国家自然科学基金(81100459)
- 作品数：15 被引量：36H指数：3
- 相关作者：李卫华王玉柱夏敏杰黄超丁训诚更多>>
- 相关机构：上海市计划生育科学研究所复旦大学复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- dl-扁桃酸对人精子与阴道黏膜上皮VK2/E6E7细胞的毒性研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨dl-扁桃酸对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)与精子的细胞毒性损伤。方法不同浓度的dl-扁桃酸处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪测定精子活率,扫描电子显微镜检测精子受损情况。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸和4.0 g·L?1壬苯醇醚(nonoxynol-9,N-9)处理VK2/E6E7细胞,MTT法检测细胞活性,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率,并用流式细胞法检测细胞凋亡率。结果 dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度约为1.25 g·L?1,最低有效浓度约为2.5 g·L?1。扫描电镜结果显示,dl-扁桃酸处理组精子表面结构与对照组形态相似,无明显受损特征,N-9组精子严重受损。MTT实验结果表明,1.25 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率>95%,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率约为50%。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组LDH释放量只有微量检出,远低于N-9组。流式细胞检测表明,1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组中活细胞和晚期凋亡比例与对照组相近,早期凋亡细胞略少于对照组,死亡细胞稍多于对照组,N-9组大量细胞死亡。结论 dl-扁桃酸对VK2/E6E7细胞毒性远低于N-9,其对精子的抑制作用不是通过破坏精子质膜与鞭毛来实现。
- 夏敏杰王玉柱黄超丁训城李卫华芦洁
- 关键词：壬苯醇醚细胞毒性
- 脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜免疫炎症反应的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(deoxycholyltyosine thermoreversible gel,DCT gel)对小型猪阴道黏膜的炎性细胞数量及活化状态的影响。方法将9只雌性小型猪随机分为基质对照组、壬苯醇醚胶冻剂(Nonxgnol-9gel,N-9 jelly)组和DCT gel组,肌注苯甲酸雌二醇12 d后开始阴道给药,每天1次连续给药7 d,在末次给药后24与72 h,收集阴道灌流(Cervicovaginal lavage,CVL)液,流式细胞仪计数炎性细胞和中性粒细胞数目,并对CD45+细胞进行表型分析,比较不同给药组之间的差别。结果 DCT gel组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞数目以及CD45+细胞数目明显低于N-9 jelly组(P<0.001),与基质对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(DCT gel)不会引起小型猪阴道黏膜的明显刺激,未诱导局部炎性细胞的活化,作为外用杀精剂具有一定的临床应用前景。
- 温成丽王玉柱职瑞娜夏敏杰黄超李卫华丁训诚
- 关键词：流式细胞术小型猪炎症
- 链状酰胺类化合物B07的体外杀精效果及其对精子质膜的影响被引量：2
- 2014年
- 目的：研究一种链状酰胺类化合物（B07）的体外杀精作用及其对精子质膜的影响。方法：上游收集高活力人类精子分别与0μg／ml（对照组），5-640μg／mlB07作用30min，随后用计算机辅助精液分析仪分析记录精子的活率及运动参数；用160μg／mlB07与精子作用，记录5min、30min、60min和120min时精子活动率：处理后的精子一部分经SYBR-14／PI双染后用荧光显微镜观察，另一部分通过电子显微镜来观察质膜的变化情况；并以壬苯醇醚科9）作为阳性对照。结果：随着B07浓度的升高，精子活率和活力呈下降趋势，最低有效浓度（MEC）为640gg／ml；荧光显微镜下经B07处理的精子呈橙色，而N9处理的精子呈红色；电子显微镜显示B07组精子头部肿胀起泡，尾部针孔样损伤，N9组精子呈溶解性改变。结论：B07具有体外杀精作用，且该作用有时间和浓度依赖性。且其对精子质膜的影响小于N9。
- 职瑞娜陆路戴秋云王玉柱黄超夏敏杰丁训城李卫华姜世勃
- 关键词：人类精子杀精质膜
- 巴马小型猪不同发情周期的阴道细胞学观察被引量：1
- 2013年
- 目的研究广西巴马小型猪不同发情周期的阴道细胞学特点。方法选取发情间期、发情前期和发情期小型猪各4只，阴道涂片，分别进行HE染色和巴氏染色。光学显微镜下观察阴道涂片细胞形态，进行分类和计数。结果广西巴马小型猪阴道涂片中HE染色和巴氏染色均可见白细胞、副基细胞、小中间细胞、大中间细胞和角化上皮细胞，发情间期：白细胞百分比明显高于发情前期和发情期（P〈0．01）；发情前期：副基细胞和小中间细胞明显高于发情间期和发情期（P〈0．01）；发情期：大中间细胞和角化上皮细胞明显高于发情间期和发情前期（P〈0．01）。结论阴道涂片法可作为确定广西巴马小型猪发情周期的辅助方法，对小型猪的繁殖育种有一定的应用价值。
- 田芳夏敏杰王玉柱周新初李卫华丁训诚
- 关键词：阴道涂片发情周期小型猪
- 脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激的病理学评价
- 2014年
- 目的评价脱氧胆酰酪氨酸热敏凝胶剂(DCT gel)的小型猪阴道黏膜刺激性。方法将9只雌性小型猪随机分为空白胶组、DCT-gel组和市售壬苯醇醚凝胶(N-9 jelly)组,阴道给予5 ml凝胶,每日1次,连续给药7 d,末次给药72 h后处死小型猪,取阴道组织,观察阴道黏膜组织病理学改变;免疫组化法检测阴道黏膜内CD45的表达。结果小型猪阴道黏膜组织HE染色显示DCT gel对黏膜上皮层、固有层、血管及周围组织无明显损伤(5.5±2.7),与空白胶组相比差异无统计学意义(3.3±1.6),远低于N-9 jelly组(20.5±3.5,P<0.05);与空白胶组相比,DCT gel组的阴道黏膜CD45表达差异无统计学意义(P>0.05),N-9 jelly组CD45表达显著增加(P<0.05)。结论 DCT gel对小型猪阴道黏膜刺激性较小,作为阴道外用杀微生物剂具有一定的应用前景。
- 田芳王玉柱职瑞娜夏敏杰温成丽王忠辉周新初李卫华
- 关键词：小型猪阴道黏膜CD45
- 去氧胆酰酪氨酸对人类精子质膜完整性和细胞凋亡的影响
- 2014年
- 目的探讨去氧胆酰酪氨酸(DCT)对人类精子活力、质膜完整性以及凋亡的影响。方法上游高活力人类精子分别与DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1作用20 min,取精子悬液分析精子活率(SM)和活力(SV);SYBR-14/PI双染后经过荧光显微镜和流式细胞仪观察质膜完整性,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞仪分析细胞凋亡。结果 DCT对SM和SV均有显著的抑制作用,且存在量-效关系(rSV=0.91,rSM=0.88,P<0.05)。质膜完整性结果显示,质膜破损精子在DCT 0.25,0.5和1.0 g·L-1时质膜破损精子百分率分别为(54.3±9.8)%,(73.8±3.5)%和(80.6±8.3)%,与空白对照组具有明显差别(P<0.05),且具有明显的量效关系(r=0.91,P<0.05)。凋亡实验结果显示,晚期凋亡精子百分率在0.25,0.5和1.0 g·L-1时,分别是(11.9±1.2)%,(30.1±6.3)%和(75.6±6.3)%,具有明显的浓度依赖性(r=0.98,P<0.05)。DCT≤0.5 g·L-1引起精子早期凋亡率升高,但是高浓度时却出现降低趋势。结论 DCT不仅破坏精子质膜完整性,同时诱发精子凋亡,导致受精能力降低或消失。
- 温成丽职瑞娜王玉柱黄超李卫华丁训城
- 关键词：精子获能细胞凋亡
- 双功能外用避孕药具:避孕和预防HIV/STIs的新技术被引量：1
- 2014年
- 目前,威胁女性生殖健康的2大原因分别是意外妊娠和包括HIV在内的性传播感染(sexually transmitted infections,STIs)。现存的很多避孕方法无法达到预防性传播感染的目的。近年来,研制女性自主使用的、兼具避孕和抗STIs双重功能的外用避孕药具已成为国际发展趋势和热点。处于研究中的双功能避孕药具主要是将杀微生物剂与女用避孕套、SILCS隔膜和阴道环联合使用,前者发挥预防HIV/STIs作用,后者则用于避孕,以此达到双重目的。
- 职瑞娜黄超李卫华邵海浩丁训诚
- 关键词：避孕HIV阴道环
- 流式细胞术在外用避孕药精子功能评估中的应用被引量：1
- 2013年
- 流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种单细胞快速定量分析技术,为精子功能研究提供了一种高通量、多参数的检测手段。FCM在外用避孕药对精子功能评估中的应用,主要包括精子质膜完整性、DNA完整性、顶体反应、线粒体功能、氧化应激和精子凋亡等方面。表明FCM是精子功能研究的有效工具,有助于阐明新型外用避孕药的药效和作用机制。
- 温成丽夏敏杰王玉柱李卫华
- 关键词：精子功能
- 乙酸阴道热敏凝胶剂流变性和体外释药行为的研究
- 2015年
- 目的:乙酸阴道热敏原位凝胶剂(Acetic Acid vaginal thermosensitive in situ gel,AceAcid TISG)作为一种候选阴道外用避孕药,具有温度敏感性的特点,本文旨在考察在不同温度下的流变性质、凝胶溶蚀以及体外释放特性。方法:冷法制备Ace-Acid TISG,采用Kinexus Pro高级旋转流变仪测定相转变温度,胶凝温度以及不同温度下相变过程中的流变参数;无膜溶出法检测凝胶的溶蚀行为;电位滴定法测定乙酸的体外释放度。结果:Ace-Acid TISG相转变温度为25℃,胶凝温度为30℃;低温下为流体,粘弹性很低,相角很高;温度升高,粘弹性呈指数增长,相角降低。乙酸体外释放速率与凝胶溶蚀速率呈现良好的线性关系,两者遵循零级动力学方程。结论:本凝胶制剂具有良好的热敏感性和体外释放性,符合阴道即用型凝胶的要求,有望在临床中获得应用。
- 田芳王玉柱黄超职瑞娜丁训诚李卫华
- 关键词：乙酸相转变体外释放
- dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激性的研究
- 2015年
- 目的研究dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜的刺激性。方法将9只雌性小型猪按体质量随机分为空白胶组、讲．扁桃酸阴道热敏凝胶剂组和市售壬苯醇醚凝胶（N-9凝胶）组，肌肉注射苯甲酸雌二醇400μg／kg（促发情），12d后建立小型猪阴道刺激性试验模型，阴道给予5mL凝胶，每日一次，连续给药7d，在给药前和末次给药后的24h与72h，收集阴道灌流（CVL）液，流式细胞仪计数炎性细胞和中性粒细胞数目；末次给药72h后处死小型猪，取阴道组织，观察阴道黏膜组织病理学改变。结果dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞数目明显低于N-9凝胶组（P〈0．05）。小型猪阴道黏膜组织HE染色显示，dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂处理组阴道黏膜无明显上皮破损、血管充血以及炎症细胞浸润，其刺激性评分（5．10±0．47），与空白胶组（3．30±1．60）比较无显著性差异（P〉0．05），明显低于N-9凝胶组（20．50±3．50）（P〈0．05）。结论dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激性较小。
- 夏敏杰黄超田芳王玉柱职瑞娜丁训城严钱勤李卫华
- 关键词：小型猪炎性细胞中性粒细胞
