江西科技师范大学生命科学学院江西省生物加工过程重点实验室 作品数:44 被引量:152 H指数:7 相关作者: 常军 何晓峰 吴文婷 季波 毛洁 更多>> 相关机构: 江西师范大学生命科学学院 江西师范大学生命科学学院江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室 江西中医药大学科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江西省自然科学基金 江西省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
东乡野生稻内生放线菌分离及菌株S123次级代谢产物分析 被引量:13 2015年 【目的】从东乡野生稻(Oryza rufipogon)中分离和鉴定内生放线菌,对其进行抗菌活性筛选,并分析高抗菌活性菌株S123的次级代谢产物。【方法】采用S培养基对东乡野生稻内生放线菌进行分离、纯化,并构建16S r RNA基因序列系统发育进化树进行菌株鉴定。以琼脂扩散法和菌丝生长速率法进行抗菌活性筛选,同时设计简并引物检测菌株I型聚酮合酶(PKS-I)基因。对具广谱抗菌活性的菌株S123进行分批大量发酵,运用多种色谱方法对发酵产物进行分离、纯化,利用MS和NMR分析鉴定化合物的结构。【结果】从东乡野生稻中共分离到11株内生放线菌,分别属于链霉菌属(8株)和假诺卡氏属(3株)。其中有8株具有抗菌活性,8株呈现I型PKS阳性。从高抑菌活性菌株S123中分离到化合物Nigericin和17-O-demethylgeldanamycin,其中Nigericin对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及水稻纹枯病菌均有抑制活性。【结论】对东乡野生稻内生放线菌进行了分离、鉴定和抗菌活性筛选,并从中分到两种与I型PKS基因相关活性的化合物Nigericin和17-O-demethylgeldanamycin,为研究东乡野生稻内生放线菌的多样性和次级代谢产物的分离提供依据。 张志斌 邓映明 熊瑶瑶 汪涯 颜日明 朱笃关键词:东乡野生稻 内生放线菌 次级代谢产物 羰基还原酶工程菌构建及其应用于还原制备S-CHBE 被引量:2 2013年 S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列构建了基因工程菌BL21(DE3)/pET28a-S1',提高了羰基还原酶表达效率,经诱导条件优化后羰基还原酶活力达11.49 U/mg蛋白;将BL21(DE3)/pET28a-S1'与E.coli BL21(DE3)/pET28a-gdh进行偶联,在单一水相中未添加辅酶条件下转化10 h,产物的摩尔转化率和对映体过量值(e.e.)分别达92.1%和100%。 张志斌 吴小芳 杨慧林 颜日明 曾庆桂 汪涯 朱笃关键词:生物催化 羰基还原酶 密码子优化 球毛壳菌小麦秸秆发酵产物抑制辣椒疫霉的稳定性及机制 2024年 【目的】由辣椒疫霉(Phytophthora capsici)侵染引起的疫病给辣椒等作物产业带来了巨大的经济损失。论文旨在明确球毛壳菌(Chaetomium globosum)代谢产物抑制辣椒疫霉的稳定性和抑菌机制,为研究与开发辣椒疫霉的微生物源抑菌剂提供参考。【方法】将球毛壳菌发酵粗提物分别在不同温度(40—121℃)、pH(1—13)、光照时间(0—12 d)和储存时间(0—60 d)条件下进行处理,采用菌丝生长抑制法测定经不同处理后粗提物对辣椒疫霉的抑制率,以探究粗提物抑制辣椒疫霉的热、酸碱、光和时间稳定性。利用光学显微镜观察粗提物对辣椒疫霉菌丝形态的影响,通过多种生理生化试验探究粗提物作用于辣椒疫霉12—72 h后,对辣椒疫霉细胞壁、细胞膜、活性氧代谢、蛋白质含量、还原糖含量和致病力的影响。【结果】在所设置的处理范围内,球毛壳菌发酵粗提物(1 mg·mL^(-1))经不同光照时间和储存时间处理后对辣椒疫霉的抑制率没有显著降低,抑制率维持在93%左右;粗提物在40—70℃的热处理范围内对辣椒疫霉的抑制率没有显著降低,70℃以上的热处理会显著降低粗提物对辣椒疫霉的抑制率,但抑制率不低于70%;粗提物在pH 1—5和9—13的酸碱处理范围内会显著降低对辣椒疫霉的抑制率,但抑制率也不低于70%。粗提物处理影响辣椒疫霉菌丝形态,使菌丝发生严重的扭曲皱缩现象,并影响活性氧代谢,使菌丝中的活性氧大量积累。辣椒疫霉经粗提物处理12—72 h后,其培养液中的碱性磷酸酶活性、β-葡萄糖苷酶活性、核酸和蛋白质含量均显著升高,且其菌丝中的丙二醛和过氧化氢含量显著增加。辣椒疫霉菌丝中的过氧化氢酶活性、可溶性蛋白和还原糖含量则在粗提物处理12—72 h内显著降低,而超氧化物歧化酶、过氧化物酶、多聚半乳糖醛酸酶和β-葡萄糖苷酶活性则仅在一定时间显著降低。【� 廖宏娟 谭佳思 张志斌 余璟蓉 张馨月 江玉梅 朱笃关键词:球毛壳菌 辣椒疫霉 抑制率 东乡野生稻内生真菌的分离鉴定及其抗菌活性研究 植物内生真菌作为一类特殊生境的微生物资源已成为研究和发现新的天然药物和生物活性成分的重要资源库.东乡野生稻具有耐寒、抗旱以及抗病虫害等优良性状,含有丰富的内生真菌资源.本研究采用组织分离的方法从东乡野生稻不同生长时期的根... 高波良 汪涯 张志斌 颜日明 朱笃关键词:东乡野生稻 内生真菌 抗菌活性 3株拮抗内生放线菌的鉴定及其抑菌活性初步研究 被引量:5 2015年 对分离自江西东乡野生稻根部的3株内生放线菌进行鉴定和抑菌活性研究,根据菌株的形态与培养特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列系统发育分析,将菌株FRo1、FRo2和FRo3分别鉴定为委内瑞拉链霉菌、娄彻氏链霉菌和肉质链霉菌.采用管碟法和菌丝生长速率法分析菌株拮抗病原细菌与病原真菌的活性.结果表明:菌株FRo1发酵液对所有测试细菌均有抑制作用,显示较广谱抑细菌活性;菌株FRo2显示出较强抑制金黄色葡萄球菌和7种病原真菌的活性,其中对金黄色葡萄球菌抑菌直径为22.33 mm,对小麦赤霉、水稻纹枯病菌、车前草核盘菌及胶胞炭疽菌的抑制率分别为70%、45%、58%和65%;而菌株FRo3发酵液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及伤寒杆菌表现出不同程度的抑制,除车前草核盘菌外对所测试的病原真菌均有抑制活性,但抑制率均低于50%,这些菌株抑菌效果良好,显示出较好的生防潜力. 熊瑶瑶 敖武 李怡 何晓峰 张志斌 朱笃关键词:内生放线菌 链霉菌属 抑菌活性 内生真菌β-D-葡萄糖醛酸苷酶固定化及其性质研究 被引量:1 2017年 以海藻酸钠为载体、戊二醛为交联剂,对内生真菌Chaetomium globosum S108的高选择性β-D-葡萄糖醛酸苷酶的固定化及部分特性进行了研究。结果表明:β-D-葡萄糖醛酸苷酶的最佳固定化条件为海藻酸钠1.5%、戊二醛1.5%、添加酶量3 500 U、Ca Cl2浓度2%,交联时间30 min。β-D-葡萄糖醛酸苷酶固定化后,其最适温度提高5℃,最佳pH值由6.0~6.8拓展为5.2~7.6,热稳定性和pH稳定性明显改善;米氏常数(Km)明显增大,而最大反应初速度(Vmax)明显减小。固定化酶重复操作15次,其相对酶活仍保持71%。 闫宜江 肖依文 汪涯 吴文婷 常军 何巧璇 朱笃关键词:甘草酸 固定化 内生真菌 蛇足石杉内生真菌无柄盘菌Pezicula sp.JR14中抑制乙酰胆碱酯酶的次级代谢产物分离 被引量:5 2018年 采用形态学及ITS-rDNA序列分析法,对具有抑制乙酰胆碱酯酶活性的蛇足石杉内生菌株JR14进行鉴定,确定为无柄盘菌Pezicula sp.。开展了乙酰胆碱酯酶抑制活性化合物的分离,从Pezicula sp.JR14乙酸乙酯提取物中分离到4个化合物,利用核磁共振及质谱技术将其鉴定为behenic acid(1)、himeic acid B(2)、secalonic acid A(3)和palmitic acid(4)。采用改进的Ellman比色法对分离的化合物进行活性检测,结果表明,himeic acid B(2)具有较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其IC50为205μg/mL(0.64mmol/L)。 郑瑞 张志斌 颜日明 汪涯 肖依文 朱笃关键词:蛇足石杉 内生真菌 乙酰胆碱酯酶抑制剂 东乡野生稻内生放线菌Streptomyces sp. PRh5抑菌活性次级代谢产物研究 被引量:1 2018年 从东乡野生稻中分离到一株生产较强抑菌活性代谢产物的内生放线菌菌株Streptomyces sp. PRh5,利用活性追踪法结合正相硅胶、凝胶柱层析等色谱技术从PRh5菌株发酵液中分离到4种抑菌活性化合物,经~1H NMR、^(13)C NMR和MS等波谱分析鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、尼日利亚菌素(2)、13-Docosenamide(3)、诺卡胺素(4)。这表明菌株PRh5具有开发为新型抑菌生物制剂的潜力。 包建莹 张志斌 肖依文 汪涯 颜日明 朱笃关键词:内生放线菌 STREPTOMYCES 抑菌活性 次级代谢产物 天然产物基于离子通道调控胰岛素分泌的研究进展 被引量:3 2017年 胰岛素的分泌受多种机制调控,包括多种离子通道。近年来,国内外研究者在离子通道调控胰岛素分泌方面进行了大量研究。本文就天然产物通过影响离子通道来调控胰岛素分泌的研究作一综述,为进一步开发利用天然产物提供理论参考。 胡庆娟 崔申申 李玉萍关键词:离子通道 胰岛素分泌 电子受体和光照对土壤CH_(4)排放相关微生物功能基因丰度的影响 被引量:3 2022年 为探究光照条件下添加不同电子受体对土壤甲烷排放的影响及微生物的响应,本研究在土壤中添加3种电子受体(Fe^(3+)、NO_(3)^(-)、SO_(4)^(2-))共设计8个处理,即黑暗+Fe^(3+)(DF)、黑暗+NO_(3)^(-)(DN)、黑暗+SO_(4)^(2-)(DS)、黑暗+蒸馏水(DCK)、光照+Fe^(3+)(LF)、光照+NO_(3)^(-)(LN)、光照+SO_(4)^(2-)(LS)、光照+蒸馏水(LCK),通过20 d的严格厌氧培养,分析甲烷浓度的变化以及细菌、古菌、真菌及6种土壤功能微生物基因丰度的变化。结果表明:除Fe^(3+)处理组外,NO_(3)^(-)、SO_(4)^(2-)和对照(CK)组在光照条件下的甲烷排放显著低于黑暗条件下。土壤细菌、古菌、真菌丰度分别在DN、DCK、LF处理组中显著上调。产甲烷菌mcrA、硫酸盐还原菌Dsr、固碳菌CbbL基因丰度均在LF组中显著上调,而甲烷氧化菌pmoA、铁还原菌Geo、反硝化细菌nosZ基因丰度分别在LN、DCK、LCK组中显著上调。Pearson相关性及冗余分析表明,CH_(4)排放与CO_(2)浓度、pH、铵态氮、总氮含量呈显著正相关,与N_(2)O浓度、氧化还原电位、硝态氮、总碳含量呈显著负相关。黑暗条件下甲烷排放浓度与古菌、pmoA基因丰度呈正相关,与其他功能基因均呈负相关。光照条件下甲烷排放浓度与微生物及功能基因丰度均呈负相关。总体上,光照条件下的甲烷排放显著低于黑暗条件下(除Fe^(3+)处理外),说明光照条件有助于甲烷减排,且甲烷排放的增减和环境中的电子受体种类及微生物的功能响应密切相关。 陈娟 胡琳玉 卢鹏伟 江玉梅 张志斌 曾庆桂 简敏菲 朱笃关键词:电子受体 湿地土壤 甲烷排放 光照