国家自然科学基金(60471035)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学武警总医院更多>>
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- 顺铂诱导人宫颈癌细胞系P27表达及其超微弱发光测定的意义
- 2009年
- 目的:探讨化疗药物对肿瘤增殖活性的影响。方法:选择人宫颈癌细胞系Hela分为两组,分别采用MTT比色法分析测定顺铂处理Hela细胞的浓度;免疫组化SP法分别检测Hela细胞中P27蛋白表达;流式细胞仪分析加药前后细胞周期变化及凋亡情况;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测细胞的超弱发光强度。结果:顺铂处理Hela细胞48 h的IC50值为3 mg/L,当DDP浓度在3 mg/L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系(P<0.001);流式细胞仪分析细胞周期可见与Hela细胞相比较,Hela+DDP细胞的G2期细胞数增多,而G1、S期的细胞数明显减少(P<0.01);从细胞凋亡检测显示Hela与Hela+DDP相比,细胞凋亡率在不同时间点明显升高,在24 h、48 h、72 h结果分别为(11.4±5.8、21.8±7.9、32.5±11.6)%。免疫组化结果显示Hela+DDP与Hela细胞相比细胞膜上P27蛋白高表达;在10-4mol/L鲁米诺及0.3%的双氧水(H_2O_2)条件下Hela细胞超弱发光强度高于用Hela+DDP细胞(P<0.001)。结论:超弱发光能够快速、准确、有效地反映肿瘤细胞氧化代谢特点和增殖活动,也可用于筛选敏感的化疗药物。
- 杨海宁惠延平辛晓燕黄艳红王波
- 关键词：宫颈肿瘤超微弱发光凋亡P27表达抗肿瘤药
- 人肝癌HepG2细胞超微弱发光的观察被引量：8
- 2006年
- 目的:探讨人肝癌HepG2细胞系超微弱发光的特征。方法:用IFFM-D型流动式化学发光仪检测人肝细胞株QZG及人肝癌HepG2细胞系超微弱发光的强度以及不同浓度鲁米诺(Lum inol)和双氧水(H2O2)对其超微弱发光的影响。结果:在10-4mol/L鲁米诺及0.3%双氧水条件下,人肝癌HepG2细胞超微弱发光强度明显高于人肝细胞株QZG(P<0.05),并随细胞浓度增高其超微弱发光强度呈线性增高,其差异显著(P<0.05);提高鲁米诺浓度为10-3mol/L时,人肝癌HepG2细胞发光强度明显增加(P<0.05);提高双氧水浓度为3%时,其超微弱发光强度的变化无显著差异(P>0.05)。结论:人肝癌HepG2细胞的超微弱发光强度明显高于人肝细胞株QZG,细胞浓度及鲁米诺、双氧水浓度变化能影响细胞超微弱发光强度。超微弱发光反映了肿瘤细胞的功能状态,检测肿瘤细胞超微弱发光强度可作为一项敏感的肿瘤细胞生理及代谢指标。
- 马世荣惠延平郭双平程虹
- 关键词：超微弱发光
- 顺铂对人宫颈癌Hela细胞超弱发光影响的观察被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨人宫颈癌Hela细胞株经顺铂(DDP)作用后其超弱发光与细胞增殖活性变化的关系.方法:选择DDP诱导人宫颈癌Hela细胞株,比较人宫颈癌Hela,Hela+DDP细胞株形态变化.MTT比色法、流式细胞仪检测细胞生长周期变化及凋亡情况;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测Hela,Hela+DDP细胞的超弱发光强度变化.结果:DDP对Hela细胞有生长抑制作用,并呈时间和浓度依赖性,其48 h的IC50值为3 mg/L,当DDP浓度在3 mg/L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系(P<0.01).流式细胞仪结果表明,与Hela细胞相比较,Hela+DDP细胞G2期细胞数增多,而G1,S期的细胞数明显减少(P<0.01);细胞凋亡率在24,48,72 h分别为(11.4±5.8)%,(21.8±7.9)%,32.5±11.6)%.在1×10-4mol/L鲁米诺及3 mL/L双氧水(H2O2)条件下超弱发光强度随着时间的变化,Hela+DDP细胞明显降低(P<0.01).结论:在DDP非毒性剂量作用后,Hela+DDP细胞超弱发光强度降低,提示超弱发光检测可能作为筛选敏感化疗药物的一项指标.
- 杨海宁惠延平辛晓燕黄艳红王波杨慧宁
- 关键词：宫颈肿瘤超微弱发光细胞凋亡顺铂
- 顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡后氧自由基水平的变化
- 2009年
- 目的探讨顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡后氧自由基水平的变化特点。方法应用MTT比色法、流式细胞术、电子显微镜观察化疗前后Hela细胞活性、细胞周期,以及凋亡形态的改变;用化学比色法检测细胞凋亡前后细胞内丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的含量。结果顺铂处理Hela细胞48 h的IC_(50)值为3 mg/L,当DDP浓度在3 mg/L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系(P<0.001);与亲本细胞相比较,Hela+DDP细胞的G_2期细胞数增多,为(90.80±8.37)%,而G_1、S期的细胞数明显减少,分别为(30.84±8.02,5.30±0.60)%。扫描及透射电镜下可观察到典型的凋亡早期细胞形态学改变;当DDP作用48 h后,细胞内SOD的活性比对照组显著降低(P<0.05),细胞内的脂质过氧化产物MDA的含量与对照组相比显著升高(P<0.01),抗氧化剂GSH的含量较对照组明显降低(P<0.05)。结论经DDP可诱导Hela细胞的凋亡,其机制可能与细胞的氧化损伤有关。
- 杨海宁惠延平辛晓燕杨慧宁王映梅周咏春郎海洋
- 关键词：人宫颈癌细胞氧自由基凋亡透射电镜
- HL-60细胞及其耐药细胞株HL-60/ADM超弱发光的检测被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60)和其耐药株抗阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60/ADM)的超弱发光与耐药性的关系。方法:应用MTT比色法、流式细胞术、细胞生长曲线和免疫组化染色法,检测HL-60细胞、HL-60/ADM细胞对阿霉素(ADM)的敏感性、细胞周期变化及P-糖蛋白(P-gp170)的表达。用IFFM-D型流动式化学发光仪检测HL-60细胞及HL-60/ADM细胞的超弱发光强度。结果:HL-60/ADM细胞对ADM的敏感性明显低于亲本HL-60细胞;HL-60/ADM细胞中G0/G1期的细胞为44·80%±1·97%,G2/M期的细胞为9·90%±0·27%,较其亲本细胞增多,S期的细胞为45·30%±1·93%,较其亲本细胞减少(P<0·05);HL-60/ADM细胞倍增时间是HL-60细胞的1·8倍,P-gp170的表达呈阳性,HL-60细胞呈阴性。在1×10-4mol/L鲁米诺及3mL/L双氧水条件下,密度分别为8×107/L、1×108/L、1·26×108/L及2·73×108/L的HL-60/ADM细胞超弱发光强度低于HL-60细胞(P<0·05)。结论:HL-60/ADM细胞对ADM的敏感性降低,细胞生长延缓,P-gp170表达呈阳性等均提示HL-60/ADM细胞出现了耐药性;且随着HL-60/ADM细胞耐药性的产生其超弱发光强度较其亲本细胞HL-60降低,提示细胞超弱发光强度明显降低可作为细胞耐药性产生的一项指标。
- 马世荣惠延平徐玉乔李焰
- 关键词：超弱发光
- 环孢霉素A逆转人白血病耐药细胞系HL-60/ADM及其超微弱发光的观察被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨环孢霉素A(CSA)对抗阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系HL-60/ADM的耐药逆转作用,并比较二者之超微弱发光强度的特点。方法:选择环孢霉素A(CSA)作为耐药逆转剂,分别采用MTT法、流式细胞仪和免疫组化法分析CSA对人白血病耐药细胞系的毒性及逆转效果;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测细胞的超微弱发光强度。结果:当CSA浓度在4ug/mL以下时,对HL-60/ADM无明显毒性作用,超过此浓度,其毒性呈剂量效应(P＜0．001)。当CSA浓度为0．5ug/mL时就有明显逆转作用,随着CSA剂量增加,逆转作用逐渐增强(P＜0．01),当CSA剂量达8ug/mL以上时对细胞存活产生明显的影响;流式细胞仪分析细胞周期可见逆转耐药细胞系HL-60/ADM+CSA较耐药细胞系HL-60/ADM的G2期细胞显著增多,而S期细胞明显减少(P＜0．01);免疫组化结果显示HL-60/ADM细胞膜上P-gp高表达,经CSA作用后其表达下降;在10-4mol/L鲁米诺及0．3%双氧水条件下HL-60/ADM细胞超微弱发光强度高于用CSA逆转后的细胞(P＜0．001)。结论:CSA能有效逆转HL-60/ADM的耐药性;逆转后细胞超微弱发光强度值的降低可能与其细胞增殖速度减慢,DNA复制减少,细胞内氧化代谢减弱以及自由基水平降低等因素有关。
- 徐玉乔惠延平马世荣
- 关键词：耐药逆转剂超微弱发光
