国家自然科学基金(81170120)
- 作品数：5 被引量：53H指数：2
- 相关作者：杨敏杜杰王绿娅苗艳菊郑娇更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所山西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技新星计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 巨噬细胞对血管紧张素Ⅱ作用下三维共培养体系中心脏成纤维细胞转分化的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensionⅡ,AngⅡ)作用下,细胞三维共培养体系中巨噬细胞对心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)表型转化的影响。为观察细胞之间的相互作用,探讨高血压导致心脏纤维化的分子机制及防治策略提供了新思路。方法:分离、培养原代小鼠骨髓巨噬细胞及乳鼠CFs,建立巨噬细胞和CFs多肽纳米凝胶三维共培养体系。实验分为CFs组,巨噬细胞与CFs共培养组,CFs+AngⅡ处理组,巨噬细胞与CFs共培养+AngⅡ处理组。通过免疫荧光染色鉴定培养的巨噬细胞(巨噬细胞标志物F4/80)及成纤维细胞(波形蛋白Vimentin);采用倒置相差显微镜观察三维培养细胞形态;免疫荧光染色检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时定量PCR检测α-SMA、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)及促纤维化因子[转化生长因子β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)]的表达。结果:在无AngⅡ作用下,巨噬细胞与CFs共培养组与单独培养的CFs组比较,α-SMA mRNA和蛋白表达,并且CollagenⅠ、TGF-β和CTGF mRNA的水平差异无统计学意义。巨噬细胞与CFs共培养组经AngⅡ处理后,可明显诱导α-SMA mRNA和蛋白高表达,并且上调CollagenⅠ、TGF-β和CTGF mRNA的水平。结论:在AngⅡ作用下,三维培养体系中巨噬细胞可促进CFs向肌成纤维细胞表型转化,提示巨噬细胞在AngⅡ导致心脏纤维化的病理过程中发挥关键作用。
- 杨敏苗艳菊王绿娅杜杰
- 关键词：心脏成纤维细胞表型巨噬细胞
- Akt1在高血压心肌纤维化中的作用及其机制被引量：37
- 2013年
- 目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;处死并取其心脏进行组织切片,行Masson染色观察胶原沉积;流式细胞学方法检测心脏中巨噬细胞浸润;免疫组织化学染色检测炎症细胞因子[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]和促纤维化因子[转化生长因子β(TGF-β)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达;实时定量PCR检测Akt1及α-SMAmRNA水平;Westernblot检测α-SMA蛋白表达以及Akt1蛋白表达和激活。体外分离原代骨髓巨噬细胞进行Akt1siRNA及ControlsiRNA干扰后与乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)共培养,观察促纤维化因子mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,高血压组在AngⅡ灌注7d时血压升高[(147.1±1.0)比(104.6±2.1)mmHg,P<0.01],射血分数和短轴缩短率均升高(P<0.05);胶原沉积明显增加[(2.06±0.18)%比(0.35±0.04)%,P<0.01];心脏组织中巨噬细胞浸润增加[(1.75±0.15)%比(0.44±0.07)%,P<0.01],促炎因子(iNOS、IL-1β、TNF-α)及促纤维化因子(TGF-β、α-SMA)表达升高(均P<0.01)。高血压组Akt1及α-SMAmRNA表达上调(P<0.01),Akt1磷酸化水平上调(P<0.01),同时α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.05)。体外实验,与单独CFs组相比,CFs与转染ControlsiRNA巨噬细胞共培养组促纤维化因子(α-SMA、TGF-β、Ⅰ型胶原)mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.01),而CFs与转染Akt1siRNA巨噬细胞共培养组上述促纤维化因子mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达下降(P<0.05)。结论在高血压心脏纤维化疾病早期,心脏组织Akt1活性增加,可能通过促进炎症反应,介导巨噬细胞作用下的成纤维细胞�
- 苗艳菊杨敏郑娇王绿娅杜杰
- 关键词：高血压心肌纤维化炎症反应AKT1
- 亚临床甲状腺功能减退对老年高血压患者动态血压的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨亚临床甲状腺功能减退(亚甲减)与老年高血压患者动态血压的关系。方法 233例老年高血压患者分为高血压合并亚甲减组35例(A组)及单纯高血压组198例(B组)。计算体质量指数,常规测定2组患者收缩期及舒张期血压、身高、体质量、空腹血糖、血肌酐、血尿酸、血脂水平、甲状腺功能及24h动态血压并分析相关指标。结果 A组舒张压、24h平均舒张压均高于B组(P<0.01,P<0.05);Logistic多元回归分析结果显示,随年龄增加舒张压水平呈下降趋势,随血清促甲状腺激素水平增高、吸烟史延长,舒张压水平呈上升趋势。结论舒张压控制不良的老年高血压患者应行甲状腺功能检查,有助于高血压病因的诊断。
- 任京媛余振球张艳艳王文化杨敏王绿娅
- 关键词：高血压亚临床甲状腺功能减退24H动态血压血清促甲状腺激素老年
- 中性粒细胞表面抗原Ly6G中和抗体对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨中性粒细胞表面抗原Ly6G中和抗体对小鼠急性心肌梗死模型心脏炎症反应的影响及心肌损伤的保护作用。方法冠状动脉左前降支结扎建立小鼠心肌梗死模型,实验分为假手术组、心肌梗死手术+IgG同型抗体组及心肌梗死手术+抗Ly6G中和抗体组。分别采用流式细胞术检测小鼠外周血Ly6G的表达;TTC染色观察心肌梗死面积;HE染色及流式细胞术检测心脏组织炎症细胞浸润;免疫组化法观察心脏组织炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的表达;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡。结果腹腔注射抗Ly6G中和抗体,心肌梗死术后3 d,外周血Ly6G表达明显抑制,证实抗Ly6G中和抗体阻断成功。与IgG同型抗体组相比,注射抗Ly6G中和抗体可明显减少心肌梗死面积(17.89%±4.19%比53.61%±3.43%,P<0.01),抑制梗死区炎症细胞浸润,显著降低促炎因子(TNF-α和IL-1β)的表达(TNF-α:1.67%±0.26%比6.63%±0.51%,P<0.01;IL-1β:0.83%±0.17%比4.39%±0.46%,P<0.01)。TUNEL染色显示,注射抗Ly6G中和抗体组与IgG同型抗体组比较,梗死周边区心肌细胞凋亡明显减少(25.62%±4.11%比74.91%±5.67%,P<0.01)。结论抗Ly6G中和抗体阻断Ly6G,可通过抑制心肌梗死术后心脏炎症反应,减少心肌细胞凋亡,从而对急性心肌梗死小鼠发挥明显的心肌保护作用。
- 杨敏张俊蒙王绿娅杜杰
- 关键词：心肌梗死中性粒细胞炎症小鼠
- 小鼠心肌梗死后补体系统激活与炎症反应的相关性研究被引量：12
- 2014年
- 目的:探讨心肌梗死后补体系统激活的作用。方法:采用结扎冠状动脉左前降支的方法,复制心肌梗死小鼠模型,分为心肌梗死组(MI,n=25)与假手术组(Sham,n=12),术后7d超声心动图检测心功能;心肌组织HE染色观察炎症细胞浸润、Masson染色和天狼猩红染色观察胶原沉积与纤维化程度;Real-time PCR定量检测心肌组织中C3a与C5a的mRNA表达水平,并对C3a、C5a mRNA表达量与射血分数(EF)之间作相关性分析。结果:术后7d,MI组小鼠的生存率为68.0%,明显低于Sham组(P<0.05);MI组的LVAWs、EF、FS均明显降低(P<0.05);HE染色可见MI组有大量炎性细胞浸润,Masson染色与天狼猩红染色发现胶原纤维沉积、纤维化面积增加(P<0.01);C3a与C5a的mRNA表达量增加,且这两项指标均与EF之间呈负相关。结论:心肌梗死后补体系统被激活,补体系统的活化程度与射血分数的降低有关,提示补体系统可能通过调控心肌组织的炎症反应和纤维化过程,成为加重心脏病理损伤的重要因素。
- 贺忠梅张红霞杨敏刘婷婷杜杰
- 关键词：心肌梗死补体系统炎症心肌纤维化
