国家自然科学基金(30340087)
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 相关作者：韩文瑜赵爱珍郑伟徐兴然韩俊友更多>>
- 相关机构：吉林大学吉林省水产科学研究所西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅应用基础研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其抗菌活性被引量：7
- 2007年
- 从中国鲎血细胞RT-PCR扩增抗菌肽tachyplesins基因,经改造构建原核和真核表达载体pET-KRN、pPIC9-KRY,并分别在大肠杆菌DE3和毕赤酵母GS115中诱导表达。用Tris-Tricine SDS-PAGE检测并进一步电洗脱纯化表达产物,经体外生物活性测定表明,表达产物KRN对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、伤寒沙门菌的抑菌环为25、22、25、16mm;MIC值为3.57、7.14、3.57、14.28mg/L。表达产物KRY对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、伤寒沙门菌和李氏杆菌的抑菌环为26、22、25、18、16mm;MIC值为1.57、3.14、1.57、6.28、6.28mg/L,对水霉的抑菌效果尤其显著,抑菌环达35mm。
- 郑伟韩文瑜韩俊友张钫雷连成乔红伟
- 关键词：中国鲎抗菌肽抗菌活性
- 中国林蛙抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达及其活性检测被引量：4
- 2008年
- 将中国林蛙皮肤抗菌肽基因(RC)克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,使之准确融合于а交配因子分泌信号,然后通过电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His-,构建pPIC9K/RC。将筛选出的高效表达的重组转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,28～30℃诱导后,经Tricine SDS-PAGE检测,表达产物在а信号因子引导下分泌到培养基中。分泌到培养基中的表达产物能够抑杀细菌和抑制肿瘤细胞生长。对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的引物进行PCR扩增。结果表明,中国林蛙皮肤抗菌肽基因能以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并形成转录产物。
- 乔红伟韩俊友赵瑞利胡博谢芳郑伟雷连成江利娜韩文瑜
- 关键词：中国林蛙抗菌肽酵母表达
- 生物抗菌肽的研究现状被引量：6
- 2005年
- 抗菌肽为生物机体内天然免疫系统的重要组成部分,具有抗细菌、抗病毒、抗真菌等多种生物学活性。抗菌肽或者类似物主要通过使细胞膜通透性增大而抑制或者杀死靶细胞,具有作为新型抗生素和食品添加剂的潜在应用前景。不同抗菌肽之间、抗菌肽与传统抗生素具有协同效应,这在一定程度上拓宽了抗菌肽的应用范围。
- 赵爱珍韩文瑜孟宪荣刘霞曾林
- 关键词：抗菌肽生物学活性
- 中国林蛙皮肤抗菌肽基因的cDNA克隆被引量：7
- 2006年
- 抗菌蛋白蛙皮抗菌肽,是两栖类动物中存在的天然免疫物质,在蛙类中仍然保持着一定的活性。我们用提取中国林蛙皮肤总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段,并与GenBank上登陆的其他蛙类的皮肤抗菌肽序列进行比较,发现此序列是一个新的蛙皮肤抗菌肽序列。PCR产物与pMD18-T连接,得到阳性重组体pMD18-RTCD,将阳性重组体进行测序,分析蛙皮素的氨基酸序列,显示它属于蛙皮抗菌肽家族。此外,中国林蛙抗菌肽氨基酸序列包含C-末端残基,同时具有两栖类动物抗菌肽的特征。这些信息对将来研究两栖类动物的天然免疫的分子机制具有重要作用,为应用基因工程技术对我国林蛙抗菌肽基因进行克隆表达奠定了基础。
- 乔红伟韩俊友赵瑞利郑伟韩艳韩文瑜
- 关键词：中国林蛙PCR克隆
- Enterocin A在大肠杆菌中的表达及活性检测被引量：8
- 2008年
- 将含有编码成熟Enterocin A的基因片段BAE2克隆到pET-28 a(+)大肠杆菌表达系统中,在IPTG诱导下,工程菌表达了可溶性的融合多肽His tag-enterocin A,以金属鳌和层析对其进行纯化。利用琼脂扩散试验检测表达产物及纯化产物的抑菌活性。结果表明:His tag-enterocin A具有抗李斯特氏菌活性,但对所选用的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌不表现抑制作用,显示与Enterocin A相似的抑菌活性。
- 赵爱珍韩文瑜徐兴然冯新
- 关键词：ENTEROCIN抑菌活性
- Enterocin A结构基因和免疫基因的克隆及序列特征分析被引量：1
- 2005年
- 采用PCR技术从屎肠球菌的染色体DNA上扩增到1条529bp的DNA片段entAIc,以pGEM-T为载体,将该基因片段克隆到大肠杆菌中,对阳性重组质粒pGAI测序。序列分析结果表明片段entAIc含有2个ORF,EnterocinA结构基因entA和免疫基因entI,2个基因紧密相连。核苷酸序列分析显示,不同菌株来源的entA和entI具有较高的同源性,分别达到99.87%和99.76%。氨基酸序列分析显示不同菌株来源的EnterocinA前体完全相同,免疫蛋白仅有1个氨基酸差异。
- 赵爱珍韩文瑜徐兴然
- 关键词：结构基因核苷酸序列分析氨基酸序列分析染色体DNA菌株来源
- 肠球菌素A与GST的融合表达及抑菌活性检测被引量：2
- 2006年
- 将编码成熟肠球菌素A(enterocin A)的基因片段BAE1克隆到pGEX-3X大肠埃希菌表达系统中,经IPTG诱导后能够高效表达融合蛋白GST-enterocin A。可溶性蛋白组分具有类似enterocin A的抗菌活性,但少量的二硫键正确折叠的GST-enterocin A使该组分表现很弱的抗李斯特菌活性,为enterocin A的生产及功能研究奠定了基础。
- 赵爱珍韩文瑜王金玲徐兴然
- 关键词：融合蛋白抑菌活性
