国家自然科学基金(30470938)
- 作品数：9 被引量：50H指数：5
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- 相关机构：厦门大学福建师范大学中国科学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 文昌鱼胚胎的程序化冷冻保存被引量：2
- 2007年
- 文昌鱼在进化和发育生物学中有重要科学研究价值,然而由于文昌鱼实验室繁殖受产卵季节等因素的限制,以其胚胎为材料的研究工作受到局限,胚胎冷冻保存是解决这一问题的有效途径之一。本文首次对文昌鱼(Branchiostoma japonicum)胚胎的程序化冷冻保存进行了研究,通过筛选合适的程序化抗冻液、适宜的胚胎发育阶段,以及比较不同平衡处理时间、植冰温度、保存温度和洗脱时间对文昌鱼胚胎冷冻保存的影响。结果表明:几种抗冻液中,A2的效果较好,对胚胎的毒性小;原肠中期胚胎较其它时期对抗冻液的耐受力更强,适宜进行冷冻保存;胚胎在抗冻液中的最佳平衡处理时间为40-50min;冷冻降温时,适宜的植冰温度为-7.0℃--10.0℃;植冰后进行程序化冷冻,目前能稳定得到存活胚胎的最低保存温度为-15℃;此外,不同的洗脱时间对胚胎的存活率无显著影响。根据优化后的条件,对文昌鱼胚胎进行程序化冷冻保存(-196℃)实验,获得1粒存活的胚胎,并孵化出膜,发育至两鳃裂时期,幼鱼共存活了8d,但形态畸形。结果提示文昌鱼胚胎冷冻保存的可行性,但需要进一步优化包括抗冻液在内的各种条件,以提高存活率。
- 孙毅张秋金王义权
- 关键词：文昌鱼胚胎冷冻保存
- 几种环境因子对叉鞭金藻种群增长的影响被引量：3
- 2006年
- 运用实验生态学方法研究了海产动物重要饵料生物——叉鞭金藻（Dicrateria sp．）在室内大量培养的条件和方法。结果表明，营养盐浓度对叉鞭金藻的生长没有明显影响，以1倍浓度的F／2培养基最佳；水温21～27℃的范围都适合艾鞭金藻的培养，27℃下的生长速度和种群最终密度都高于其他温度；在实际应用中，接种密度以10×10^4，30×10^4个mL为最佳；在收获方式上，一次性培养与半连续培养的最终收获量没有显著差别，但半连续培养较一次性培养更有利于操作和减轻工作量。
- 钟婧吕小梅李光方少华王义权
- 关键词：饵料生物
- 文昌鱼的实验室繁育及子二代获得被引量：11
- 2006年
- 文昌鱼特殊的进化地位、简单的器官系统和终生透明的躯体等特征,使其很有希望成为一个新型实验室模式动物。要实现文昌鱼的模式动物化,实验室内全人工条件下繁殖是关键的第一步。为此,我们于2003年9月和2004年4月两次采集产于厦门海域的2种文昌鱼,开展实验室内养殖研究。经过3年多的持续实验室养殖,继2005年夏季于实验室内繁殖出子一代文昌鱼后,又在2006年夏季成功获得了这两种文昌鱼的子二代,初步实现文昌鱼在实验室内的全人工养殖。对子代文昌鱼养殖的初步观察发现,不同水温对生长发育速度有一定影响,提示有可能通过水温控制实现文昌鱼一年多次产卵的目的。目前这两种文昌鱼子二代幼体已完成变态,进入亚成体生长发育阶段,其体长分别已达14.6mm(日本文昌鱼Branchiostomajaponicum)和6.5mm(白氏文昌鱼B.belcheri)。
- 王义权张秋金吕小梅钟婧孙毅
- 关键词：文昌鱼模式动物子二代
- 使用SSR和mtVNTR分子标记识别扬子鳄个体被引量：9
- 2005年
- 扬子鳄是中国特有的濒危物种,为有效避免种群衰退,最大限度地保持该物种现有的遗传多样性,有必要对种群的个体进行个体识别研究,以便重建遗传谱系,指导现有繁育工作。应用SSR(Simplesequencere-peats)与mtVNTR(VariablenumbertandemrepeatsonmitochondrialDNA)两种分子标记对扬子鳄39个个体进行了个体识别分析,结果显示:8个SSR座位的累计个体识别率与累计父权排除率分别达0·9968、0·7697,mtVNTR的个体识别率为0·9146,联合SSR与mtVNTR两种分子标记的累计个体识别率理论值达0·9997,并在实际分析中将39个扬子鳄个体完全区分开,其区分能力较RAPD(RandomamplifiedpolymorphicDNA)、AFLP(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)及mtDNA控制区5′端序列分析等分子标记要高。此外,SSR和mtVN-TR还可对某些低频等位基因及其携带个体做有效的筛查,这对今后进行大量扬子鳄个体的分子标记识别和群体的遗传谱系建立等工作将具有一定实际意义[动物学报51(3):501-506,2005]。
- 黄磊王义权
- 关键词：扬子鳄SSRMTDNA控制区遗传谱系濒危物种理论值
- 脊椎动物ABCA基因亚家族研究进展被引量：1
- 2006年
- ABC(ATP-binding cassette)基因家族编码膜蛋白,其成员负责多种物质的跨膜运输。基于氨基酸序列的同源性,人的48个ABC成员被分为7个亚家族:ABCA^ABCG。与其他亚家族相比,ABCA基因编码的蛋白具有独特的拓扑结构,并且其家族成员在两栖动物和哺乳动物分化之后各发生过一次大的扩展(expanding)。基因结构分析发现这两次扩展均是通过基因倍增实现的,这些倍增的产物在啮齿目和食肉目中得到保留,而在灵长目中却有一半变成假基因或被删除。ABCA成员主要负责不同组织器官脂类和胆固醇的跨膜运输,部分成员的突变与疾病相关。
- 李光王义权
- 关键词：基因倍增基因功能
- 文昌鱼特异的基因倍增被引量：9
- 2005年
- 进化生物学和发育生物学的结合产生了一门新兴学科———进化发育生物学,近年来,该领域研究取得了丰硕的成果。头索动物文昌鱼是现存生物中最近似于脊椎动物直接祖先的生物,在与脊椎动物分化后形态改变很小,其基因组未曾经历大规模的基因组倍增,在一定程度上反映了脊椎动物祖先型基因组的特征,但在漫长的独立进化历程中基因组自身还是经历了一些变化。文章介绍了几例在文昌鱼支系中独立发生的基因倍增事件(Hox;Evx;HNF 3;Calmodulin like),有力地揭示了文昌鱼虽然与脊椎动物直接祖先极其接近,但其基因组有其自身特性,不能简单地将之等同于脊椎动物直接祖先。
- 王蔚宿兵王义权
- 关键词：文昌鱼基因组基因倍增
- α-银环蛇毒素同工毒素基因的克隆和表达被引量：7
- 2005年
- α银环蛇毒素是存在于银环蛇蛇毒中的一种长链神经毒素,能与神经递质受体特异性结合,因此它不仅是神经信号传导机制研究的重要分子探针,更具有开发治疗某些神经性疾病新型药物的可能性。用SMART技术,反转录合成银环蛇毒腺cDNA,克隆并测定了α银环蛇毒素基因,得到14种mRNA序列;进而将其中一种新的α银环蛇毒素基因亚克隆到原核表达载体pQE30a和pGEX4T1中,在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达,其中带有GST融合蛋白的重组质粒αBgTX(P22A31)/pGEX4T1在BL21菌株中得到高效表达,表达量占菌总蛋白的30%,可溶形式存在的融合蛋白大于25%。
- 汪芳王义权
- 关键词：Α-银环蛇毒素基因克隆原核表达CDNA序列
- Pax基因功能及其选择性剪接的研究进展被引量：9
- 2008年
- Pax基因家族编码的蛋白是一组极为重要的转录调控因子,在胚胎发育的器官形成中扮演重要角色,其主要功能包括:调控细胞增殖、促进细胞自我更新、诱导前体细胞定向转移以及改变特异细胞系的分化方向。目前已知,Pax基因的非正常表达是多种先天性疾病的主要诱因。Pax基因的选择性剪接体通常具有一定的空间特异性,每种剪接体都有其主要作用的靶位和信号通路。文章简述了Pax基因的相关背景知识,详细介绍Pax1—Pax9调控在胚胎组织发育中的各项功能,并列举了现已确定的Pax基因在不同物种中的选择性剪接产物。
- 王秀王蔚王义权
- 关键词：基因功能胚胎发育选择性剪接
- 重组α-银环蛇毒素P22-A31的原核表达及功能分析被引量：5
- 2005年
- α-银环蛇毒素在神经科学研究以及在临床和制药上有重要作用,为获得大量的α-银环蛇毒素,我们用已构建的pGEX-BgTX(P22-A31)质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,并用谷胱甘肽Sepharose FF纯化GST-α-银环蛇毒素融合蛋白,再用凝血酶切掉融合标签谷胱苷肽转移酶(Glutathione S-transferase,GST),得到了较纯的重组α-银环蛇毒素同工毒素,得率约为1.225mg/L。用重组α-银环蛇毒素制备多克隆抗体,经ELISA和Western杂交鉴定后可知重组α-银环蛇毒素与天然α-银环蛇毒素的抗原性一致。小鼠毒性试验表明,重组α-银环蛇毒素同工毒素的半致死剂量LD50为1.598mg/kg,约为天然α-银环蛇毒素的1/5。小鼠化学法镇痛试验显示,重组α-银环蛇毒素有一定的镇痛药效,1/4LD50剂量的镇痛百分率为55.2%,1/8LD50剂量的镇痛百分率为20.5%,在外周镇痛作用中呈一定的量效关系。
- 林鲁萍汪芳章晓波王义权
- 关键词：蛇毒基因表达
