国家自然科学基金(81000912)
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 相关作者：居颂光葛彦居颂文殷丽丽杨鹏更多>>
- 相关机构：苏州大学南京医科大学江苏省人民医院更多>>
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- 4-1BBL逆向信号对人多发性骨髓瘤细胞株U266的促生长作用及其机制研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨4-1BBL逆向信号对人多发性骨髓瘤细胞株U266的促生长作用及其机制。方法采用免疫荧光标记和流式细胞术检测U266细胞株表面4-1BBL分子的表达;采用抗人4-lBBL单抗(1F1)激发4-1BBL逆向信号,通过细胞计数及MTT法观察U266细胞增殖;通过细胞内细胞因子染色检测U266细胞内白细胞介素-6(IL-6)的合成,并利用中和性抗体阻断IL-6的生物学作用,观察IL-6是否参与了4-1BBL逆向信号对U266细胞的促增殖作用。结果 U266细胞表面高表达4-1BBL分子;细胞计数及MTT实验均表明单抗1F1明显促进U266细胞系生长;细胞内细胞因子染色示1F1促进U266自分泌IL-6增多。中和IL-6能够抑制单抗1F1对U266细胞促增殖作用。结论 U266细胞株高表达4-1BBL分子;4-1BBL逆向信号通过增加IL-6的产生,促进U266细胞的增殖;4-1BB/4-1BBL分子可能是对多发性骨髓瘤进行免疫干预的重要靶点。
- 汪娟居颂光傅
- 关键词：4-1BBL逆向信号多发性骨髓瘤白细胞介素-6
- 人CD13基因克隆及其基因转染细胞株的构建
- 2012年
- 目的克隆人CD13全长cDNA，构建稳定表达人CD13分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA，通过RT-PCR克隆人CD13基因，将人CD13基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term／CD13和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T，收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞，筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD13基因和构建逆转录病毒载体pEGZ。Term／CD13，并成功获得稳定表达人CD13的基因转染细胞株L929／CD13。结论成功克隆了人CD13基因及其逆转录表达载体，成功制备了稳定表达人CD13的基因转染细胞株，为研究CD13生物学功能奠定了基础。
- 杨鹏葛彦陆婷邓云蒋林华殷丽丽居颂文居颂光
- 关键词：CD13APN基因转染细胞株
- 人CD48基因转染细胞株的构建被引量：2
- 2011年
- 目的克隆人CD48基因,构建稳定表达CD48分子的基因转染细胞株。方法提取人外周血单个核细胞总RNA,通过RT-PCR克隆获得人CD48基因,将人CD48基因重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染力的完整重组病毒载体,进而感染L929细胞,构建稳定表达人CD48分子的基因转染细胞株。结果成功克隆人CD48基因和构建PGEZ/CD48逆转录病毒表达载体,进而成功获得稳定表达人CD48的基因转染细胞株L/CD48。结论成功克隆了人CD48基因及其逆转录表达载体,并构建了稳定表达CD48分子的基因转染细胞株,为探讨CD48生物学功能的研究奠定了物质基础。
- 田辛辛葛彦袁桦蔡文治杨鹏蒋林华殷丽丽张弛孙雪薇居颂文居颂光
- 关键词：基因转染细胞株
- 人LGR5基因克隆及其基因转染细胞株的构建
- 2013年
- 目的克隆人LGR5分子并构建其稳定表达的基因转染细胞株.方法提取人宫颈癌细胞株HeLa细胞总RNA,通过RT-PCR克隆获得人LGR5全长cDNA,将人LGR5全长cDNA重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染力的完整重组病毒载体,收集培养上清感染L929细胞,筛选构建稳定表达人LGR5分子的基因转染细胞株.结果成功克隆人LGR5全长cDNA和构建pEGZ/LGR5逆转录病毒表达载体,成功获得稳定表达人LGR5的基因转染细胞株L/LGR5.结论成功克隆了人LGR5基因并构建了稳定表达LGR5分子的基因转染细胞株,为进一步研究LGR5分子的生物学功能奠定了基础.
- 邓云陆婷葛彦居颂文居颂光
- 关键词：LGR5克隆基因转染细胞株
- Rspo1基因转染间充质干细胞株的构建及生物学活性鉴定
- 2013年
- 目的：构建稳定表达Rspo1的基因转染间充质干细胞株。方法将人Rspo1全长cDNA重组入逆转录病毒载体pEGZ-Term，通过与辅助病毒载体共转染293T细胞，包装为具有感染力的完整重组病毒载体，收集培养上清感染间充质干细胞C3H10 T1/2细胞株，筛选获得G418抗性的基因转染细胞，通过RT-PCR与流式细胞术检测感染后C3H10 T1/2细胞Rspo1分子的表达，并采用细胞计数法观察其上清对SW480结肠癌细胞增殖能力的影响。结果成功构建pEGZ-Term/Rspo1逆转录病毒表达载体，获得了稳定表达人Rspo1的基因转染细胞株C3H10/Rspo1，该细胞株上清能促进SW480结肠癌细胞增殖。结论建立了稳定表达Rspo1的基因转染间充质干细胞株，为进一步利用Rspo1和间充质干细胞靶向作用于肠道干细胞救治肠上皮损伤的研究奠定了基础。
- 陆婷葛彦邓云陈伟宋莉曹莎莎居颂文居颂光
- 关键词：间充质干细胞基因转染细胞
- 人CD244基因转染细胞株的构建
- 2011年
- 目的构建稳定表达人CD244分子转基因细胞株。方法通过RT-PCR克隆人CD244基因,将人CD244基因重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term。将重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/CD244和辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的基因转染细胞。结果成功克隆人CD244基因,并稳定表达人CD244的基因转染细胞株L929/CD244。结论本研究成功构建了稳定表达人CD244的基因转染细胞株,为研究CD244生物学功能奠定了基础。
- 袁桦葛彦杨鹏蒋林华殷丽丽张弛孙雪薇居颂文居颂光
- 关键词：基因转染细胞
