浙江省自然科学基金(Y2100546)
- 作品数:5 被引量:12H指数:3
- 相关作者:蔡振寨郑继行薛战雄周香王成更多>>
- 相关机构:温州医科大学温州医学院附属第二医院宁波市第一医院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Lxn,bcl-2,c-myc在胰腺癌干细胞中的表达及意义被引量:3
- 2013年
- 本研究通过免疫磁珠分选技术分选出胰腺癌细胞株Miapaca-2中的CD133+细胞,并检测lxn,bcl-2,c-mye在CD133+与CD133-细胞中表达,探讨其可能的生物学意义。
- 郑继行蔡振寨周香盛维为樊钊强薛战雄郑志强
- 关键词:干细胞BEL-2C-MYCMIAPACA-2BCL-2C-MYE
- Latexin对耐吉西他滨胰腺癌细胞化疗改善作用及其可能机制的体外研究被引量:3
- 2017年
- 目的 观察Latexin干预对耐吉西他滨胰腺癌SW1990细胞耐药性的影响,探讨其可能机制.方法 采用吉西他滨药物浓度梯度递增诱导法建立吉西他滨耐药SW1990细胞株(SW1990/GZ).采用CCK-8法检测吉西他滨对SW1990、SW1990/GZ细胞的IC50,并检测10、20、40 ng/μl Latexin干预细胞48 h后的IC50,计算耐药指数(RI).采用定量RT-PCR 法、蛋白质印迹法检测SW1990、SW1990/GZ细胞Latexin基因mRNA和蛋白的表达,检测40 ng/μl Latexin干预48 h后SW1990、SW1990/GZ细胞Shh、Gli1的mRNA和蛋白表达.结果 成功建立了SW1990/GZ细胞株,它在含150 μmol/L吉西他滨的培养液中稳定生长、传代. 吉西他滨对SW1990、SW1990/GZ细胞的IC50值分别为(3.8±0.4)μmol/L和(226.5±13.6)μmol/L,SW1990/GZ细胞显著高于SW1990细胞,差异有统计学意义(P=0.000);RI均值为59.6.10、20 、40 ng/μl Latexin干预48 h后,吉西他滨对SW1990细胞IC50值分别为(3.0±0.4)、(2.5±0.3)、(1.8±0.3)μmol/L,对SW1990/GZ细胞的IC50值分别为(113.08±5.01)、(70.26±2.31)、(42.12±1.31)μmol/L,除10 ng/μl Latexin干预的SW1990细胞外,其余剂量Latexin干预的SW1990、SW1990/GZ细胞IC50值均较未干预细胞显著下降,差异具有统计学意义(P值均〈0.05);RI均值分别为37.7、28.1、23.1.SW1990、SW1990/GZ细胞Latexin的mRNA相对表达量分别为0.85±0.08、0.31±0.07, 蛋白相对表达量分别为0.49±0.09、0.13±0.05,SW1990/GZ细胞的表达量显著低于SW1990细胞,差异均有统计学意义(P值均〈0.01).40 ng/μl Latexin干预48 h后,SW1990/GZ细胞Shh mRNA表达量从未干预细胞的0.89±0.09下降至0.53±0.06,Gli1 mRNA表达量从0.58±0.06下降至0.35±0.05;Shh蛋白表达量从0.72±0.09下降至0.35±0.06,Gli1蛋白表达量从0.78±0.08下降至0.28±0.03,差异均有统计学意义(P值均〈0.01).结论 Latexin能增强耐吉西他滨胰腺癌SW1990细胞对吉西他滨的敏感性,其机制可能与抑制SHH通路的激活有关
- 郑继行王成周香薛战雄蔡振寨
- 关键词:胰腺肿瘤吉西他滨信号传导
- 双氢青蒿素抑制人胰腺癌细胞SW-1990的实验研究被引量:4
- 2012年
- 目的:研究双氢青蒿素对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测不同浓度双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胰腺癌细胞株SW-1990增殖的影响;流式细胞术Annexin V-FITC和PI双标染色法检测不同浓度DHA对其凋亡的影响;并且用激光共聚焦显微镜观察在Hoechst 33342/PI荧光双染色下胰腺癌细胞SW-1990形态学变化;RT-PCR检测DHA对胰腺癌细胞SW-1990中端粒酶催化亚单位hTERT mRNA表达的影响。结果:DHA在体外可以明显的抑制SW-1990的增殖,并且具有浓度-时间依赖性;DHA在体外能明显诱导SW-1990细胞的凋亡;DHA可以抑制胰腺癌细胞SW-1990中hTERT mRNA的表达,并且与浓度呈正相关。结论:DHA在体外抑制胰人腺癌细胞SW-1990的增殖、诱导其凋亡,其作用机制可能是抑制了肿瘤细胞中端粒酶催化亚单位hTERT mRNA的表达。
- 吴伟林杜章鲍贤俊陈玲玲蔡振寨
- 关键词:双氢青蒿素人胰腺癌细胞增殖凋亡HTERT
- Latexin基因转染对CD133^+MIAPaca-2胰腺癌干细胞增殖的影响被引量:1
- 2016年
- 目的探讨Latexin(Lxn)基因对CD133+MIAPaca-2胰腺癌干细胞增殖的影响。方法采用磁珠分选法从MIAPaca-2胰腺癌细胞株中分选出CD133+细胞,在无血清培养基中观察其形态变化及种植到裸鼠皮下后的成瘤能力。采用脂质体法将不同浓度的插入Lxn基因(1、3、5μg)的质粒转染CD133+MIAPaca-2胰腺癌细胞。应用RT—PCR及蛋白质印迹法检测转染的癌细胞LxnmRNA及蛋白表达量。CCK-8法检测转染癌细胞的增殖能力。结果成功分离出CD133+;MIAPaca-2胰腺癌细胞,它以悬浮成球的方式生长,以1×10^5个癌细胞种植裸鼠皮下的成瘤率达100%。转染插入Lxn的质粒后,CD133+ MIAPaca-2胰腺癌细胞Lxn基因的表达呈转染剂量依赖性地增加,转染5μg质粒的细胞LxnmRNA及蛋白表达量分别为20.80±0.98、16.80±2.73,显著高于未转染细胞的1.02±0.01、1.01±0.01,差异均有统计学意义(P值均〈0.05);转染后癌细胞增殖活性呈转染剂量及培养时间依赖性地被抑制,转染0.4μg质粒的癌细胞的生长抑制率达36.2%,显著高于未转染细胞的抑制率,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论CD133+MIAPaca-2胰腺癌细胞具有肿瘤干细胞部分特性,Lxn基因转染对CD133+MIAPaca-2胰腺癌干细胞增殖具有抑制作用。
- 王成蔡振寨周羽翙郑继行薛战雄
- 关键词:肿瘤干细胞细胞增殖
- Lxn对CD133+PANC-1胰腺癌细胞增殖及bcl-2、bax表达的影响被引量:1
- 2016年
- 目的探讨Lxn对CD133+PANC-1胰腺癌细胞增殖及bcl-2、bax表达的影响。方法应用免疫磁珠分选技术分选PANC-1中CD133+细胞;通过成球及成瘤试验研究CD133+细胞的特性及Lxn对CD133+细胞裸鼠移植瘤的影响。应用CCK-8法检测Lxn对CD133+PANC-1细胞增殖的影响。应用Westernblot及qRT-PCR检测经Lxn处理后CD133+PANC-1细胞bcl-2、bax等表达改变。结果成功从PANC-1中分选出CD133+细胞,在无血清培养基中,CD133+细胞形成干细胞球,而CD133-细胞则缓慢贴壁生长、逐渐凋亡。CD133+细胞呈高致瘤性,而外源性Lxn治疗后能明显抑制CD133+PANC-1裸鼠移植瘤的生长,与对照组[(225.52±34.09)mm3]相比,瘤体平均体积明显减小(P〈0.05)。CCK-8检测显示Lxn能抑制CD133+PANC-1细胞增殖(P〈0.05)。经Lxn处理后CD133+PANC-1细胞bcl-2表达下降,而bax表达则增加。结论Lxn抑制CD133+PANC-1细胞的增殖,可能与调节bcl-2、Bax表达相关。
- 郑志强郑继行蔡振寨王成周香薛战雄
- 关键词:胰腺肿瘤细胞增殖