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用抗SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体定位研究受染器官被引量：1: 2009年; 目的利用单克隆抗体研究人体内严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)感染的靶细胞。方法利用抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体,采用免疫组织化学检测的方法,对一例SARS死亡病例进行组织定位研究。结果在该病例多器官的组织中检测到SARS-CoV。结论SARS-CoV在体内多种组织中存在得到证实,SARS是以肺脏为主要靶器官的多脏器受染的疾病,这为SARS临床诊断和实验研究提供了依据。; 戚扬郝俊勤迟淑萍孙艳玲赵景民程云; 关键词：N蛋白单克隆抗体

严重急性呼吸综合征患者血清中存在抗肺组织抗体被引量：10: 2003年; 目的 :建立特异性的检测严重急性呼吸综合征 (SARS)相关抗体的血清学方法。方法 :制备 SARS患者肺组织包被抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测 SARS患者血清中特异性抗体。结果 :SARS患者血清中存在 SARS相关的抗人肺组织抗体 ,其阳性率达 92 .86 %(2 6 / 2 8) ,正常献血员为 11.4 3%(12 / 10 5 ) ,统计学分析表明 ,SARS相关抗体的检出率在患者和献血员之间存在明显差异。结论 :SARS患者血清中存在抗肺组织抗体 ,该抗体的存在提示机体免疫反应可能参与了疾病病理损伤过程 ;检测该抗体可能有助于; 郑宇李伯安何卫平陈昊赵军李靖貌盼勇毛远丽高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征非典型肺炎酶联免疫吸附试验血清学方法

SARS患者血清中SARS相关冠状病毒抗体产生规律的初步分析被引量：5: 2003年; 目的 :了解严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS病毒特异性 Ig M、Ig G抗体产生的规律。方法 :随机选取32例 SARS患者 5 5份血清标本 ,应用 EL ISA分别检测抗 SARS病毒 Ig M、Ig G抗体。结果 :Ig M抗体阳性率为 5 6 .4 % ,平均出现时间为 (5 .88± 2 .6 2 ) d,其中 2例患者在发病后第 2天即出现阳性 ,平均消失时间为 (14 .2 5± 2 .97) d;Ig G抗体阳性率为4 1.9% ,平均出现时间为 (11.4 0± 4 .2 0 ) d,其中 2例患者在发病后第 3天即为阳性 ;Ig M和 Ig G抗体的总体阳性漏检率为6 .2 5 %。结论 :SARS患者于发病后 3～ 7d血清中出现特异的 Ig M抗体 ,可用于实验室诊断 ;同时进行 Ig M和 Ig G抗体的检测可用于发病 8～ 14; 李靖陈昊李伯安柯屾赵军郑宇何卫平舒翠莉高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒抗体 IGM IGG

严重急性呼吸综合征患者肺组织包被抗原的特异性研究被引量：4: 2003年; 目的 :探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)肺组织包被抗原在不同个体以及猪、羊、大鼠中的种属特异性。方法 :匀浆SARS患者尸检肺组织、非 SARS患者肺组织以及猪、羊、大鼠肺组织后分别包被 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA) ,同时检测SARS患者及正常献血员血清中的 Ig G。结果 :SARS患者及正常献血员血清用 SARS尸检患者与非 SARS患者肺组织包被抗原检测 ,两种组织包被抗原检测的阳性率间无统计学差异 ;而用非 SARS患者肺组织包被抗原检测的阳性率和用羊、猪、大鼠肺组织包被抗原检测的阳性率均具有统计学差异。结论 :SARS患者肺组织及非 SARS患者肺组织中存在相同的抗原 ;其他动物中可能也存在该抗原。; 李伯安郑宇陈昊何卫平赵军舒翠莉李靖高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征抗原特异性酶联免疫吸附试验非典型肺炎

严重急性呼吸综合征患者血清中SARS相关抗体的特异性研究被引量：4: 2003年; 目的 :检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS相关抗体的抗原特异性。方法 :采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)检测血清中 Ig G抗体 ,并采用抗原抗体的预孵育 ,吸附血清中抗原特异性抗体 ,检测其抗原特异性。结果 :SARS患者血清与 SARS患者肺组织以及非 SARS患者肺组织均有相似的反应性。阳性血清与非 SARS患者肺组织孵育后 ,其中抗SARS患者肺组织抗体被吸收 ,吸收率为 10 0 %。结论 :本组 SARS患者血清中存在抗肺组织抗体 ,其对; 赵军陈昊郑宇李伯安何卫平李靖高蓉程云; 关键词：严重急性呼吸综合征血清抗原特异性 ELISA 非典型肺炎

一株变异SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定被引量：1: 2004年; 目的 :克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒 (SARS CoV)N蛋白的DNA ,构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并诱导表达。方法 :采用RT PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段 ,并克隆入T EASY载体中。经PCR、双酶切鉴定后 ,测序。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX 2T中 ,表达融合蛋白。用表达产物与抗SARS CoV抗体阳性血清做Westernblot。结果 :N蛋白DNA测序的结果与GenBank比对缺失 2 0个bp。GST N融合蛋白以可溶形式表达。Westernblot检测表明 ,其与抗SARS CoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论 :成功地构建原核表达质粒pGEX 2T/N ,并表达GST N融合蛋白 ,为下一步的研究奠定了基础。; 戚扬郑宇舒翠莉姜丽胡燕貌盼勇程云; 关键词：严重急性呼吸综合征 N蛋白

抗SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备和初步应用被引量：6: 2005年; 目的:研制抗SARSCoVN蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法:以纯化的GSTN免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗SARSCoVN蛋白mAb;用免疫双扩散鉴定Ig亚类;Westernblot和免疫组化鉴定mAb的特异性;间接ELISA检测mAb的腹水效价、相对亲和常数。结果:获得1株可分泌特异性mAb的抗SARSCoVN蛋白的杂交瘤细胞系3E10H,Ig亚类为IgG2b;其腹水效价为8×10-5;其相对亲和力1.725×10-10mol/L,Westernblot和免疫组化阳性。结论:获得特异性抗SARSCoVN蛋白的mAb,为进一步用于临床诊断和实验研究创造了条件。; 孙杰文翠容戚扬李靖汪莉亚周继文程云; 关键词：N蛋白单克隆抗体

抗SARS冠状病毒N蛋白多克隆抗体的制备和鉴定: 2006年; 目的制备抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的多克隆抗体。方法以纯化的GST-N免疫新西兰白兔,制备抗SARS-CoVN蛋白多抗,间接ELISA法检测兔血清效价,Westernblot和免疫组化鉴定多抗的特异性。结果制备的抗SARS-CoVN蛋白多克隆抗体经ELISA检测效价为1·2×10-5,Westernblot和免疫组化证实此抗体可与SARS-CoVN蛋白特异性结合。结论成功地制备了抗SARS-CoVN蛋白多抗,为进一步的临床诊断和实验研究创造了条件。; 戚扬文翠容迟淑萍孙杰朱雷周继文程云; 关键词：SARS病毒 N蛋白

PGEFP-C1/N载体的构建及其在转染细胞中的初步定位: 2005年; 目的观察SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的亚细胞定位。方法将SARS-CoV N基因片段克隆入融合绿色荧光蛋白载体(PGEFP-C1)中。采用瞬时转染技术,在A549、VeroE6细胞株中利用荧光显微镜观察GPT-N蛋白的亚细胞定位,Westernblot鉴定N蛋白的表达。结果成功构建了PGEFP-C1/N表达载体,在A549、VeroE6细胞中观察到N蛋白定位于细胞胞浆中,Western blot证实了N蛋白表达。结论SARS-CoV N蛋白在真核细胞中定位于细胞胞质中。; 戚扬孙杰文翠容李靖舒翠莉程云; 关键词：SARS病毒 N蛋白亚细胞定位

Safety of convalescent sera for the treatment of viral severe acute respiratory syndrome： an experimental model in rhesus macaque被引量：1: 2013年; Serotherapy has assumed different clinical roles over the years.With the development of antibiotics,the use of serotherapy to treat bacterial diseases declined.However,interest in viral serotherapy increased due to the lack of a specific therapy for viral infections.Human convalescent sera have been used to treat and prevent measles,mumps,polio,Spanish flu,vaccinia and varicella viral infection,among others.; HE Wei-pingLI Bo-anZHAO JunCHENG Yun; 关键词：SAFETY

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国家自然科学基金(30340010)

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