国家科技重大专项(2009ZX08012-010B)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 相关作者：郑晓冬陈自力朱加进邵咏妮施佳慧更多>>
- 相关机构：浙江大学浙江省标准化研究院浙江理工大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2012年
- 通过免疫兔子、细胞融合、筛选杂交瘤细胞、构建重组载体、抗体纯化等步骤,成功制备出抗β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)兔单克隆抗体。运用间接ELISA法测定该兔单克隆抗体的相关特性,结果表明该兔单克隆抗体的效价为64000左右,亲和常数为2.13×109L/mol。间接ELISA检测β-GUS蛋白时,其最低检测限为50ng/mL。本次试验为研制定性或定量检测β-GUS蛋白的ELISA试剂盒奠定了基础。
- 沈金儿倪庚郑晓冬
- 关键词：间接ELISA免疫
- 基于核酸分子杂交的免疫芯片抗体固定新方法被引量：1
- 2013年
- 基于核酸分子杂交原理构建了一种新型抗体固定方法。先将抗体与寡核苷酸单链交联,再将两者的复合物与固相载体表面上的互补寡核苷酸链结合,从而将抗体固定到载体的表面。在磁珠表面对该固定方法进行实验,证明了方法的可行性。以本方法构建了针对转基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3标记二抗对其探针固定效果进行分析,并且在芯片上对Bt Cry1Ac蛋白进行梯度浓度检测试验。结果表明,以本方法构建的抗体芯片,探针分布具有良好的特异性;探针层分布均匀,非特异吸附小;检测灵敏度达到0.01～0.05!g/L;此外,通过杂交核酸双链的解离成功实现了芯片的再生,有助于解决传统抗体固定方法中芯片不可再生的问题。
- 沙莎殷赟高晓莲黄庄荣余挺郑晓冬
- 关键词：核酸杂交
- 转基因棉花中棉41多重PCR体系的建立被引量：1
- 2013年
- 利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系。多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度。利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因Cry1Ac。
- 徐方娇冯俊丽梁颖陈集双
- 关键词：多重PCR
- 可见/近红外光谱分析技术快速鉴别航天育种番茄被引量：3
- 2011年
- 提出了利用可见/近红外光谱技术快速无损鉴别航天育种番茄品种的方法,采用偏最小二乘法对光谱特征信息进行提取,与神经网络结合建立番茄品种的鉴别模型。该模型将提取后的主成分作为神经网络的输入,加速了神经网络的训练速度。同时采用小波变换对大量光谱数据进行压缩,并结合神经网络建立番茄品种鉴别模型,该模型将压缩后的数据作为神经网络的输入。通过对太空育种突变株M1,M2及其亲本番茄品种的共105个番茄果实样本建立训练模型,并用每个品种15个样本,共45个番茄果实的样本进行预测。两个模型的鉴别正确率分别达到95.6%和97.8%。说明本方法具有较高的鉴别准确度,为航天育种番茄品种的快速无损鉴别提供了新的方法。
- 施佳慧陈自力邵咏妮何勇冯盘朱加进
- 关键词：近红外光谱偏最小二乘法人工神经网络
