湖南省研究生创新基金(CX2009B168)
- 作品数：5 被引量：22H指数：4
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- 相关机构：湖南中医药大学重庆三峡医药高等专科学校更多>>
- 发文基金：湖南省研究生创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 养心通脉有效部位方与急性心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞的动员及定向归巢被引量：12
- 2010年
- 背景:急性梗死心肌修复过程中,寻找可有效提高外周血骨髓间充质干细胞的数量、并动员其定向归巢于损伤心肌的骨髓间充质干细胞动员剂尤为关键。目的:探讨养心通脉有效部位方对急性心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞动员入血及定向归巢于梗死心肌的影响。方法:养心通脉有效部位方主要成分包括人参皂苷、丹参酮ⅡA、总生物碱、人参多糖等,由中南大学药学院依课题组稳定的制作工艺制作提供。SD大鼠70只,取8只大鼠作为正常对照组,剩余62只大鼠建立急性心肌梗死模型。取造模成功的32只大鼠,随机分为养心通脉有效部位方组、复方丹参注射液组、重组人粒细胞集落刺激因子组、模型对照组,各组均于造模3h后给与对应药物,连续5d。流式细胞仪检测外周血CD34+细胞数,免疫组化染色检测梗死心肌边缘区CD34+细胞数。结果与结论:与模型对照组比较,重组人粒细胞集落刺激因子组、养心通脉有效部位方组外周血CD34+细胞数均明显增加(P<0.01);心肌梗死边缘区胞浆CD34+细胞数均显著增加(P<0.01)。与重组人粒细胞集落刺激因子组比较,养心通脉有效部位方组心肌梗死边缘区胞浆CD34+细胞数显著增加(P<0.01)。养心通脉有效部位方能促进骨髓干细胞动员入血,并定向归巢于梗死心肌,其作用与重组人粒细胞集落刺激因子大体相当,在归巢CD34+细胞方面甚至强于重组人粒细胞集落刺激因子,是一种良好的骨髓间充质干细胞动员剂。
- 李勇华袁肇凯郑景辉王丽萍简维雄黄献平
- 关键词：动员归巢重组人粒细胞集落刺激因子骨髓间充质干细胞
- 骨髓间充质干细胞移植大鼠缺血心肌后GATA-4mRNA的表达被引量：1
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)移植于大鼠缺血心肌后,心脏早发育基因GATA-4 mRNA的表达。方法设模型组、假手术组和空白对照组,其中模型组采用"冠脉结扎法"建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型。收集从SD雄性大鼠胫骨和股骨骨髓中分离、培养、鉴定后的MSCs,密度调至3×106/100μL悬液,移植于缺血心肌边缘组织的3个位点直接注入共100μL的MSCs细胞悬液,假手术组和空白对照组均在与模型组相同注射部位的3个位点直接注入共100μL的MSCs细胞悬液,28 d后处死大鼠进行相关实验样本处理。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测心肌组织中GATA-4 mRNA的表达。结果 MSCs移植模型组和假手术组的大鼠心肌中存在GATA-4 mRNA的表达;而空白组的心肌中未检出GATA-4 mRNA的表达,对其IOD值半定量分析,模型组高于假手术组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。结论 MSCs在进入缺血心肌环境后,细胞内的心肌特异转录过程被再次激活,确立了MSCs向心肌细胞分化的方向。
- 黄献平郑景辉袁肇凯李勇华王丽萍简维雄孙贵香
- 关键词：心肌缺血骨髓间充质干细胞心肌梗死GATA-4
- 心血瘀阻证微环境对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响被引量：7
- 2010年
- 目的观察心血瘀阻证微环境(Heart-Blood Stagnation Syndrome Microenvirment)对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌样细胞分化的影响。方法采用全骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标志;细胞培养基中加入心血瘀阻证大鼠坏死心肌组织和血清的方法模拟心血瘀阻证微环境;四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察心血瘀阻证微环境对MSCs增值率从而选择最大有效浓度;第4代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化;相差显微镜、免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果鉴定心肌细胞。结果大鼠MSCs细胞表面抗原CD11b和CD45阳性细胞率小于2%,CD90阳性率达到98%以上;疫细胞化学染色显示心血瘀阻证微环境组、5-aza组和健康大鼠微环境组中Desmin和MHC呈阳性,其中心血瘀阻证微环境组表达高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05),空白对照组未见表达;RT-PCR结果显示心血瘀阻证微环境组、5-aza组和健康大鼠微环境组细胞肌钙蛋白(cTnI)和心脏早发育基因GATA-4 mRNA表达水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05),心血瘀阻证微环境组显著高于5-aza组和健康大鼠微环境组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外模拟大鼠心血瘀阻证微环境能诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞。
- 郑景辉李勇华王丽萍袁肇凯黄献平简维雄孙贵香
- 关键词：心血瘀阻证微环境骨髓间充质干细胞细胞培养
- 养心通脉有效部位方动员心肌梗塞大鼠MSCs归巢及对心功能和病理的影响被引量：4
- 2010年
- 目的探讨养心通脉有效部位方(active principle region of Yangxing Tongmai Formula,apr-YTF)促进急性心肌梗塞大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)定向归巢及其对心功能和病理的影响。方法将造模成功的大鼠32只,随机分为apr-YTF组、香丹注射液组、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)组、模型对照组,每组8只,均于造模3h后给予相应药物,连续5d;均于造模后第2天开始腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),连续4d。用PcLab生物医学信号采集处理系统检测记录心功能,masson's三色染色检测梗塞心肌病理,Image-Pro Plus6.0病理图象分析系统测量梗塞区瘢痕面积百分比,免疫组化的方法检测梗塞心肌边缘区的CD34+染色阳性细胞数、Brdu与肌钙蛋白I(cTn I)双染阳性细胞数。结果 rhG-CSF组和apr-YTF组的心功能4个指标较模型组均有显著改善(P<0.05或P<0.01);两组的心肌梗塞边缘区瘢痕组织内可见新生的心肌细胞和血管,恢复的趋势较为明显;两组的心室肌瘢痕面积百分比较模型组和香丹组显著减小(P<0.01);两组大鼠梗塞心肌边缘区CD34+染色阳性的细胞数、Brdu与cTn I双染阳性的细胞数较模型组显著增加(P<0.01),apr-YTF组较rhG-CSF组显著增加(P<0.01)。结论 pr-YTF能促进MSCs归巢并因此而促进心肌细胞和心功能恢复。
- 李勇华郑景辉王丽萍简维雄黄献平袁肇凯
- 关键词：归巢心功能病理
- 养心通脉有效部位方对MSCs向心肌样细胞分化的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察养心通脉有效部位方对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分化为心肌样细胞的诱导作用。方法体外培养大鼠MSCs,设养心通脉有效部位方(YTF)组、5-氮胞苷(5-aza)阳性对照组和低糖DMEM组,体外诱导分化心肌样细胞;用免疫细胞化学方法观测其心肌肌丝蛋白(Desmin)、肌球蛋白重链(MHC)的表达,用RT-PCR的方法检测心肌转录因子GATA-4 mRNA的表达。结果大鼠MSCs体外向心肌样细胞分化诱导后,在DMEM组中未发现Desmin和MHC阳性细胞;而YTF组和5-aza组的Desmin及MHC免疫组化染色均可见阳性免疫复合物,与DMEM组比较,YTF组和5-aza组Desmin、MHC、GATA-4 mRNA表达的相对光密度(IOD)值均明显提高(P<0.01,P<0.05),而且YTF组Desmin、MHC的IOD也明显高于5-aza组(P<0.05),但YTF组GATA-4 mRNA的IOD值与5-aza组比较无统计学差异。结论 YTF在体外可诱导MSCs向心肌样细胞分化。
- 黄献平袁肇凯郑景辉李勇华王丽平简维雄孙贵香王萍黄勃喻松仁
- 关键词：心肌样细胞分化
- 心血瘀阻证微环境的背景研究
- 1微环境的概念、特点及其学术趋势微环境是一种相对模糊的状态,在MeSH(Medical Subject Headings,医学主题词表)1999年首次引进Microenvironment(微环境)概念,列于Ovarian...
- 郑景辉袁肇凯李勇华王丽萍简维雄黄献平
- 文献传递
