中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2010jc-7-4)
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 相关作者：冯冲潘登科朱彦宾龙川马文丽更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所甘肃农业大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- Scriptaid处理可提高近交系五指山猪克隆胚胎的发育能力和克隆效率被引量：3
- 2011年
- 为探讨一种新型低毒的组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid处理克隆胚胎时对其发育能力和克隆效率的影响,本研究以近交系五指山小型猪胎儿成纤维细胞为供体细胞进行体细胞核移植构建重构胚胎,重构胚胎激活后培养在添加Scriptaid不同浓度(0～300nmol/L)的胚胎培养液中培养不同的时间(0～36h),观察克隆胚胎的卵裂率和囊胚率,评价克隆胚胎体外的发育能力。实验结果发现100nmol/L Scriptaid处理24h组克隆胚胎的囊胚发育率(30.4%)较对照组(17.5%)显著提高,P<0.05。将100nmol/L Scriptaid处理24h组克隆胚胎和对照组胚胎分别移植到4头受体母猪中,进一步观察其体内的发育能力。处理组克隆胚胎的受体在平均窝产仔数和克隆效率(分别为5头,2.4%)均显著高于对照组(分别为1.5头,0.7%),P<0.05。以上结果表明,100nmol/L Scriptaid处理24h近交系五指山小型猪克隆胚胎,有利于提高克隆胚胎的发育能力和克隆效率。
- 朱彦宾龙川冯冲潘登科罗玉柱
- 关键词：核移植胚胎克隆效率
- 利用启动子缺陷型打靶载体敲除五指山小型猪GGTA1基因被引量：16
- 2011年
- 目的:获得α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除的五指山小型猪胎儿,为异种器官移植研究提供基础平台。方法:以新霉素磷酸转移酶基因(neo)为筛选标记基因构建启动子缺陷型打靶载体,打靶载体线性化后用电转染法将其导入胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞经G418筛选后,用PCR法检测药物抗性的细胞克隆,对阳性细胞进行核移植构建重构胚胎及胚胎移植。结果:转染后,经筛选共得到176个具有G418抗性的细胞克隆,经PCR检测,其中2个细胞克隆发生了同源重组;以其中1个GGTA1+/-细胞克隆为供体细胞进行核移植,将重构胚移植到2头自然发情的受体母猪中,1头受体妊娠;第37 d将代孕母猪处死,获得2个胎儿,经PCR和Southern印迹鉴定,均为GGTA1单等位基因敲除胎儿。结论:构建了五指山小型猪GGTA1基因部分外显子4区域敲除的启动子缺陷型打靶载体,获得了GGTA1单等位基因敲除的胎儿,为培育GGTA1基因敲除的五指山小型猪奠定了基础。
- 郑道山冯冲朱彦宾龙川冯书堂潘登科马文丽
- 关键词：五指山小型猪基因敲除胎儿成纤维细胞
