广东省自然科学基金(9151008002000010)
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张培华梁杰李小川邹雅琴李瑾更多>>
- 相关机构：广东医学院广东医学院附属医院广东药学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-32在病理性瘢痕基因治疗中的研究进展
- 2012年
- 白细胞介素(IL)32是新近发现的炎性细胞因子,能诱生细胞因子的产生,且在调节细胞增殖与凋亡过程中有重要作用。瘢痕组织中成纤维细胞IL-32基因的蛋白表达水平明显低下,提示在瘢痕成纤维细胞中存在IL-32基因的缺失。随着基因治疗技术的日益成熟,以IL-32为目的基因导入到瘢痕成纤维细胞中来调控过度增生的成纤维细胞及减少胶原等大量细胞外基质的过度产生和沉积。现就IL-32的生物学特性及在病理性瘢痕中的作用及应用前景等进行综述,以期为以后的实验及临床作铺垫。
- 李小川张培华
- 关键词：白细胞介素32病理性瘢痕成纤维细胞基因治疗
- 三氧化二砷对瘢痕成纤维细胞增殖与胶原合成的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究三氧化二砷对瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法和吸光度检测法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定三氧化二砷对成纤维细胞增殖和培养基中的胶原含量以及I、III型前胶原mRNA表达的影响。结果三氧化二砷对成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,还能显著降低培养基中可溶性胶原的含量(P<0.01)。上述抑制作用呈现药物浓度和作用时间依赖性。采用RT-PCR法对I、III型前胶原的mRNA检测显示随着药物浓度增高前两者的表达量降低。结论氧化二砷对瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原合成具有显著的抑制作用。
- 李平张培华何红罗少军汤少明梁杰
- 关键词：三氧化二砷瘢痕成纤维细胞增殖胶原合成
- 成纤维细胞Ⅰ型胶原基因shRNA载体的构建及干扰效果
- 2014年
- 目的构建有效针对人成纤维细胞Ⅰ型胶原基因的shRNA干扰载体,检测RNA干扰后对病理性瘢痕成纤维细胞胶原合成的影响。方法设计合成4对针对人Ⅰ型胶原基因的shRNA靶序列（shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4）,将合成的shRNA片段通过重组技术克隆到真核表达载体pm U6,经酶切与测序验证表明成功构建针对人Ⅰ型胶原基因的shRNA干扰载体（Col-shRNA1、Col-shRNA2、Col-shRNA3、Col-shRNA4）,并将该干扰载体与空载体分别通过脂质体转染人的病理性瘢痕成纤维细胞（依次为Col-shRNA1组、Col-shRNA2组、Col-shRNA3组、Col-shRNA4组、空载体转染组）,另选未处理的成纤维细胞作为空白对照组,采用RT-PCR与羟脯氨酸含量测定试剂盒检测该干扰载体的干扰效应。结果酶切与测序结果表明成功构建了针对人Ⅰ型胶原基因的shRNA干扰载体。Ⅰ型胶原基因mRNA的相对表达水平在空白对照组与空载体转染组之间差异无统计学意义（P〉0.05）;而干扰组Col-shRNA（1-4）与空载体转染组之间比较,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。空白对照组与空载体转染组的羟脯氨酸含量及胶原合成差异无统计学意义,干扰组（Col-shRNA1、ColshRNA2、Col-shRNA3、Col-shRNA4）的羟脯氨酸含量和胶原合成与空载体转染组比较,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论成功构建了4组有效针对人Ⅰ型胶原基因的shRNA干扰载体,它们均能明显抑制病理性瘢痕成纤维细胞Ⅰ型胶原基因的表达与减少细胞胶原的合成,其中Col-shRNA1对成纤维细胞Ⅰ型胶原基因表达的干扰效果最强。
- 张培华刘茂胜曾国芳李瑾段剑峰刘宏伟
- 关键词：病理性瘢痕成纤维细胞短发夹RNA基因沉默
- IL-32在病理性瘢痕中的表达及其生物学作用研究
- 2012年
- 目的:探讨IL-32在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成过程中所起的生物学作用。方法:收集2009年10月至2011年6月广东医学院附属医院整形外科手术切除的瘢痕疙瘩组织12例,增生性瘢痕组织12例,正常皮肤24例,分别应用免疫组织化学技术、RT-PCR和Western Blot检测IL-32在它们中的表达情况。结果:IL-32在正常皮肤增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中均有表达,在正常皮肤中表达较强,在增生性瘢痕及瘢痕疙瘩组织中表达较弱;IL-32mRNA和IL-32蛋白在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达较正常皮肤明显降低(P均<0.05),而增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-32在病理性瘢痕组织的形成过程中起着一定的重要作用,有进一步研究的价值。
- 李小川张培华李瑾邹雅琴梁杰
- 关键词：增生性瘢痕瘢痕疙瘩
- 重组腺相关病毒介导的IL-32基因抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的机制研究
- 2012年
- 目的:探讨重组腺相关病毒介导的IL-32基因抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblasts,KFs)增殖的机制。方法:用重组腺相关病毒介导的IL-32(rAAV2IL-32)及腺相关病毒空载体感染人KFs,通过荧光显微镜观察rAAV2IL-32的感染效率,RT-PCR法检测IL-32的转录水平;用MTT法检测KFs增殖的情况;用蛋白质印迹方法检测Bcl-2、BAX、TGF-β1的表达。结果:rAAV2IL-32及腺相关病毒空载体感染KFs 48h后,RT-PCR检测显示rAAV2IL-32组出现高表达电泳条带,而腺相关病毒空载体组则未出现电泳条带;MTT法检测显示r AAV2I L-32组明显抑制了KFs的增殖;蛋白质印迹结果显示rAAV2IL-32组KFs中Bcl-2、TGF-β1表达降低,BAX表达增高。结论:rAAV2IL-32可能是通过减少KFs中Bcl-2和TGF-β1的表达以及增加BAX的表达来抑制瘢痕疙瘩的增殖。
- 张培华李小川李瑾邹雅琴梁杰
- 关键词：白细胞介素32瘢痕疙瘩
