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国家杰出青年科学基金(30700807)

作品数:11 被引量:7H指数:2
相关作者:曲秀娟张凌云刘云鹏侯科佐滕月娥更多>>
相关机构:中国医科大学附属第一医院更多>>
发文基金:国家杰出青年科学基金辽宁省教育厅高校重点实验室项目辽宁省教育厅科技项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生

主题

  • 10篇细胞
  • 9篇RANKL
  • 8篇乳腺
  • 8篇迁移
  • 7篇细胞迁移
  • 6篇乳腺癌
  • 6篇受体
  • 6篇受体活化
  • 6篇肿瘤
  • 6篇腺癌
  • 6篇活化
  • 6篇活化因子
  • 6篇核因子
  • 5篇信号
  • 5篇核因子-ΚB...
  • 4篇信号通路
  • 4篇乳腺肿
  • 4篇乳腺肿瘤
  • 4篇通路
  • 4篇腺肿瘤

机构

  • 11篇中国医科大学...

作者

  • 11篇刘云鹏
  • 11篇张凌云
  • 11篇曲秀娟
  • 10篇侯科佐
  • 2篇滕月娥
  • 1篇张晔
  • 1篇刘静
  • 1篇石晶

传媒

  • 4篇山东医药
  • 3篇现代肿瘤医学
  • 3篇山西医药杂志...
  • 1篇中华肿瘤防治...

年份

  • 5篇2012
  • 5篇2011
  • 1篇2010
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
Cbl-b shRNA稳定转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系的构建
2011年
目的构建靶向Cbl-b基因的短发夹环RNA(shRNA)真核质粒表达载体,建立Cbl-b shRNA稳定转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞系,为探讨Cbl-b的生物学功能奠定基础。方法设计Cbl-b shRNA序列BLAST进行同源性分析。化学合成法合成shRNA序列,将配对的单链合成双链,以T4连接酶连接于pSilencerTM 4.1-CMV表达载体,加入感受态细胞。将菌液涂布于含有氨苄青霉素的LB平板,筛选阳性菌落,测序确认后进行大量复制、扩增,提取重组质粒。脂质体法将上述质粒转染至MDA-MB-231细胞中,G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。结果 DNA测序证实靶向Cbl-b基因的shRNA真核质粒表达载体构建正确,G418压力筛选出阳性克隆,Western blot检测发现MDA-MB-231/Cbl-b shRNA转染细胞株中Cbl-b蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了基因沉默Cbl-b的MDA-MB-231细胞株,为进一步探讨其生物学功能奠定实验基础。
张凌云石晶滕月娥张晔曲秀娟刘云鹏
关键词:CBL-B短发夹环RNAMDA-MB-231转染
c-Src在RANKL诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移中的作用被引量:1
2011年
目的探讨非受体酪氨酸激酶c-Src在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移中的作用。方法流式细胞仪检测MDA-MB-231细胞表面受体核因子-κB受体活化因子(RANK)蛋白的表达及RANKL刺激后细胞p-Src及c-Src的表达;Transwell法测定细胞迁移能力。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。应用RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Src表达升高,应用Src激酶抑制剂PP2可显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论 c-Src信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移。
张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐
关键词:C-SRC核因子-ΚB受体活化因子配体乳腺肿瘤迁移
PI3K/AKT信号通路在RANKL诱导的SGC-7901胃癌细胞迁移中的作用被引量:3
2012年
目的文献报道RANKL/RANK/OPG途径与肿瘤细胞迁移及骨转移密切相关,但RANKL/RANK途径是否参与胃癌细胞迁移,尚无文献报道。本文拟检测RANK在胃癌细胞系SGC-7901细胞中的表达,并进一步探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在RANKL诱导的胃癌细胞迁移中的作用。方法 West-ern blot检测SGC-7901细胞表面RANK蛋白的表达;RANKL刺激后磷酸化Akt(P-Akt)及Akt的表达;Transwell法测定RANKL及抑制剂刺激后细胞迁移能力的改变。结果 SGC7901细胞表达RANK蛋白。RANKL(1μg/mL)诱导SGC-7901细胞迁移能力增强,迁移增加率为57.2%±5.9%,RANKL抑制剂rOPG(5μg/mL)显著抑制RANKL诱导的细胞迁移(13.88%±3.57%,P<0.05)。RANKL刺激后30 min~3 h,SGC-7901细胞p-Akt表达升高,应用PI3K的抑制剂LY294002(50 mmol/L)显著抑制RANKL诱导的胃癌细胞SGC-7901的迁移(57.28%±5.91%vs23.18%±2.79%,P<0.05)。结论胃癌细胞系SGC-7901细胞表达受体RANK,PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的SGC-7901细胞迁移。
张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐
关键词:AKTRANKL胃肿瘤迁移
MEK/ERK信号通路在RANKL诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移中的作用及机制探讨
2012年
目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞MCF-7迁移中的作用。方法流式细胞术检测MCF-7细胞表面核因子-κB受体活化因子(RANK)蛋白的表达;Western blot检测RANKL刺激后磷酸化ERK(p-ERK)及ERK的表达;Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。结果 MCF-7细胞表面表达RANK蛋白,RANKL(2μg/mL)显著诱导MCF-7细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MCF-7细胞p-ERK表达逐渐升高,MEK抑制剂PD98059显著抑制RANKL诱导的MCF-7细胞迁移。结论 ERK信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MCF-7迁移。
张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐
关键词:细胞外信号调节蛋白激酶核因子-ΚB受体活化因子配体细胞运动
RANKL诱导乳腺癌BT-474细胞迁移机制的探讨
2012年
目的:探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞BT474迁移中的作用。方法:流式细胞术及蛋白质印迹法检测BT474细胞表面RANK蛋白的表达;蛋白质印迹法检测RANKL刺激后细胞磷酸化ERK(p-ERK)及ERK的表达;Transwell法测定RANKL刺激后BT-474细胞迁移能力的改变。结果:BT-474细胞表面表达RANK蛋白,RANKL诱导BT-474细胞迁移能力增强,应用RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移,迁移增加率分别为(73.67±7.57)%和(9.67±3.06)%,P=0.001 5。BT-474细胞的P-ERK水平在RANKL刺激30min后明显升高,应用MEK/ERK通路抑制剂PD98059可显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。RANKL迁移增加率为(72.50±6.61)%,RANKL+PD98059迁移增加率为(15.00±2.16)%,P=0.000 1。结论:ERK1/2信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌BT-474细胞迁移。
张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐
关键词:乳腺肿瘤ERK1/2RANKL细胞迁移
c-Src参与RANKL诱导的乳腺癌BT-474细胞迁移的机制研究
2011年
目的:核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)通路在肿瘤骨定向性迁移中发挥重要的作用,但具体信号传导机制尚不清楚。本文探讨非受体酪氨酸激酶c-Src在RANKL诱导的乳腺癌BT474细胞迁移中的作用。方法:Western blot检测BT-474细胞表面受体RANK蛋白的表达及RANKL刺激后细胞p-Src及c-Src的表达;Transwell法测定细胞迁移能力。采用SPSS 16.0统计学软件分析实验数据。结果:BT-474细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导BT-474细胞迁移能力增强。应用RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移。RANKL刺激后BT-474细胞p-Src表达升高,应用c-Src激酶抑制剂PP2可显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论:c-Src信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌BT-474细胞迁移。
张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐
关键词:核因子ΚB受体活化因子配体乳腺癌迁移
磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶信号通路参与核因子-κB受体活化因子配体诱导的MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移
2012年
目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞迁移中的作用。方法 Transwell法测定RANKL刺激后MDA-MB-231细胞迁移能力的改变。蛋白印迹法检测MDA-MB-231细胞表面RANK蛋白的表达及RANKL刺激后pAkt及Akt的表达;检测数据用x珚±s表示,采用SPSS 16.0软件进行t检验。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强,RANKL的圈套受体骨保护素(OPG)可阻断RANKL诱导的细胞迁移(P<0.01)。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Akt表达升高,PI3K抑制剂LY294002抑制RANKL诱导的细胞迁移(P<0.01)。结论 PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。
张凌云曲秀娟滕月娥刘云鹏侯科佐
关键词:乳腺肿瘤细胞运动核因子-ΚB受体活化因子配体
PI3K/Akt信号通路在RANKL诱导的MCF-7乳腺癌细胞迁移中的作用被引量:1
2012年
目的:核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)能促进表达RANK的上皮癌细胞迁移至骨,与乳腺癌骨转移密切相关。本文探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphoinositide3-kinase/serine/threonine protein kinase PI3K/Akt)信号通路在RANKL诱导的乳腺癌MCF-7细胞迁移中的作用。方法:流式细胞仪检测MCF-7细胞表面RANK蛋白的表达;Transwell法测定RANKL刺激后MCF-7细胞迁移能力的改变;Western-blot检测MCF-7细胞RANKL刺激后p-Akt及Akt的表达。SPSS 16.0软件分析实验数据。结果:MCF-7细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MCF-7细胞迁移能力显著增强,RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移。RANKL刺激后MCF-7细胞p-Akt表达在1、5分钟时一过性升高,PI3K抑制剂LY294002显著抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论:PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞系MCF-7迁移。
张凌云曲秀娟刘云鹏侯科佐
关键词:核因子-ΚB受体活化因子配体乳腺癌迁移
细胞外调节蛋白激酶参与RANKL诱导的SGC-7901胃癌细胞迁移
2011年
目的检测RANK在胃癌细胞系SGC-7901细胞中的表达,并进一步探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)信号通路在RANKL诱导的胃癌细胞迁移中的作用。方法流式细胞术检测SGC-7901细胞表面RANK蛋白的表达;western-blot检测RANKL刺激后磷酸化ERK(p-ERK1/2)及ERK1/2的表达;Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。检测数据用x±s表示,采用SPSS16.0软件分析实验数据。结果 SGC-7901细胞表达RANK蛋白。RANKL诱导SGC-7901细胞迁移能力增强,RANK抑制剂rOPG抑制RANKL诱导的细胞迁移,RANKL刺激后,SGC-7901细胞p-ERK1/2表达升高,应用MEK/ERK的抑制剂PD98059显著抑制RANKL诱导的胃癌细胞SGC-7901迁移。结论胃癌细胞系SGC-7901细胞表达受体RANK,ERK1/2信号通路参与RANKL诱导的SGC-7901细胞迁移。
张凌云曲秀娟侯科佐刘云鹏
关键词:胃肿瘤ERK1/2RANKL迁移
ERK信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞迁移被引量:2
2010年
目的:探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在RANKL诱导的乳腺癌细胞迁移中的作用。方法:流式细胞术检测MDA-MB-231细胞表面RANK蛋白的表达;western-blot检测RANKL刺激后磷酸化ERK(p-ERK)及ERK的表达;Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。结果:MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-ERK表达升高,PD98059抑制RANKL诱导的细胞迁移。结论:ERK信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞迁移。
张凌云刘静刘云鹏曲秀娟侯科佐
关键词:ERKRANKL乳腺癌迁移
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