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资冲颗粒含药血清对ανβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/FasL、IDO在人早孕绒毛膜组织中表达的影响被引量：3: 2016年; 目的:探讨资冲颗粒对体外人早孕绒毛膜组织ανβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/Fas L和IDO基因表达的影响。方法:对体外培养的人早孕绒毛膜组织加入2%、5%、10%的鼠资冲颗粒含药血清培养24-72h。同时,在组织培养中加入孕酮作为阳性对照组而仅有基础培养基为空白组。采用Q-PCR技术检测ανβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/Fas L和IDO m RNA的表达。采用特异ELISA试剂盒定量检测ανβ3和HLA-G的蛋白表达。结果:10%含药血清处理的绒毛膜组织的ανβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/Fas L、IDO基因表达均显著高于阳性对照组及空白组(P<0.05)。10%含药血清处理的绒毛膜组织的ανβ3和HLA-G蛋白表达显著高于阳性对照组及空白组(P<0.05)。结论:资冲颗粒具有增加ανβ3、HLA-G、HOXA10、Fas/Fas L和IDO基因表达的作用,可能是该中药复方治疗不孕症分子生物学机制之一。; 梁丽梅陆华吴荔罗刘衡周天秀; 关键词：人类白细胞抗原G FAS/FASL 吲哚胺2,3-二氧化酶

补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化被引量：2: 2013年; 目的验证补骨脂素能诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化的假说。方法使用终浓度为3.0μg/ml的补骨脂素干预大鼠间充质干细胞,显微观察细胞形态变化情况,接着使用MTT法检测细胞增殖变化,最后使用实时荧光定量PCR(Qpcr)测定被干预细胞的七种代表性的生殖分化标记基因的表达变化,七种标记基因分别为:Oct-4、Stra8、RVLG、SCP3、TNP2、Itgb1、Itga6。结果显微观察表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,大鼠间充质干细胞形态变化不显著;MTT法检测表明3.0μg/ml的补骨脂素干预的5 d中,大鼠间充质干细胞增殖情况变化不显著(P>0.05);Qpcr测定表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,显著上调了Oct-4、Stra8、SCP3、Itgb1等基因的表达(P<0.05),而对RVLG、TNP2、Itga6等基因的表达影响不显著(P>0.05)。结论补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向的分化。; 万谦陆华邓延莉梁丽梅; 关键词：补骨脂素雄性生殖细胞

资冲颗粒对大鼠间充质干细胞生殖分化相关标记基因表达的影响被引量：3: 2014年; 目的探讨资冲颗粒(熟地、菟丝子等)诱导大鼠间充质干细胞向生殖细胞分化相关基因表达的影响。方法制备大鼠含资冲颗粒血清及大鼠空白血清对大鼠间充质干细胞进行干预。显微镜观察细胞形态变化情况;实时荧光定量PCR测定干预后细胞内生殖分化相关Oct4、Stra8、Itga6、Itgb1、Scp3、Gdf9、Zp1、Zp3基因的表达;MTT法检测细胞增殖情况;运用统计软件分析两组数据。结果镜下观察72 h干预未发现含药血清和空白血清对细胞形态有明显影响;实时荧光定量PCR测定表明含药血清对Stra8、Scp3、Gdf9基因表达有显著影响(P<0.05),对其它基因表达的影响则不显著(P>0.05);MTT法显示5 d干预两组细胞增殖无差别(P>0.05)。结论资冲颗粒大鼠含药血清具有诱导大鼠间充质干细胞向生殖细胞方向分化的潜力。; 邓延莉万谦陆华

资冲颗粒体外上调人脐带静脉内皮细胞的VEGFR-2等8种基因转录水平的研究被引量：2: 2013年; 目的研究一种中药专利药方资冲颗粒促进更年期妇女血管生成的机制。方法选用HUVEC细胞作为体外模型;制备资冲颗粒的大鼠含药血清:使用含药血清干预HUVEC;对干预后的细胞进行以下两方面检测:使用含药血清连续干预HUVEC 5 d,期间每天检测细胞形态、培养上清液中雌二醇(E2)水平变化和被干预的HUVEC的生长速率;使用含药血清干预3 d,而后用实时荧光定量PCR(Qpcr)检测8个血管生成相关基因的转录表达水平。结果资冲颗粒含药血清不明显改变HUVEC的细胞形态、培养上清液中的E2水平变化和HUVEC的生长速率;资冲颗粒含药血清明显上调了VEGFR-2、VEGFR-1、ANGPT-1、TIE-2和ER-1等基因的转录表达水平,同时明显下调VEGF-A基因的转录表达水平,而ER-2和ANGPT-2基因的转录表达水平无明显改变。结论研究初步阐明了资冲颗粒促进人血管生成的机制。; 万谦叶尚勉陆华胡翔尹巧芝田爱萍刘霞; 关键词：血管生成实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR的一些操作技巧: 2012年; 背景:实时荧光定量PCR(Qpcr)由于方法上的优势逐渐普及,受到使用者的欢迎,但是,最常用的SYBR Green I法Qpcr在使用中存在着由于不当操作而数据精度不高、重复性差、可信度的缺点。目的:向读者介绍提高SYBR Green I法Qpcr数据精度、重复性和可信度的操作技巧。方法:笔者根据实际工作中的经验详细说明一些有助于提高实验质量的操作技巧。结论:在SYBR Green I法Qpcr过程中注重操作技巧能大幅改善实验质量。; 万谦陆华; 关键词：实时荧光定量PCR 数据精度

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国家重点基础研究发展计划(2010Cb530403)