国家自然科学基金(30860150)
- 作品数：5 被引量：47H指数：3
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- 甘蔗内生固氮菌L3的分离与鉴定
- 巴西学者D(o)bereiner在1958年首次在甘蔗根际分离到固氮细菌，提出禾本科植物也具有固氮能力的设想；在1975年分离到固氮螺菌（Azospirillum）并提出了联合固氮概念。研究表明固氮甘蔗品种可以从生物固氮...
- 刘昔辉杨荣仲杨丽涛方锋学张革民区惠平桂意云李杨瑞
- 关键词：甘蔗内生固氮菌固氮特性糖料作物
- 斑茅割手密复合体创制及其与甘蔗杂交F1的染色体计数和形态表现
- 斑茅(Erianthus arundinacius(Retz.)Jesws.)和割手密(Saccharum spontaneum L.)是重要的甘蔗野生种质,分别属于蔗茅属和甘蔗属,两者各有不同的优良性状和不利性状。
- 张革民刘昔辉方锋学张荣华宋焕忠方位宽游建华刘海斌
- 文献传递
- 割手密(S.spontanuem L.)SSR-PCR反应体系的优化
- 割手密(S.spontanuemL.)是甘蔗属(Saccharum)中分布最广、类型最多的野生种,从南纬10°至北纬40°均有分布,是当前甘蔗育种中抗逆性、宿根性、适应性等优良性状的主要来
- 刘昔辉张革民宋焕忠方位宽区惠平
- 关键词：割手密SSR-PCR
- 文献传递
- 割手密AFLP分子标记技术体系建立与优化被引量：2
- 2013年
- 【目的】建立和优化割手密AFLP分子标记技术体系,为割手密遗传多样性分析、遗传图谱构建提供技术支持。【方法】以广西割手密GXS87-16、GXS85-30、GXS79-9、GXS96、GXS112、GXS212为材料,利用改良SDS法提取DNA,并用EcoRⅠ和MseⅠ酶切,连接接头后,采用正交试验设计对影响预扩增反应和选择性扩增反应的主要成分如Mg2+、模板DNA、引物、dNTP、Taq聚合酶浓度进行优化。【结果】样品DNA用限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ各3U于PCR仪过夜可完全酶切。经正交设计优化,较佳的预扩增体系包含0.4μLdNTPs(20mmol/mL),1.6μLMg2+(25mmol/mL),2.0μLEcoRⅠ-P(5pmol/mL),2.0μLMseⅠ-P(5pmol/mL),1UTaq酶(1U/μL),DNA模板稀释10倍;选择性扩增体系包含0.4μLdNTPs(20mmol/mL),0.8μLMg2+(25mmol/mL),1.0μLEcoRⅠ-AAG(6pmol/mL),1.0μLMseⅠ-CAG(6pmol/mL),3UTaq酶(1U/μL),DNA模板稀释20倍。以对优化反应体系扩增获得的PCR产物用5%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染后,可获得清晰的多态性指纹图谱。【结论】建立的割手密AFLP分子标记技术体系具有扩增条带清晰、多态性丰富的特点,可为构建割手密高密度遗传图谱提供技术支持。
- 刘许辉段维兴刘新龙杨海霞高轶静罗霆宋焕忠张革民
- 关键词：割手密AFLP正交设计
- 割手密遗传作图最适分离群体的选择被引量：1
- 2013年
- 【目的】筛选适合用于构建割手密遗传连锁图谱的分离群体,为后续的遗传连锁图谱构建和基因定位及遗传育种提供理论依据。【方法】基于"双假测交"理论,利用DNA水平上遗传差异较大且蔗糖分和分蘖率差异极显著的不同割手密无性系进行杂交获得3个不同杂交组合,对3个备选作图群体的分蘖率和蔗糖分进行变异、正态分布拟合分析及分子多态性分析。【结果】组合3(GXS85-12×GXS87-16)和组合13(云割①×田林)的分蘖率呈偏态分布,而组合5(GXS85-30×GXS87-16)的分蘖率呈近似正态分布;组合3和组合5的蔗糖分呈偏态分布,而组合13的蔗糖分呈近似正态分布。在分子多态性水平上,组合5亲本的遗传相似系数略高于组合3和组合13,而其后代平均遗传相似系数略低,但变幅较高。【结论】组合5(GXS85-30×GXS87-16,群体大小为245株)的分蘖率、蔗糖分遗传性相对稳定,群体来源比较广泛,分子多态性丰富,遗传多样性高,可作为分离群体用于构建遗传图谱。
- 杨海霞李正文杨平飞高轶静岑华飞罗霆段维兴刘许辉张革民
- 关键词：割手密无性系蔗糖分分蘖率
- 斑茅割手密杂种后代真实性鉴定及遗传分析被引量：31
- 2012年
- 以斑茅GXA87-36(♀)与割手密GXS79-9(♂)杂交获得的经形态鉴别为真杂种的后代材料GXAS07-6-1(斑茅割手密杂合体)及其双亲为材料,利用体细胞染色体计数以及SSR、SRAP分子标记对杂种进行真实性鉴定,并利用SRAP分子标记对斑茅GXA87-36、割手密GXS79-9及其杂种后代遗传位点的传递进行分析。结果表明,GXA87-36体细胞染色体数为2n=60,GXS79-9体细胞染色体数为2n=64,其杂种GXAS07-6-1染色体2n=62,其杂交的染色体遗传方式为n+n;筛选出3对SSR引物和5对SRAP引物可分辨后代的真伪;利用71对SRAP引物扩增后代和双亲,检测到1095个遗传位点,多态性位点数为800;母本有279个位点,其中有79%传递给其后代;父本有439个位点,其中有73%传递给后代;用NTSYS-pc2.10e软件计算Jaccard遗传相似系数,双亲间为0.474,后代与母本、父本间分别为0.696、0.752,表明后代GXAS07-6-1偏向父本遗传。
- 刘昔辉方锋学高轶静张荣华宋焕忠杨荣仲方位宽段维兴罗霆张革民李杨瑞
- 关键词：斑茅割手密杂种鉴定SSRSRAP
- 割手密(S. spontanuem L.)SSR-PCR反应体系的优化被引量：6
- 2010年
- 以广西割手密(S. spontanuem L.)79-9为材料,利用SDS法提取基因组DNA,采用正交试验设计优化建立了一套适用于割手密的SSR-PCR反应体系,即在25μL反应体系中包含10×PCR Buffer(Mg2+free)、模板DNA30ng、Mg2+2.5mmol/L、dNTP0.24μmol/L、引物0.6μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5U.运用该体系对其它4份割手密进行了检验,扩增带型清晰,证明该体系稳定可靠.
- 刘昔辉张革民宋焕忠方位宽欧惠平
- 关键词：正交设计
- 一种快速高效提取甘蔗及其近缘属基因组DNA的方法被引量：13
- 2010年
- 利用珠磨器和不锈钢珠,以甘蔗及其近缘属割手密、斑茅和河八王为材料提取基因组DNA,并对得到的DNA进行电泳检测、含量测定和SSR分析。结果表明,该方法能高效快速提取基因组DNA,所提取DNA中蛋白质、多糖类物质等去除较彻底,DNA纯度较高,完整性好;SSR分析条带清晰,多态性较丰富,能扩增出特异性谱带。该方法无需液氮研磨,简单、快速、高效,经济成本低、PCR扩增效果好,适用于大规模的样品检测,可用于甘蔗育种遗传多样性分析、种质鉴定及指纹图谱构建等。
- 刘昔辉宋焕忠张革民张荣华方位宽区惠平陆建勋梁强唐红琴
- 关键词：甘蔗DNA提取SSR
