科技型中小企业技术创新基金(2009C0014)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：张志善饶平凡高小尧翁惠玲严晟旻更多>>
- 相关机构：福州大学福建出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：科技型中小企业技术创新基金福建省科技计划重点项目国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三聚氰胺多克隆抗体的制备、分离纯化及ELISA方法的测试研究被引量：6
- 2011年
- 目的:制备具有高特异性的三聚氰胺多克隆抗体,建立三聚氰胺快速检测方法。方法:通过抗原偶联嫁接技术,将不具备免疫原性的三聚氰胺与特定蛋白连接,制备免疫抗原(MB1st、MB2st、KM和ML2)。对家兔进行皮下多点注射,初次免疫后取抗体血清,用SDS-PAGE检测血清中IgG的产生情况。采用酶联免疫吸附法测定各抗体血清的效价,最终以亲和层析法纯化血清,获得高特异性的抗体。将纯化后的抗体包被于酶标板上,建立三聚氰胺ELISA方法,并验证其有效性。结果:通过SDS-PAGE证明免疫前、后血清中IgG显著增长。进一步使用间接ELISA法测得各兔血清效价。MB1st免疫的效果最佳,其抗体血清对三聚氰胺的竞争率由纯化前的36.97%上升至纯化后的75.57%。MB2st免疫的抗体血清对三聚氰胺的竞争率由纯化前的30.80%上升至纯化后92.43%。KM免疫的抗体血清效价较低,其对三聚氰胺的竞争率由纯化前的11.95%上升至纯化后的96.09%。ML2免疫效价低,且其抗体血清在纯化前、后均对三聚氰胺没有显著的竞争性。由此建立ELISA方法,并初步验证了该方法的有效性。结论:本试验中制备的三聚氰胺抗体血清,经分离、纯化后得到对三聚氰胺具有较高竞争性的多克隆抗体,为建立酶联免疫方法,以检测食品中三聚氰胺含量提供了理论基础。
- 李昊翁惠玲黄启龙沈晓妙高小尧严晟旻张志善王浙峰饶平凡
- 关键词：三聚氰胺多克隆抗体酶联免疫吸附特异性
- 三聚氰胺多克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2010年
- 用三聚氰胺偶联蛋白为抗原,按不同的时间规律及抗原剂量对成年兔进行免疫,获得特异性的三聚氰胺多克隆抗体.效价检验应用蛋白质电泳和间接ELISA方法.应用10%及12.5% SDS-PAGE,验证血清中IgG抗体的产生情况,再用间接酶联免疫吸附试验测得第4次免疫后抗体效价达到1.2×107.此法易于实施,且获得的血清样品具有较高的效价,为今后三聚氰胺多克隆抗体的分离纯化提供了可靠的实验依据.
- 李昊翁惠玲郑跃进沈晓妙高小尧张志善严晟旻饶平凡
- 关键词：三聚氰胺多克隆抗体ELISA
