国家自然科学基金(81041068)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
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- 自噬与肿瘤：细胞的自我保护机制被引量：7
- 2013年
- 自噬是一个细胞自我消化的过程，是细胞自我清除受损蛋白和细胞器，降解细胞毒性物质，并为其提供能量的有效方式．是一种单纯应对各种生存压力的细胞自我保护机制。自噬与肿瘤关系非常密切，当前大多国内外文献支持自噬是既抑制肿瘤。又促进肿瘤的双刃剑。本文按肿瘤的发生、发展、治疗和预后的顺序，从细胞学角度对自噬的功能综述如下。
- 刘天助颜晓慧汪鑫宁瑜廖奕宏钟文宏黄洁棱周芳芳郭洪波
- 关键词：自噬肿瘤化学疗法放射疗法预后
- P57对U87胶质母细胞瘤细胞系增殖的抑制作用及对替莫唑胺化疗损伤的抵抗作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨替莫唑胺（TMz）短期化疗下P57在胶质母细胞瘤细胞增殖抑制中的作用和机制。方法通过Western blotting检测P57和核增殖抗原（Ki-67）在TMZ短期化疗后U87细胞中的表达情况：通过Western blotting和免疫组化染色比较原发性和复发性（经TMZ治疗）胶质母细胞瘤临床标本中P57的表达差异；通过干扰P57的表达，检测TMZ短期化疗下和撤药后U87细胞凋亡、细胞周期和细胞活力的变化。结果TMZ短期化疗后，U87细胞中P57蛋白表达量明显升高．而Ki-67表达量明显下降；胶质母细胞瘤临床标本中复发性肿瘤的P57表达量高于原发性肿瘤；干扰P57表达后周期素依赖性激酶2（Cdk2）的表达量增加，表现为TMZ对U87细胞的增殖抑制作用减弱．但细胞凋亡率明显升高f未干扰细胞凋亡率为12．83％±1．40％，干扰组细胞凋亡率为31．00％±3．48％1；此外，撤药后，与对照组相比，P57干扰组U87细胞发生明显细胞周期阻滞和细胞活力下降。结论TMZ短期化疗下，U87细胞通过上调P57表达及下调Cdk2表达抑制肿瘤细胞增殖．同时通过抑制细胞周期进程以降低化疗损伤。
- 罗海洋刘天助孟伟尹明芳汪鑫郭洪波
- 关键词：胶质母细胞瘤替莫唑胺P57
- 脑肿瘤相关长链非编码RNA的研究现状被引量：1
- 2014年
- 长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们并不编码蛋白，而是以RNA的形式在多种层面上（表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等、调控基因的表达水平。
- 刘天助廖红展汪鑫邱胜聪刘彦廷徐宁波黄洁棱宁瑜廖奕宏钟文宏郭洪波
- 关键词：长链非编码RNA脑肿瘤基因
- 一种新的肿瘤干细胞球囊研究技术——蛋清包埋技术被引量：2
- 2012年
- 目的探索一种新的能长期、高效保存并研究肿瘤于细胞球囊的技术。方法从恶性胶质瘤原代肿瘤细胞中培养出肿瘤干细胞。将第5代肿瘤干细胞球囊经蛋清石蜡两次包埋、切片后，行HE染色、免疫组织化学染色和免疫组织荧光染色，并与传统的肿瘤干细胞球囊包埋技术及球囊免疫组织荧光染色实验进行比较。结果应用蛋清石蜡两次包埋处理的球囊切片经HE染色后，球囊分布均匀、结构完整，胞核、胞浆颜色鲜艳、对比度高。球囊切片的免疫组织化学染色和免疫组织荧光染色能准确定位球囊中阳性细胞和阳性蛋白表达位点，可进行阳性细胞及蛋白的半定量分析。结论肿瘤干细胞球囊蛋清石蜡两次包埋切片技术能提高实验效率，减少实验误差，节省成本，优于传统球囊包埋技术及传统球囊免疫荧光技术。
- 刘天助颜晓慧汪鑫白义凤廖红展苑召虎吴炳义邱胜聪
- 关键词：肿瘤干细胞球囊
- 一种功能性分离和纯化胶质瘤干细胞的方法
- 2014年
- 目的 探索一种简单、高效、稳定、可靠、经济的胶质瘤干细胞分离和纯化方法. 方法 取对数生长期U87细胞,应用无血清干细胞培养基,置含1％O2的缺氧培养箱中培养,10d后传代培养并离心收集第一代肿瘤球（G1）,连续传代培养获得第5代肿瘤球（G5）.免疫组化染色检测G5肿瘤球中巢蛋白（nestin）、CD133和缺氧诱导因子2α （HIF2α）的表达;Western blotting检测G1～G5肿瘤球中HIF2α蛋白的表达;免疫细胞化学染色检测G5分化细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、O1及βⅢ微管蛋白（βⅢ-Tublin）的表达.6只裸鼠按随机数字表法均分为实验组和对照组（每组3只）,于左侧背部皮下分别注射105个/5 μL G5、U87细胞,25 d后处死裸鼠,取出肿瘤,免疫组织化学染色检测肿瘤中nestin的表达. 结果 G5肿瘤球中nestin、CD133、HIF2α阳性细胞率分别为91％±5％、95％±4％和98％±2％; Western blotting检测显示G1～G5肿瘤球中HIF2α蛋白的表达逐渐增加;G5细胞能分化为表达βⅢ-Tublin、GFAP、O1的子细胞;6只裸鼠均长出肿瘤,实验组的肿瘤体积较大,且肿瘤组织nestin阳性细胞率（47％±11％）明显高于对照组（5％±2％）. 结论 使用功能性分离和纯化方法获得的G5肿瘤球细胞,表达胶质瘤干细胞的特异性标记物、具有三系分化能力和较强的体内成瘤能力,符合胶质瘤干细胞的特征.
- 刘天助宁瑜廖红展汪鑫邱胜聪刘彦廷徐宁波钟文宏廖奕宏黄洁棱郭洪波
- 关键词：胶质瘤干细胞缺氧纯化
- 人脑胶质瘤多药耐药细胞株的构建及生物学特性鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的体外构建胶质瘤耐甲磺酸伊玛替尼多药耐药细胞株，并研究其生物学特性。方法采用逐渐增加培养基中伊玛替尼药物浓度的方法诱导构建耐甲磺酸伊玛替尼的人脑胶质瘤U251细胞株（命名为U251AR）；CCK8法检测U25IAR、U251对多种化疗药物的IC50和耐药指数；QRT-PCR法检测耐药相关基因ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA的表达，流式细胞术检测ABCG2蛋白的表达。结果体外培养12个月后建立了稳定耐药的细胞株U251AR，与亲代细胞相比异形性不显著。U251和U251AR对化疗药物的IC50相比较差异均有统计学意义（P〈0．05），U251AR对甲磺酸伊玛替尼、阿霉素、顺铂的耐药指数分别为20．41、5．06、10．28，表现出多药耐药特征。QRT-PCR检测结果显示耐药细胞株U251AR中ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA的表达明显高于亲代U251细胞，流式细胞术检测结果显示U251AR中ABCG2蛋白的表达强于亲代U251细胞，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论成功建立多药耐药的胶质瘤细胞株U251AR，其多药耐药与ABCCl、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA及ABCG2蛋白的表达上调相关。
- 白义凤廖红展刘天助郭洪波
- 关键词：神经胶质瘤多药耐药性细胞株
