国家自然科学基金(30470659)
- 作品数:4 被引量:24H指数:3
- 相关作者:劳杰顾玉东何继银李继峰蒋良福更多>>
- 相关机构:复旦大学上海交通大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 应用转录因子蛋白/DNA组合芯片技术检测激活态雪旺细胞的活性转录因子
- 2008年
- 目的检测激活态雪旺细胞活性转录因子。方法应用转录因子蛋白/DNA组合芯片技术检测激活态雪旺细胞的活性转录因子。结果激活态雪旺细胞和正常态雪旺细胞的转录因子芯片点阵图显示:激活态雪旺细胞比正常态雪旺细胞有5个转录因子蛋白上调2倍以上,它们是AP-1、NRF-1、NF-AT、PO-B和PRDI-BF;活化的AP-1蛋白的显著增加可能就是激活态雪旺细胞增殖活性高的重要原因;NF-AT表达升高可能是协同AP-1的转录表达;激活态雪旺细胞可能通过提高NRF1和mtTFA表达。引起线粒体呼吸链酶蛋白表达升高,线粒体酶活性升高,从而提高线粒体能量代谢,为激活态雪旺细胞的高分泌状态提供能量,促进激活态雪旺细胞的增殖;而PO-GA不仅作用于它的靶基因,而且还作用于其他的基因位点,调节转录和DNA的修复和复制。PRDI-BF的升高也与激活态雪旺细胞的特殊功能密切相关的。结论5个转录因子蛋白上调都与激活态雪旺细胞的快速分裂、高分泌状态密切相关。
- 何继银劳杰顾玉东李继峰
- 关键词:许旺细胞
- 激活态雪旺细胞生长相关蛋白43 mRNA表达的研究被引量:12
- 2005年
- 目的分析激活态雪旺细胞较正常雪旺细胞生长相关蛋白43(growthassociatiopnrotein43,GAP43)的基因表达变化。方法选取10只SD大鼠,将大鼠右上肢正中神经在腋部切断,预变性,1周后取1cm长正中神经采用双酶消化法获取雪旺细胞并进行激活得到激活态雪旺细胞;取左上肢正常正中神经经双酶消化法获取正常态雪旺细胞作为对照。自雪旺细胞提取mRNA,应用rt-PCR的方法扩增GAP43基因,取PCR产物行1%琼脂糖凝胶电泳,用低浓度的绿色荧光核酸胶染剂染色,测量荧光强度,计算目标基因和内标基因(GAPDH)PCR产物的荧光强度比值,以配对t检验比较实验组和对照组结果。结果激活态雪旺细胞GAP43PCR产物荧光强度比值较正常雪旺细胞明显增高,差异有统计学意义(P=0.003)。表明激活态雪旺细胞较对照组正常雪旺细胞GAP43mRNA表达明显增多。结论激活态雪旺细胞GAP43的基因表达较正常雪旺细胞增强,这可能是其促进神经再生的重要机制。
- 劳杰蒋良福顾玉东
- 关键词:激活态雪旺细胞生长相关蛋白右上肢预变性左上肢
- 激活态雪旺细胞信号转导通路的分子构成被引量:3
- 2008年
- 目的探索激活态雪旺细胞信号转导通路的分子构成。方法用改良成年SD大鼠雪旺细胞培养法获得激活态和正常态雪旺细胞,分别用RTK和G蛋白耦联的信号转导通路中的7个抑制剂后,Western Blot法检测细胞内的p-ERK1/2水平的改变。比较激活态和正常态雪旺细胞的信号转导通路的差异。结果Western Blot法检测结果显示,在激活态雪旺细胞,使用抑制剂CTX、D609和BAPTA-AM后细胞内的p-ERK1/2水平显著降低(P〈0.01),而其它抑制剂使用后细胞内的p-ERK1/2水平无明显的改变。在正常态的雪旺细胞,使用抑制剂U73122和BAPTA-AM后细胞内的p-ERK1/2水平显著降低,而其它抑制剂使用后细胞内的p-ERK1/2水平无明显的改变,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论激活态雪旺细胞和正常态雪旺细胞都是通过G蛋白耦联信号转导通路来发挥生物效应,但是激活态雪旺细胞通过PC-PLC分解磷脂酰胆碱使细胞内的DAG水平的提高来发挥生物效应.而正常态雪旺细胞则通过PI—PIE信号转导通路发挥其生物效应。
- 何继银劳杰顾玉东李继峰
- 关键词:许旺细胞细胞培养技术P-ERK1/2
- 激活态雪旺细胞信号转导通路的初步研究被引量:12
- 2006年
- 目的培养、鉴定激活态的雪旺细胞,探索激活态雪旺细胞信号转导通路。方法用改良成年SD大鼠雪旺细胞培养法激活态的雪旺细胞,S-100染色鉴定,Western Blot法测定ERK1/2水平,初步探索激活态雪旺细胞的信号转导通路。结果光镜下激活态雪旺细胞和正常态的雪旺细胞形态上无差异,S-100染色均为阳性,Western Blot法检测细胞内的ERK1/2水平无明显的差异,但P-ERK1/2水平两者差异有统计学意义(P<0.01)。这可能是雪旺细胞被激活的一个关键。结论激活态雪旺细胞和正常态雪旺细胞是同一细胞的二种不同存在的状态,有活性的P-ERK1/2水平的升高可能是雪旺细胞激活的关键。对于激活态雪旺细胞完整的信号转导通路尚需要进一步研究。
- 何继银劳杰蒋良福顾玉东赵新李继峰
- 关键词:雪旺细胞ERK1/2P-ERK1/2