国家自然科学基金(30460045)
- 作品数：21 被引量：129H指数：7
- 相关作者：官志忠齐晓岚肖雁单可人顾然更多>>
- 相关机构：贵阳医学院贵阳中医学院贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- α7神经型尼古丁受体的神经保护作用及其与阿尔茨海默病发病的关系被引量：5
- 2008年
- 目的探讨α7神经型尼古丁受体（nAChR）表达改变与淀粉样蛋白前体蛋白（APP）代谢、细胞存活率及脂质过氧化水平的关系，以了解α7 nAChR的神经保护作用，以及该受体水平与阿尔茨海默病发病的关系。方法设计并合成α7 nAChR基因特异性小分子干扰RNA（siRNA），转染SH-SY5Y细胞；用20μmol／LDMXB处理细胞；培养48h后收集细胞，分别应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot方法检测转染细胞及DMXB处理后的细胞α7 nAChR mRNA及蛋白表达水平的变化；并用1μmol／L β-淀粉样肽25-35（Aβ25-35处理细胞，测定分泌型APP、总APP蛋白表达的变化；比色法测定脂质过氧化产物含量；MTT方法测定细胞活力。结果转染siRNA后，与对照组相比，α7 nAChR mRNA及蛋白表达量降低（抑制率分别为80％和69％）、脂质过氧化产物丙二醛含量明显增加、分泌型APP表达下降、细胞活力明显低于对照组，且能增强Aβ的细胞毒性作用；用DMXB处理细胞后能使α7 nAChR的表达增加23％、增加分泌型APP的表达、并能对抗Aβ引起的细胞活力下降及脂质过氧化水平的增强。结论α7 nAChR可能通过增强α-分泌酶对APP的切割、增强细胞抗氧化能力及对抗Aβ的神经毒性作用来发挥神经保护作用，其表达减少与阿尔茨海默病的发病机制有密切的关系。
- 齐晓岚官志忠
- 关键词：阿尔茨海默病RNA干扰淀粉样Β蛋白前体
- 脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠学习记忆及胆碱酯酶活性的影响被引量：9
- 2010年
- 目的:研究脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠学习记忆及胆碱酯酶活性的影响,探讨其对血管性痴呆治疗的作用及机制。方法:采用改良四血管法建立血管性痴呆模型;Morris水迷宫进行行为学测试,Ellman比色法测定海马匀浆中乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶活性。结果:脑通复方制剂能提高大鼠学习记忆成绩,降低海马乙酰胆碱酯酶活性。结论:脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠学习记忆能力下降有明显的保护作用,其作用机制可能与抑制乙酰胆碱酯酶活性作用密切相关。
- 肖雁吴昌学黄勇况时祥王永林官志忠
- 关键词：血管性痴呆学习记忆胆碱酯酶
- 脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠治疗作用的探讨被引量：2
- 2010年
- 目的:研究脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响,探讨中药对血管性痴呆(VaD)大鼠空间学习记忆减退的防治作用。方法:采用改良Pulsinelli四血管阻断(4-VO)法制造VaD模型,设脑通复方制剂组、模型组、假手术组、盐酸多奈呱齐(安力申)组,分别测定干预后各组大鼠大脑海马组织中的SOD活性、MDA含量。结果:灌胃30 d后,与模型组相比,脑通复方制剂可改善VaD大鼠学习记忆能力,显著提高大鼠海马组织中SOD活性、明显降低MDA含量。结论:脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退有明显防治作用,其机制可能与其提高VaD大鼠脑组织中SOD活性、降低MDA含量作用有关。
- 肖雁周凡吴昌学齐晓岚况时祥官志忠
- 关键词：超氧化物歧化酶丙二醛
- β-淀粉样肽对人SH-SY5Y神经细胞膜性脂质和胆碱能受体的影响被引量：6
- 2006年
- 目的研究β-淀粉样肽对人SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞膜性脂质和胆碱能受体的影响及其意义。方法选择不同浓度β-淀粉样肽1-42处理SH-SY5Y细胞,用比色法测定细胞四甲基偶氮唑盐(MTT)还原率、脂质过氧化产物(丙二醛)、蛋白氧化产物(蛋白羰基)及磷脂含量,高效液相色谱法测定细胞胆固醇及辅酶Q水平,放射性配体-受体结合实验测定胆碱能受体-配体结合率,W estern印迹方法测定细胞膜神经型尼古丁受体亚单位α3及α7蛋白表达水平,并对照研究维生素E的抗氧化作用。结果用低浓度(0.1μmol/L)β-淀粉样肽处理细胞后即出现MTT还原率和磷脂水平的下降,丙二醛及蛋白羰基水平升高,用较高浓度(1μmol/L)β-淀粉样肽处理细胞后胆碱能受体-配体结合密度、尼古丁受体亚单位α3,α7蛋白水平及辅酶Q含量降低,但未引起细胞胆固醇含量的改变。维生素E能明显对抗β-淀粉样肽的细胞毒性作用。结论β-淀粉样肽引起细胞膜脂质成分改变以及胆碱能受体水平降低,这些改变可能与其诱导的氧化应激增强有关。
- 齐晓岚单可人肖雁刘如玉顾然官志忠
- 关键词：淀粉样Β蛋白
- 神经型尼古丁乙酰胆碱受体在阿尔茨海默病发病机制中的作用被引量：9
- 2009年
- 唐智单可人官志忠
- 关键词：阿尔茨海默氏病胆碱能系统
- 阿尔茨海默病患者血液白细胞尼古丁受体α4和β2 mRNA表达水平变化被引量：1
- 2008年
- 目的研究阿尔茨海默病(AD)患者血液白细胞神经型尼古丁受体(Nicotinicacetylcholinereceptors,nAChR)α4和β2亚单位mRNA相对表达水平是否存在改变。方法采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测比较29例AD患者和33例健康对照老年人血液白细胞中nAChR亚单位α4和β2mRNA的相对表达水平。结果AD组nAChR亚单位α4和β2mRNA相对表达水平(与Cyclophilin的百分比分别为1.04±0.16、1.03±0.15)均较正常组(与Cyclophilin的百分比分别为1.41±0.21、2.19±0.16)显著降低(P<0.05);而在年龄和性别的组内比较,均无显著差异(P>0.05)。结论nAChR亚单位α4和β2mRNA在AD患者血液中的相对表达水平较正常对照明显降低。血液白细胞nAChR亚单位的变化也可以考虑作为AD的生物学标志之一。
- 张蓝江肖雁单可人任锡麟刘芳况时祥官志忠
- 关键词：阿尔茨海默病尼古丁乙酰胆碱受体
- β-淀粉样蛋白对大鼠大脑α7尼古丁受体表达和学习记忆能力的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究β-淀粉样蛋白（Aβ1~42）对大鼠大脑神经型尼古丁受体α7亚单位表达及学习记忆能力的影响,探讨这些改变在阿尔茨海默病（AD）发病机制中的作用。方法用立体定向法将Aβ1~42（1mg/ml,5μl）注入Wistar大鼠侧脑室,用免疫组化方法测定大鼠大脑中Aβ1~42的沉积,用Western印迹法和RT-PCR方法分别测定神经型尼古丁受体α7亚单位在蛋白和基因水平的表达,用水迷宫法检测大鼠的学习记忆能力。结果与对照组比较,经Aβ1~42侧脑室注射后的大鼠大脑皮层出现明显Aβ1~42沉积;神经型尼古丁受体α7亚单位蛋白质表达水平明显降低;α7亚单位mRNA表达水平明显升高;大鼠学习记忆能力明显降低。结论Aβ1~42引起神经型尼古丁受体α7亚单位的表达明显改变,并导致大鼠学习记忆力降低,可能是AD发病机制中的重要因素。
- 刘如玉顾然齐晓岚陈佳刘家骝官志忠
- 关键词：Β-淀粉样蛋白学习记忆
- 肉苁蓉对抗β-淀粉样肽神经细胞的毒性作用研究被引量：13
- 2008年
- 目的:研究中药肉苁蓉对神经母细胞瘤细胞烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制,以探讨其在阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)治疗中的作用。方法:比色法测定细胞MTT还原率筛选肉苁蓉安全浓度范围,并用Aβ25-35处理细胞后,测定MTT还原率,蛋白质印迹法(Western blotting)测定烟碱型乙酰胆碱受体α3、α7蛋白表达的变化;TBA比色法测定脂质过氧化产物(丙二醛)的水平。结果:肉苁蓉能提高细胞α3及α7烟碱型乙酰胆碱受体亚单位蛋白质表达水平;并能对抗Aβ25-35引起的α3和α7受体亚单位蛋白质水平降低;同时能减弱Aβ25-35引起的细胞损伤和脂质过氧化水平升高。这些作用随浓度的增加而增强。结论:肉苁蓉能上调烟碱型乙酰胆碱受体亚单位蛋白表达水平,且能对抗Aβ25-35的神经毒性作用,在AD的治疗中可能起到一定作用。
- 齐晓岚顾然郝小燕单可人任锡麟官志忠
- 关键词：肉苁蓉神经母细胞瘤细胞尼古丁受体Β-淀粉样蛋白
- 血管性痴呆患者血中胆碱酯酶活性及神经型尼古丁受体mRNA表达水平变化被引量：5
- 2008年
- 目的探讨血管性痴呆(vascular dementia,VD)患者血中胆碱酯酶活性及神经型尼古丁乙酰胆碱能受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAchR)mRNA表达的变化。方法分组比较测定59例血管性痴呆、33例正常老年人空腹血浆胆碱酯酶浓度及血液白细胞nAchRα4、β2亚单位mRNA表达水平。结果血管性痴呆组与对照组乙酰胆碱酯酶活性分别为(1.70±1.17nmol/min/ml,2.18±0.87nmol/min/ml),VD组与对照组相比差异有显著性(P<0.05);VD组与对照组丁酰胆碱酯酶活性分别为(61.08±38.23nmol/min/ml,70.41±28.82nmol/min/ml),相比差异无显著性(P<0.05)。乙酰胆碱酯酶及丁酰胆碱酯酶均无性别的差异;VD患者血液白细胞nAchRα4亚单位mRNA表达水平(0.926±0.411)较正常对照组(1.41±0.22)降低(P<0.05);VD患者nAchR β2亚单位mR-NA表达水平(2.14±0.18)与正常对照组(2.19±0.16)差异无显著性(P<0.05)。结论血管性痴呆患者血浆乙酰胆碱酯酶活性和血液白细胞中nAchR α4亚单位mRNA表达水平较正常对照老年人降低,但丁酰胆碱酯酶和nAch β2 mRNA无改变,这些变化可能对血管性痴呆的诊断有一定临床意义。
- 肖雁张蓝江齐晓岚单可人况时祥刘芳官志忠
- 关键词：血管性痴呆乙酰胆碱酯酶丁酰胆碱酯酶
- 天参益智复方对β淀粉样蛋白引起的神经细胞中尼古丁受体表达降低及细胞毒性损害的拮抗作用被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨天参益智复方对β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)引起的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞尼古丁受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)亚单位在蛋白质和mRNA水平降低、细胞损伤及脂质过氧化的拮抗作用。方法:选取一定浓度的天参益智复方制剂预处理SH-SY5Y细胞后,再加入Aβ蛋白处理,比色法测定细胞甲基噻唑基四唑还原率,从细胞整体水平了解此复方制剂对细胞活性的影响。蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链法分别从蛋白质水平和mRNA水平测定nAChR亚单位α3、α7表达的变化。硫代巴比妥酸比色法测定脂质过氧化产物丙二醛的水平,以了解该复方制剂的抗氧化能力。结果:安全浓度的天参益智复方对α7的蛋白质表达水平有上调作用;能对抗Aβ引起的α3和α7 nAChR亚单位蛋白质水平降低及α7亚单位mRNA表达低下,但对α3亚单位mRNA水平无明显影响;能减弱Aβ引起的细胞损伤和脂质过氧化水平升高。结论:天参益智复方制剂能在蛋白质水平上调尼古丁受体α7亚单位,对抗Aβ引起的nAChR表达降低及神经毒性作用,在阿尔茨海默病的治疗中可能起到一定作用。
- 顾然刘如玉张蓝江郝小燕肖雁齐晓岚单可人任锡麟罗俊官志忠
- 关键词：神经母细胞瘤乙酰胆碱受体Β淀粉样蛋白
