江苏省海洋生物技术重点建设实验室基金(2007HS016)
- 作品数：10 被引量：51H指数：5
- 相关作者：王洪斌阎斌伦李士虎焦豫良许冰更多>>
- 相关机构：淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室连云港荣盛生物科技有限公司更多>>
- 发文基金：江苏省海洋生物技术重点建设实验室基金国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 条斑紫菜丝状体黄斑病病原体分离鉴定及生物学特性研究被引量：13
- 2011年
- 从连云港地区紫菜育苗场采集患黄斑病的紫菜贝壳丝状体样品,利用2216E培养基进行筛选得到两株优势海洋性细菌,命名为HYWX-1与HYWX-2。对该两株菌进行生物学特性及生理生化鉴定,结果显示:两株菌均属革兰氏阴性杆状细菌;两株菌的生长最适生长温度28℃;最适生长pH为7.5至8.2间;两株菌接触酶、氧化酶试验均阳性。进一步对其进行分子生物学鉴定,PCR扩增其16S rRNA,测序,并与GenBank上已知序列进行比对,根据16S rRNA同源性和系统进化树分析,鉴定该两株菌为同一种菌,均为河豚毒素交替假单胞菌(Pseudoalteromonas tetraodonis)。回复感染的结果表明:两株菌均能引起条斑紫菜丝状体黄斑病病害症状。
- 王洪斌李信书夏亚明阎斌伦
- 关键词：交替假单胞菌菌株筛选菌株鉴定
- 6种微藻生长及脂肪累积对氮含量变化的响应被引量：8
- 2012年
- 研究了绿色巴夫藻、米氏凯伦藻、球等鞭金藻、三角褐指藻、海水小球藻、衣藻的生长及脂肪累积对氮含量变化的响应。试验结果表明,6种微藻生长及总脂对不同氮含量均有一定程度的响应。微藻生长,绿色巴夫藻、米氏凯伦藻、球等鞭金藻3种微藻响应明显,绿色巴夫藻以氮含量100%组生长最快,第10d时,比氮含量40%组快512%,比氮含量20%组及60%组分别快62%、61%;米氏凯伦藻氮含量80%组生长最快,第10d达到最高值,超出其他试验组约60%;球等鞭金藻氮含量80%组最快,第10d生长量超过100%试验组67%;三角褐指藻、海水小球藻、衣藻响应程度小于其他微藻。总脂积累,三角褐指藻氮含量80%组总脂含量最高,达细胞干质量的80.77%,是氮含量100%组2.5倍;绿色巴夫藻氮含量60%组最高,达细胞干质量的73.68%,是氮含量100%组3.4倍;其他4种微藻在降低氮含量后,总脂均超过细胞干质量的30%。三角褐指藻在生物柴油制备方向极具开发前景。
- 王洪斌成明盛菊杨艳艳李士虎阎斌伦
- 关键词：微藻氮含量
- 红酵母多糖的提取、化学组成及抗氧化性的鉴定被引量：4
- 2009年
- 为研究红酵母细胞中多糖的化学组成及抗氧化性和对增强哺乳动物、水产鱼类的免疫活性的影响。以红酵母菌为材料,通过化学抽提法得到多糖,经蒽酮比色法测得其中葡萄糖为0.012%,蔗糖为0.013%;经凯氏定氮法分析,蛋白质为3.2%,该多糖为蛋白多糖;经氨基酸分析表明含有多种氨基酸,其中天冬氨酸含量最多;由邻苯三酚自氧化法检测发现该多糖能够抑制邻苯三酚自氧化,具有抗氧化能力。
- 王洪斌朱强阎斌伦王洁
- 关键词：酵母多糖
- 鳗弧菌感染对日本蟳部分免疫活性因子的影响被引量：2
- 2012年
- 对日本蟳(Charybdis japonica)进行鳗弧菌(Vibrio anguillarum)悬液和生理盐水(对照)注射感染,研究其血清免疫因子超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化,并对试验结果进行统计学分析。结果表明,注射鳗弧菌悬液组SOD活性12、24、48h均高于对照组,48h达到最高;CAT活性12、24h增加非常明显,12h达最高;AKP活性5、12、24h都有增加,均高于对照,24h最高;ACP活性12h开始上升,24h达最高。在人工感染鳗弧菌48h内,日本蟳体内的免疫因子发生了明显的变化,血清中SOD、ACP、AKP、CAT活性在不同时间段均有显著升高趋势,高于对照组水平。
- 王洪斌成明吴琴李士虎阎斌伦
- 关键词：日本蟳鳗弧菌免疫活性
- 松果提取物的体外抗腺病毒活性研究被引量：6
- 2011年
- 用95%的乙醇沸腾回流提取,制备松果提取物。MTT法确定提取物对细胞的最大无毒浓度;用梯度滴定法观察腺病毒所携带的绿色荧光蛋白基因的蛋白表达量确定病毒液的效价(TCID50);参照所得数据,设计3个松果提取物潜在的抗腺病毒靶位,分别探究松果提取物对腺病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的抑制作用和对病毒生物合成的抑制作用。结果表明,试验所用腺病毒原液感染HEK293细胞的效价为106.1 TCID50/mL;乙醇溶剂和松果提取物均对腺病毒具有直接灭活作用,但提取物可以加强这种灭活作用;两者对于腺病毒的吸附并不起什么作用;松果提取物能够抑制腺病毒的生物合成作用,而且该抑制效果较乙醇更为显著。
- 王洪斌董丹许冰周向红阎斌伦
- 关键词：抗病毒作用腺病毒MTTTCID50
- 鳗弧菌溶血毒素基因vah4的克隆及表达被引量：2
- 2009年
- 目的:对鳗弧菌溶血毒素基因vah4进行克隆与原核表达,为进一步深入研究其免疫原性及VAH4的功能奠定基础。方法:PCR扩增vah4,将扩增的产物连接于测序载体pMD18—T上,经测序反应确定无误后,再将PCR产物与原核表达载体pET-32a构建表达VAH4的重组质粒(pET-32a-VAH4),经PCR鉴定后,再转入表达宿主大肠杆菌BL21菌株内,对转化菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测。结果:含重组质粒的菌株有表达蛋白,其表达的蛋白质相对分子质量为40kDa,并经Western blot鉴定结果证实该条带即VAH4-His融合蛋白。结论:vah4基因成功克隆至pET-32a质粒内并成功表达,为进一步研究其免疫原性、VAH4的毒性作用效果及作用机制奠定基础。
- 阎斌伦许冰董丹王洪斌
- 关键词：鳗弧菌克隆原核表达
- 副溶血弧菌感染日本蟳后对几种免疫活性酶的影响被引量：2
- 2010年
- 用副溶血弧菌悬液和生理盐水(对照)注射感染日本蟳,研究其血清超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化,并进行统计学分析。试验结果表明,注射副溶血性弧菌悬液组12、24、48 h后SOD活性均高于对照组,48 h达到最高;122、4 h CAT活性增加明显,24 h达最高;AKP活性5、12、24 h均有增加,高于对照组,24 h最高;ACP活性12 h开始上升,24 h达最高。在人工感染副溶血性弧菌48 h内,日本蟳体内的免疫因子发生明显的变化,血清中SOD、ACP、AKP、CAT活性在不同时间段均有显著升高趋势,高于对照组。
- 王洪斌李士虎许冰周向红阎斌伦焦豫良
- 关键词：日本蟳超氧化物歧化酶酸性磷酸酶碱性磷酸酶过氧化氢酶
- γ-聚谷氨酸明胶膜对重金属离子吸附特性研究被引量：5
- 2011年
- 利用蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)液体发酵制备γ-聚谷氨酸(Poly-γ-glutamic acid,γ-PGA),提取并制得γ-PGA溶液;以0.5 g/L的γ-PGA溶液与明胶交联制成明胶膜,未交联γ-PGA的明胶膜作空白对照,用原子吸收分光光度法检测金属离子消耗,研究γ-PGA明胶膜对Cu2+、Co2+的吸附特性。实验结果表明,Cu2+在pH为8、24℃、5 h时有最佳吸附量,饱和吸附量为12.34μg/mL;Co2+在pH 7、21℃、5 h时有最佳吸附量,饱和吸附量为19.50μg/mL;证实了γ-PGA与明胶交联制成的明胶膜具有吸附重金属(Cu2+、Co2+)的能力。
- 王洪斌成明盛菊杨艳艳李士虎阎斌伦
- 关键词：Γ-PGA
- 金属离子对蜡状芽孢杆菌合成多聚γ-谷氨酸的影响被引量：2
- 2011年
- 研究金属离子对蜡状芽孢杆菌合成多聚γ-谷氨酸(γ-PGA)的影响。通过在培养基中加入定量的Mn2+、K+、Fe3+、Mg2+、Ca2+、Mo6+、Zn2+、Co2+、Cd2+、Cu2+,定时取发酵液用原子吸收分光光度法测定蜡状芽孢杆菌合成γ-PGA过程中金属离子的消耗情况、菌体生物量及γ-PGA产量;在发酵培养基中,分别加入不同质量浓度的Mn2+、Ca2+、Zn2+、Co2+、Mo6+,通过组合不同金属离子以及控制各组合中离子质量浓度测定菌体生物量和γ-PGA含量的变化,结合金属离子的消耗量探讨金属离子对蜡状芽孢杆菌合成γ-PGA的影响。结果表明:在蜡状芽孢杆菌合成γ-PGA的过程中均消耗一定量的Mn2+、K+、Fe3+、Mg2+、Ca2+、Mo6+、Zn2+、Co2+,其中Mn2+、K+、Fe3+、Mg2+、Ca2+在生长代谢过程中利用较多,而Cd2+、Cu2+的质量浓度不变化;Mn2+是γ-PGA合成的必需元素,在其质量浓度为0.08g/L时,γ-PGA合成达最高峰(1.25g/L)。当Mn2+质量浓度为0.08g/L时,适当增加Ca2+质量浓度就能较大幅度提高γ-PGA合成量;同时固定Mn2+、Ca2+质量浓度,适量加入不同质量浓度的Zn2+、使γ-PGA的合成量增加明显,最高可达2.94g/L,而Mo6+对γ-PGA的合成影响不明显,但对菌体生物量的影响较大。
- 王洪斌徐择文李士虎阎斌伦焦豫良
- 关键词：蜡状芽孢杆菌金属离子
- 海洋红酵母多糖提取及其对日本蟳血清中部分免疫活性因子的影响被引量：9
- 2011年
- 以海洋红酵母为材料,通过化学抽提法得到多糖,用经典的Sevag法进行脱蛋白处理,经多级沉淀得到纯糖并采用硫酸-蒽酮法测得其中葡萄糖含量;考马斯亮蓝法分析蛋白质含量。以定量海洋红酵母多糖人工注射日本蟳,注射等量生理盐水为对照,定时测定其血清中部分免疫活性因子的活性;实验表明:提取多糖为蛋白多糖,其中葡萄糖含量为3.6%,蛋白质含量1.9%,含有多种氨基酸,其中天冬氨酸含量最多;注射后12 h日本蟳血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力达到最高,酸性磷酸酶(ACP)活力在注射后24 h达到最高,碱性磷酸酶(AKP)48 h达到最高,过氧化氢酶(CAT)48 h达到最高,溶菌酶(LZM)12 h即达到最高,最高点分别高于对照组24%、43%、25%、35%、95%;72 h后都恢复至对照组水平。结论:海洋红酵母多糖注射48 h内日本蟳体内免疫活性因子均有不同程度的提高,对日本蟳有较强免疫刺激作用。
- 王洪斌李士虎阎斌伦焦豫良王艳敏
- 关键词：红酵母日本蟳多糖提取免疫活性
