小神经胶质细胞丙型肝炎病毒TOLL样受体9肿瘤坏死因子Α白细胞介素6
- HCV感染后小鼠小胶质细胞瘤细胞炎性因子分泌特点的研究被引量：1
- 2011年
- 目的了解丙型肝炎病毒(HCV)感染小鼠小胶质瘤细胞(BV2)后Th1/Th2类细胞因子的变化,探讨HCV感染后小胶质细胞的免疫分泌效应。方法体外培养BV2细胞,随机分为HCV阳性血清组、正常人血清组、空白对照组。分别作用24h用倒置显微镜观察细胞形态并收集上清液,ELISA法检测上清液中白介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的含量。结果倒置显微镜下观察显示,HCV阳性血清感染后BV2细胞呈圆形,突起变粗短,部分细胞聚集成团。HCV阳性血清感染组TNF-α、IL-12、IL-6含量均高于正常人血清组与空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01);正常人血清组和空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HCV感染BV2细胞后Th1类细胞因子TNF-α、IL-12、和Th2类细胞因子IL-6分泌增强,可能与HCV感染CNS引起的早期炎症损伤有关。
- 胡坤王国玮王振海
- 关键词：BV2细胞白介素-12白介素-6
