湖南省卫生厅科研基金(B2004-090) 作品数:4 被引量:6 H指数:2 相关作者: 张志伟 姜浩 陈宏 更多>> 相关机构: 南华大学 中南大学 更多>> 发文基金: 湖南省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人核糖体蛋白L6编码基因的克隆及正反义真核表达载体的构建 被引量:2 2006年 目的:通过克隆人核糖体蛋白L6(RPL6)cDNA序列,构建其正反义真核表达载体,以探讨RPL6与白血病多药耐药的关系。方法:用RT-PCR技术扩增RPL6 cDNA序列,DNA重组技术构建其正反义真核表达载体。结果:成功扩增RPL6 cDNA序列,经DNA测序,证实与GenBank中的人RPL6编码区序列一致,酶切证实目的基因分别按正反两个方向亚克隆至真核表达载体。结论:成功克隆人RPL6 cDNA序列,并构建了正反义真核表达载体。 陈宏 姜浩 张志伟关键词:克隆 人核糖体蛋白L6对白血病K562/A02细胞耐药性的影响 被引量:2 2006年 目的观察核糖体蛋白L6(RPL6)表达的改变对白血病耐药性的作用。方法通过RT-PCR方法获得RPL6cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6cDNA重组质粒。以脂质体将正义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562/A02细胞,以MTT观察其对化疗药物耐药性的作用。结果转染正义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562细胞对阿霉素的耐药性比未转染的K562细胞增强3.25倍,转染反义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562/A02细胞对阿霉素的耐药性比未转染的K562/A02细胞降低62%。结论RPL6基因过表达在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用。 陈宏 姜浩 张志伟关键词:抗药性 K562/A02细胞 细胞株 K562/A02细胞核糖体蛋白L6的表达与多药耐药性的实验研究 2007年 目的观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病多药耐药性的作用。方法通过RT-PCR方法获得RPL6cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6cDNA重组质粒,以脂质体将正义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6cDNA真核表达质粒转染K562/A02细胞,以MTT法检测细胞对阿霉素(ADM)、长春新碱(VCR)、米托蒽醌(MIT)和依托泊苷(VP16)耐药性的作用。结果RPL6在K562/A02细胞中的表达较K562增高(P<0.001),转染正义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562细胞对ADM、VCR、MIT、VP16的耐药性比未转染的K562细胞分别增强3.25、1.95、2.00和3.48倍(P<0.05或0.01),转染反义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562/A02细胞对ADM、VCR、MIT、VP16的耐药性比未转染的K562/A02细胞分别降低62%、50%、56%和47%(P<0.05或0.01)。结论RPL6基因过表达在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用。 陈宏 姜浩 张志伟关键词:细胞株 多药耐药 核糖体蛋白L6在K562/A02和K562细胞株中的表达差异 被引量:2 2006年 目的探讨核糖体蛋白L6(ribosomal protein L6,RPL6)在急性髓细胞性白血病耐药细胞系K562/A02和敏感细胞系K562中的差异表达。方法分别从K562/A02和K562细胞中提取总RNA,以内参对照RT-PCR检测RPL6基因表达。结果RPL6在K562/A02细胞中的表达较K562高(P<0.001)。结论在耐药细胞系K562/A02高表达RPL6可能与白血病耐药有关。 陈宏 姜浩 张志伟关键词:K562 K562/A02 细胞株