黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10551322)
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
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- 猪胸导管内皮细胞分离与培养
- 2008年
- 目的:建立分离猪淋巴管内皮细胞的技术及其培养方法。方法:本研究采用的研究方法包括细胞培养、免疫组织化学、光镜观察。结果:猪的胸导管内皮细胞具有一般淋巴管内皮细胞的特征。抗人Ⅷ因子相关抗原的免疫过氧化氢酶染色反应阳性。结论:培养的猪胸导管内皮细胞可做为相关基础和临床研究的细胞模型。
- 张大伟李明秋冯克俭
- 关键词：淋巴管内皮细胞细胞培养胸导管淋巴管
- 人参皂苷Rg3诱导淋巴管内皮细胞凋亡作用的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨人参皂苷Rg3(20(R)-Ginsenoside Rg3)对淋巴管内皮细胞的抑制效应及凋亡诱导作用。方法:取健康猪的胸导管内皮细胞进行分离、培养;VIII因子对淋巴管内皮细胞进行鉴定。用含不同浓度人参皂苷Rg3处理淋巴管内皮细胞,采用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态学改变;Hoechst 33258荧光染色检测淋巴管内皮细胞凋亡。结果:经VIII因子对培养的淋巴管细胞进行鉴定,为典型淋巴管内皮细胞。随着药物浓度的升高,作用时间的延长,人参皂苷Rg3对淋巴管内皮细胞的生长抑制率逐渐增高;在人参皂苷Rg3作用下,淋巴管内皮细胞呈凋亡改变,出现凋亡小体。结论:人参皂苷Rg3能诱导淋巴管内皮细胞凋亡,抑制淋巴管内皮细胞增殖。
- 李晶波李明秋郑海兴冯克俭
- 关键词：淋巴管内皮细胞血管生成抑制因子人参皂苷RG3凋亡
- 血小板反应素-1对猪胸导管内皮细胞增殖和凋亡的影响
- 2009年
- 目的探讨血小板反应素-1(thrombospondin-1,TSP-1)对淋巴管内皮细胞(lymphatic endothelial cells,LECs)增殖和凋亡的影响。方法取健康猪的胸导管内皮细胞进行分离、培养;应用凝血因子VIII,血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)抗体联合对淋巴管内皮细胞进行鉴定;采用MTT法检测TSP-1对LEC的生长抑制作用;采用Hoechst33258荧光染色检测淋巴管内皮细胞凋亡。结果培养的淋巴管内皮细胞呈第VIII因子和VEGFR-3阳性反应,为典型淋巴管内皮细胞。MTT法证实,当浓度为0.8μg/ml￣2.0μg/ml时,TSP-1能明显抑制淋巴管内皮细胞的增殖,且抑制作用呈现剂量依赖关系。Hoechst33258证实,经TSP-1处理后淋巴管内皮细胞,可观察到其核周围有凋亡小体。结论TSP-1对淋巴管内皮细胞增殖有明显的剂量依赖性抑制作用,诱导淋巴管内皮细胞凋亡。
- 李明秋杨春壮孙平滕诚毅冯克俭
- 关键词：淋巴管内皮细胞血小板反应素-1凋亡
- 人参皂甙Rg3对淋巴管内皮细胞生成的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨人参皂甙Rg3[20(R)-Ginsenoside Rg3]对淋巴管内皮细胞迁移、增殖能力及凋亡的影响。方法用含不同浓度人参皂苷Rg3的培养液培养Hela细胞,收集培养上清并制备条件培养液(CM);取健康猪的胸导管内皮细胞进行分离、培养;Ⅷ因子、VEGFR-3抗体联合对淋巴管内皮细胞进行鉴定;通过划线刮除法和MTT法观察人参皂甙Rg3对淋巴管内皮细胞的迁移和增殖能力的影响;Hoechst33258荧光染色检测淋巴管内皮细胞凋亡。结果第Ⅷ因子和VEGFR-3抗体对培养的淋巴管细胞进行联合鉴定,为典型淋巴管内皮细胞;应用划线刮除法和MTT法对对照组与实验组进行比较显示:不同浓度的人参皂甙Rg3能够明显抑制淋巴管内皮细胞的增殖和游走,差异有统计学意义(P<0.01);Hoechst33258证实,经人参皂甙Rg3条件培养液处理后淋巴管内皮细胞,可观察到其核周围有凋亡小体。结论人参皂甙Rg3对淋巴管内皮细胞的迁移和增殖能力有明显的抑制作用,并且有剂量依赖性;人参皂甙Rg3能够诱导淋巴管细胞凋亡。
- 李明秋滕诚毅杨春壮张大伟刘跃光冯克俭
- 关键词：淋巴管内皮细胞凋亡人参皂甙RG3
- 血小板反应素-1对淋巴管内皮细胞生成的影响被引量：1
- 2008年
- 目的寻找一种安全、有效、实用的淋巴管生成抑制剂。方法取健康猪的胸导管内皮细胞进行培养,通过划线刮除法和MTT法来判定血小板反应素-1(thrombospondin-1,TSP-1)对细胞是否有抑制作用。结果应用划线刮除法,对对照组与实验组的细胞数及细胞游走距离进行统计学分析,两者P值﹤0.01;采用MTT法,对对照组与实验组吸光光度值进行统计学分析相比较,P﹤0.01。结论TSP-1对淋巴管内皮细胞的增殖和游走有明显的抑制作用,且有剂量依赖性。
- 李明秋刘跃光张大伟冯玉宽王莹冯克俭
- 关键词：淋巴管内皮细胞血管生成抑制因子血小板反应素-1
- 淋巴管内皮细胞体外培养模型的建立被引量：8
- 2008年
- 目的建立淋巴管内皮细胞培养模型,为淋巴管生成及肿瘤淋巴管转移等方面的研究提供细胞生物学基础。方法用胶原酶灌注消化的方法,从猪胸导管中分离出淋巴管内皮细胞进行原代及传代培养,应用免疫细胞化学法对培养的细胞进行鉴定。结果原代细胞培养3～5h后,大部分活力较高的内皮细胞已开始贴壁,12～24h后,内皮细胞己铺展形成由数个细胞组成的细胞群,1～2w后,细胞呈生长密集状并汇合形成单层,在倒置相差显微镜下,呈特征性"鹅卵石状"或"铺路石状"镶嵌排列生长。免疫荧光化学检测表明,淋巴管内皮细胞表达Ⅷ因子和血管内皮生长因子受体-3。结论该模型具有体内淋巴管内皮细胞的生物学特性,可用于淋巴管生成及肿瘤淋巴管转移等方面的体外研究。
- 李明秋张大伟刘跃光冯玉宽王莹冯克俭
- 关键词：淋巴管内皮细胞细胞培养胸导管
- 参麦注射液对淋巴管内皮细胞增殖及凋亡的影响
- 2011年
- 目的探讨参麦注射液对淋巴管内皮细胞（lymphatic endothelial cells,LECs）增殖和凋亡的影响。方法取健康猪的胸导管内皮细胞进行分离、培养;采用Ⅷ因子、血管内皮生长因子受体3（vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3）抗体联合对LECs进行鉴定;采用甲基噻唑基四唑（methyl thia-zolyl tetrazolium,MTT）染色法检测参麦注射液对LECs的生长抑制作用;采用Hoechst 33258荧光染色法检测LECs凋亡。结果形成了典型的LECs;当浓度为40~160μg/ml时,参麦注射液能明显抑制LECs的增殖,且抑制作用呈现剂量依赖关系;Hoechst 33258荧光染色检测证实,经参麦注射液处理后LECs,可观察到其核周围有凋亡小体。结论参麦注射液能抑制淋巴管生成和诱导LECs凋亡。
- 李明秋杨春壮王莹冯克俭
- 关键词：参麦注射液淋巴管生成淋巴管内皮细胞细胞凋亡
- 参麦注射液对淋巴管生成影响的研究被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨参麦注射液(简称参麦)对淋巴管生成的影响。方法:采用MTT法检测参麦对淋巴管内皮细胞增殖的影响;划线刮除法检测参麦对淋巴管内皮细胞迁移的影响。结果:参麦能抑制淋巴管内皮细胞增殖;参麦能明显抑制淋巴管内皮细胞迁移。结论:参麦能抑制淋巴管生成;抑制内皮细胞增殖和迁移可能是参麦抗淋巴管生成的机理之一。
- 李明秋郑海兴李晶波冯克俭
- 关键词：参麦注射液淋巴管生成淋巴管内皮细胞迁移
