贵州省卫生厅科学技术基金(gzwkj2008-1-037)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：刘坤祥岳昌武吕玉红凌锌莫宁萍更多>>
- 相关机构：遵义医学院更多>>
- 发文基金：贵州省卫生厅科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 粪便基因组DNA提取方法比较及在沙门菌定量PCR检测中的应用被引量：3
- 2009年
- 目的建立并优化1种可用于临床微生物检测的粪便微生物基因组DNA提取方法并应用于沙门菌定量PCR快速检测。方法分别利用土壤微生物基因组DNA提取试剂盒法、微生物基因组DNA提取试剂盒法和本实验室改进酚/氯仿抽提法提取腹泻患者粪便基因组DNA,根据沙门氏菌16srDNA、dT等基因或DNA功能区序列设计PCR引物,进行多基因定量PCR检测。结果3种方法提取的基因组DNA均可进行有效的定量PCR扩增,采用所建立的多重PCR方法可特异鉴别粪便沙门氏菌。结论本研究改进的粪便基因组DNA提取方法及临床微生物的定量PCR检测可在较短的时间内实现对大量临床样品快速诊断,有一定应用前景。
- 岳昌武吕玉红刘坤祥陈公安
- 关键词：基因组DNA提取粪便定量PCR沙门菌
- 都柏林沙门氏菌metk基因克隆及原核表达被引量：2
- 2009年
- 目的获取都柏林沙门氏菌metk基因编码s-腺苷甲硫氨酸合成酶His-tag融合蛋白,为基因工程生产s-腺苷甲硫氨酸创造条件。方法利用都柏林沙门氏菌metk基因特异引物,以都柏林沙门氏菌临床分离株的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到该基因编码区,并构建原核表达重组质粒载体pET30a-metk,经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达,Ni2+-NTA柱纯化重组蛋白。结果经IPTG24℃诱导6h后,12%SDS-PAGE电泳检测表明诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,重组蛋白分子量约为58.8kDa。结论成功构建His-METK融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化、复性,为进一步利用该蛋白奠定了基础。
- 岳昌武吕玉红谢兰凌锌莫宁萍刘坤祥
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸合成酶原核表达
- 一株产糖纤维素分解青霉的分离及发酵条件优化
- 2009年
- 从云贵高原地区次生林朽木中分离得到1株具有较高纤维素分解活性的青霉,PCR扩增18srDNA结果显示该菌属青霉。2%纤维素羧甲基纤维素钠、滤纸、脱脂棉、玉米叶等底物发酵结果表明该酶系具有较强的分解纤维素能力,不同温度下培养,粗酶活变化较大,以29℃最佳。
- 岳昌武吕玉红莫宁萍刘坤祥凌锌
- 关键词：菌种鉴定
- 医学院及其附院空气细菌时空分布及空气质量评价被引量：1
- 2009年
- 目的了解医学院及附属医院学生主要活动场所空气细菌的时空分布及空气质量,为学校环境卫生学评价提供依据。方法采用平板沉降法与初夏晴天对遵义医学院校园及附属医院空气中的细菌、霉菌和嗜血链球菌数进行检测。结果除校外马路露天餐饮点外,校园不同环境空气中平均细菌数都达到国家非污染空气的标准。附属医院门诊部和住院部大厅、研究生男生宿舍、图书馆机房和学生餐厅则属于普通空气;校外马路露天餐饮点属于重污染空气。学生宿舍、二餐厅霉菌数稍高于其他环境,以浴室的空气中霉菌数最多。各测试点的嗜血链球菌数均低于相关标准。结论校园空气细菌的时空分布与人员活动密切相关,人员密集地及呼吸带轻度污染,校外马路露天餐饮点属于重污染空气,应加强管理。校园空气总体处于较清洁水平。
- 岳昌武凌锌刘坤祥莫宁萍
- 关键词：环境卫生
