工业生物技术教育部重点实验室基金(KLIB-KF200502)
- 作品数：6 被引量：34H指数：3
- 相关作者：许小平李忠琴王武杨海麟邬敏辰更多>>
- 相关机构：江南大学福州大学更多>>
- 发文基金：工业生物技术教育部重点实验室基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学生物学化学工程更多>>
- 偶联酶催化分光光度法测定黄嘌呤被引量：4
- 2007年
- 研究了以黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林反应为显色体系测定不同样液中黄嘌呤浓度的新方法。确定该测定方法的最佳反应条件为:黄嘌呤氧化酶(XO)0·32U/mL,辣根过氧化物酶(HRP)7·0U/mL,4-氨基安替比林(AAP)1mmol/L,苯酚(PA)6mmol/L溶于100mmol/LTris-HCl缓冲液(pH8·4);反应温度为37℃,保温时间为20min;检测波长为508nm。本方法测定黄嘌呤浓度的线性范围为0·2～10·0mmol/L,线性关系良好(R=0·9978),检测限为0·05mmol/L。方法操作简单易行,测定结果准确可靠,可有效应用于普通实验室和常规临床血液生化检测。
- 李忠琴邬敏辰许小平王武
- 关键词：黄嘌呤氧化酶辣根过氧化物酶酶活测定
- 辣根过氧化物酶分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的活性被引量：20
- 2006年
- 研究了以辣根过氧化物酶-苯酚- 4-氨基安替比林反应显色新体系,检测黄嘌呤氧化酶（XOD）活力的新方法.确定该酶活性测定的最佳条件为：辣根过氧化物酶（HRP） 7000 U/L,4-氨基安替比林（AAP） 1 mmol/L,苯酚（PA） 6 mmol/L,黄嘌呤（XAN） 1 mmol/L溶于50 mmol/L Tris-CL缓冲液（pH 8.4）;反应温度为37℃,保温时间为20 min;检测波长为508 nm.本方法测定XOD酶活的线性范围为5.0～100.0 U/L,线性关系良好（r=0.9992）,检出限为1.3 U/L.该方法操作简单易行,测定结果准确可靠.可有效应用于普通实验室和临床常规生化检测.
- 李忠琴许小平杨海麟王武
- 关键词：黄嘌呤氧化酶辣根过氧化物酶分光光度法
- 基于SASV8．1的黄嘌呤氧化酶产酶培养基的优化被引量：4
- 2008年
- 培养基优化属多变量目标函数优化,先通过Plackett-Burman法筛选出黄嘌呤、(NH_4)_2SO_4和CaCl_2为重要因素,然后采用Box-Behnken设计重要因素水平,同时应用SASV8.1软件做多元非线性回归,建立黄嘌呤氧化酶产酶培养基的优化模型。用模型预测培养基的最优组成。将预测值与验证值相比较,误差为2.6%,证明采用响应面法寻求最佳培养基组成是可行的;并且优化后黄嘌呤氧化酶产酶水平提高了5倍。
- 杨元营李忠琴邬敏辰许小平
- 关键词：黄嘌呤氧化酶PLACKETT-BURMAN
- 奶油黄嘌呤氧化酶的酶学性质研究被引量：2
- 2008年
- 利用反向高效液相色谱(RP-HPLC)测定该酶产物尿酸的生成量,研究黄嘌呤氧化酶的酶学特性。结果表明,在50mmol/LTris-HCl缓冲液和0.24mmol/L黄嘌呤的体系中,该酶检测反应的最适温度为37℃,最适pH8.4。XOD在pH7.0～9.0,40℃以下稳定,对黄嘌呤的Km值为0.043mmol/L。XOD酶激活剂包括水杨酸钠、半胱氨酸、组胺、硫酸铵、乙二胺四乙酸等。金属离子对其活性有抑制作用。低浓度表面活性剂Tween80、SDS和TritonX-100对该酶活力影响不明显。
- 李忠琴许小平王武
- 关键词：黄嘌呤氧化酶酶学特性稳定性
- 双酶偶联催化分光光度法测定血清次黄嘌呤被引量：3
- 2008年
- 依据黄嘌呤氧化酶和辣根过氧化物酶催化反应的特征,研究了以黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林为反应显色体系,建立了检测血清和组织中次黄嘌呤浓度的新方法。通过对该测定体系影响因素的考察,确定最佳反应条件为：黄嘌呤氧化酶（XO,EC1.2.3.22）0.32U·mL^-1,辣根过氧化物酶（HRP）7.0U·mL^-1,4-氨基安替比林（AAP）1mmol·L^-1,苯酚（PA）6mmol·L^-1溶于100mmol·L^-1 Tris-HCL缓冲液（pH8.3）;反应温度为37℃,保温时间为8min;检测波长为508nm。测定次黄嘌呤浓度的线性范围为0.2～3.0mmol·L^-1,线性关系良好（r=0.9979）,检测限为0.05mmol·L^-1。方法操作简单易行,测定结果准确可靠。可有效应用于普通实验室和常规临床血液生化检测。
- 李忠琴许小平王武
- 关键词：黄嘌呤氧化酶辣根过氧化物酶
- 节杆菌M3黄嘌呤氧化酶的诱导效应研究被引量：2
- 2008年
- 目的:寻找高效廉价的诱导物,并研究其诱导条件,以期进一步提高节杆菌M3(ArthrobacterM3)产黄嘌呤氧化酶(xan-thine oxidase,简写为XOD)水平。方法:以产酶水平和生产成本为标准,比较了几种化合物对ArthrobacterM3的诱导产酶的效果,选出最适诱导物,并对其诱导条件进行了研究。结果:几种化合物中,次黄嘌呤的诱导效果最佳。对次黄嘌呤诱导效应的研究发现,在发酵前期加入3g/L的次黄嘌呤对产黄嘌呤氧化酶的诱导效果最好。节杆菌M3降解次黄嘌呤的代谢产物中,尿素的存在对XOD的合成有强的抑制作用,而添加甘氨酸能促进XOD的产生。结论:在最佳条件下,次黄嘌呤诱导节杆菌M3产酶水平728.33U/L,超过了国内所报道的最高水平。
- 王静孙艳杨海麟王武
- 关键词：节杆菌黄嘌呤氧化酶次黄嘌呤
