北部湾大学海洋学院广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室 作品数:54 被引量:115 H指数:5 相关机构: 河南师范大学生命科学学院 广西大学动物科学技术学院 河南农业大学资源与环境学院 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 高层次人才科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 经济管理 更多>>
不同苗种来源香港牡蛎的生长差异及基因表达相关分析 被引量:2 2022年 【目的】明确不同苗种来源香港牡蛎的生长差异及生长相关基因表达模式,为筛选出生长性状候选基因打下理论基础,也为繁育优质香港牡蛎新品种提供参考依据。【方法】通过比较人工繁育(人工组)和自然海域半人工采苗(天然组)2种模式获得香港牡蛎的生长差异,利用实时荧光定量PCR检测不同苗种来源香港牡蛎外套膜和闭壳肌中IGF1、AMPKα和FoxO1基因的表达情况,并利用统计学方法及相关分析探究生长指标(壳高、壳长、壳宽、鲜重和软体重)与生长相关基因表达变化间的相关性。【结果】人工组和天然组香港牡蛎在试验期间(4月龄~12月龄)的壳高、壳长、壳宽、鲜重和软体重等生长指标整体上呈增长趋势;人工组香港牡蛎的生长指标均显著高于天然组香港牡蛎(P<0.05,下同),但天然组香港牡蛎生长指标的整体增幅高于人工组香港牡蛎。天然组香港牡蛎外套膜和闭壳肌中IGF1、AMPKα和FoxO1基因在不同发育阶段的相对表达量整体上高于人工组香港牡蛎,但差异均不显著(P>0.05,下同)。相关分析结果表明,人工组和天然组香港牡蛎生长相关基因表达与生长性状间具有相关性,其中外套膜和闭壳肌的IGF1基因表达总量与壳高呈负相关,与壳宽呈正相关;AMPKα基因表达总量与壳高、鲜重和软体重等生长指标呈正相关,与壳宽呈负相关;FoxO1基因表达总量与壳宽呈负相关。【结论】无论是人工繁育还是自然海域半人工采苗获得的香港牡蛎,在生长性状及相关基因表达方面均存在一定差异。其中,IGF1、AMPKα和FoxO1基因参与调控香港牡蛎的生长发育,且对不同生长指标有不同的指示作用,因此开展人工繁育时可通过调控这些基因的表达以改变香港牡蛎生长指标的增幅。 严雪瑜 蒋美君 钟方杰 黄琮荔 张斌 彭金霞 朱鹏 李选积 覃波忠 何苹萍关键词:基因表达 方格星虫实时荧光定量PCR内参基因的选择与验证 被引量:1 2022年 目前研究基因定量表达的方法主要为实时荧光定量PCR,选择合适的内参基因可以提高实时荧光定量PCR分析的准确性。选取方格星虫的体壁肌肉、吻、肾管、脑、肠道、收吻肌、食道、血淋巴细胞为材料,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析EF1-α2、α-Tub1、RPL13-b、Actin1、H3-b、GAPDH1共6个候选内参基因的表达稳定情况,并以方格星虫的免疫球蛋白组织分布情况对内参基因的稳定性进行验证。结果显示,通过BestKeeper软件计算候选内参基因稳定性顺序为:RPL13-b>H3-b>EF1-α2>GAPDH1>Actin1>α-Tub1;Normfider软件分析候选内参基因稳定性顺序为:RPL13-b>EF1-α2>GAPDH1>H3-b1>Actin1>α-Tub1;geNorm软件分析候选内参基因稳定性顺序为:RPL13-b=H3-b>EF1-α2>GAPDH1>Actin1>α-Tub1。采用最稳定和最不稳定内参基因对免疫球蛋白基因在不同组织的表达水平变化进行校准时发现,其表达谱呈现不同模式。RPL13-b内参基因在方格星虫全组织中的表达最稳定,可作为最适单内参基因。 彭冰冰 宾东超 周于娜 杨志会 蔡小辉 彭银辉关键词:方格星虫 实时荧光定量PCR 内参基因 5种饲料对糙海参幼参生长和营养成分的影响 2024年 为探讨不同饲料间的营养搭配,优化热带海参配合饲料及提高糙海参(Holothuria scabra)人工养殖技术,本研究分析了5种饲料对糙海参幼参生长和营养成分的影响。试验采用虾料、螺旋藻粉、马尾藻粉、配合饲料和发酵饲料[由配合饲料、马尾藻粉、丁酸梭菌(Clostridium butyrate)、海洋红酵母(Rhodotorula benthica)和螺旋藻粉按一定比例混合发酵]分别投喂幼参[体质量为(1.06±0.20) g],养殖周期40 d,最后测定幼参的体质量、特定生长率(SGR)及体壁营养成分。结果显示,40 d时配合饲料组幼参体质量、SGR最高,发酵饲料组次之,均显著高于其余饲料组(P<0.05)。虾料组、配合饲料组幼参体壁粗蛋白含量显著高于马尾藻粉组、螺旋藻粉组(P<0.05),发酵饲料组与其余组间均无显著差异(P>0.05);配合饲料组、发酵饲料组和虾料组幼参含水率显著高于螺旋藻粉组、马尾藻粉组以及试验初始时幼参的含水率(P<0.05);马尾藻粉组幼参灰分含量显著高于对虾组、配合饲料组以及试验初始时幼参的灰分含量(P<0.05);虾料组幼参能值显著高于其余组(P<0.05),马尾藻粉组、螺旋藻粉组幼参能值显著低于其余组(P<0.05)。在幼参总氨基酸(TAA)、必需氨基酸(EAA)、半必需氨基酸(SEAA)和呈味氨基酸(FAA)含量方面,配合饲料组、发酵饲料组和虾料组间均无显著差异(P>0.05),且显著高于马尾藻组和螺旋藻组(P<0.05)。综上所述,投喂配合饲料和发酵饲料的糙海参幼参生长效果最佳,可为糙海参幼参养殖管理以及其饲料研发提供数据支撑。 刘京 刘旭佳 刘旭佳 赖俊翔 赖俊翔 姜发军关键词:饲料 体壁 营养成分 八角茴香水提物调控宿主免疫反应抗石斑鱼虹彩病毒的机制研究 被引量:1 2022年 【目的】从免疫应答角度探析八角茴香(Illicium verum Hook.f.)水提物(IVE)调控宿主免疫反应而发挥抗石斑鱼虹彩病毒(SGIV)的作用机制,为八角茴香应用于石斑鱼健康养殖产业及开发绿色、健康、高效渔用药物提供理论依据。【方法】通过光学显微镜观察及CCK-8细胞活力测定确定IVE的细胞安全工作浓度,利用实时荧光定量PCR检测IVE对宿主细胞干扰素相关基因(IFN、STAT1、PKR、ISG15、KKα、STING和IRF3)表达的影响,并以光学显微镜观察和实时荧光定量PCR分析IVE在细胞水平抗SGIV的效果,通过石斑鱼活体试验进一步验证IVE的抗SGIV效果。【结果】IVE细胞水平的安全工作浓度≤0.50 mg/mL;IVE预处理GS细胞2 h可显著(P<0.05,下同)或极显著(P<0.01,下同)激活干扰素相关基因(IFN、STAT1、PKR、IKKα、IRF3和STING)的表达。SGIV感染GS细胞24和48 h时,经IVE预处理的细胞病变效应(CPEs)明显少于未使用IVE预处理的GS细胞,且细胞内SGIV的MCP基因相对表达量极显著降低,表明IVE可有效抑制SGIV感染;此外,IVE可增强SGIV感染GS细胞中干扰素相关基因的表达,具体表现为IFN、STAT1和IRF3基因在病毒感染后24 h极显著上调,PKR、IKKα、ISG15和STING基因在病毒感染后24和48 h呈显著或极显著上调趋势。在石斑鱼活体试验中,IVE与SGIV混合腹腔注射后石斑鱼脾脏中SGIV的MCP基因相对表达量在病毒感染后24和48 h均极显著低于仅注射SGIV的石斑鱼。【结论】IVE具有抑制SGIV感染的功能,其作用机制可能是通过诱导干扰素相关基因表达而激活宿主的抗病毒状态,从而发挥间接抗SGIV效果;也说明八角茴香在水产疫病防控中具有研发成渔用抗病功能制剂的潜力。 李梦梦 韦红玲 刘明珠 黄帅帅 王太霞 黄琳 李鹏飞关键词:免疫反应 干扰素 香港牡蛎人工苗种池塘生态中期培育效果 2023年 同一批初始壳高(3.90±0.96)mm的香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)分成四份,每份10串,分别放在四个不同的养殖地点,采用浮筏养殖进行中培。每周测量一次稚贝的生长、养殖海水的温度、盐度和饵料密度,分析不同中期培育模式下香港牡蛎稚贝的中间培育效果及其影响因素。结果显示:四个中培地点的水温相近且均呈下降趋势,无显著差异(P>0.05);四个地点盐度由高到低依次为青菜头、亚公山、沙井港和海边池塘,青菜头和亚公山盐度显著高于沙井港和海边池塘(P<0.05),实验期间四个地点盐度均呈上升趋势。池塘饵料密度较高且含量稳定,沙井港饵料密度也较高但波动较大,青菜头和亚公山饵料密度较低。池塘生态中培的牡蛎稚贝生长速度最快,平均壳高增长(16.34±2.56)mm,存活率为93.60%;其次为沙井港、亚公山,青菜头稚贝生长最慢,平均壳高增长(6.23±1.44)mm,存活率为80.68%。池塘生态中培的牡蛎稚贝的生长率显著高于海上间的稚贝(P<0.05),效果最好,盐度和饵料密度显著影响中间培育效果。本研究结果可为香港牡蛎养殖提供理论指导及新的思路。 彭业韶 贾真 胡箫篁 王培 李柱衡 佘智彩 喻达辉关键词:生长率 存活率 环境因子 投喂频率、水温和养殖密度对大口黑鲈生长性能、肠道结构和肝脏生长相关基因表达量的影响 被引量:4 2022年 【目的】于室内循环水养殖系统条件下研究投喂频率、水温和养殖密度对大口黑鲈幼鱼生长性能、肠道结构和肝脏GH和IGF-1基因表达量的影响,确定大口黑鲈的适宜投喂频率、水温和养殖密度。【方法】采用3因素2水平交互设计8个处理(Ⅰ~Ⅷ),养殖8周后,评估大口黑鲈特定生长率、摄食率、饲料系数、存活率等生长性能指标,肠道组织的绒毛高度、绒毛宽度、肌层厚度,以及肝脏生长因子GH和IGF-1基因表达量。【结果】主效应仅养殖密度对摄食率的影响和投喂频率对肥满度的影响达显著水平,而交互效应仅对肥满度有显著影响。单因素方差分析结果显示,处理Ⅴ生长性能显著优于其他处理,其中特定生长率显著高于处理Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ,分别提高10.16%、10.61%、9.27%和8.4%;摄食率显著高于处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ,分别提高10.94%、27.02%、26.45%和17.38%;饲料系数显著低于处理Ⅳ、Ⅶ、Ⅷ,分别降低7.87%、8.89%和8.89%。而处理Ⅰ生长性能与处理Ⅴ相比,仅摄食率显著降低,特定生长率和饲料系数并无显著差异。主效应和交互效应对肠道绒毛高度、绒毛宽度、肌层厚度以及肝脏GH和IGF-1基因表达量的影响均未达显著水平。处理Ⅴ肠道绒毛高度显著高于处理Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ,处理Ⅰ、Ⅴ绒毛宽度均显著高于处理Ⅲ,处理Ⅰ、Ⅲ肌层厚度均厚于处理Ⅶ,其他各处理均无显著差异。处理Ⅰ和Ⅴ的肝脏GH和IGF-1基因表达量高于其他处理。【结论】大口黑鲈最适宜的投喂频率为2~3次/d,水温为25℃,150 L水体养殖25尾。 黄文庆 黄龙 赖明建 李湘妮 陈佳佳 刘凤坤 徐志雄 胡俊茹关键词:大口黑鲈 投喂频率 养殖密度 肠道结构 基因表达 盐度胁迫对香港牡蛎部分生化指标的影响 被引量:9 2019年 为探究盐度胁迫下香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)生化指标的变化规律,了解盐度适应过程中牡蛎的代谢机制,本研究以盐度0、8、16、32、40 为胁迫盐度,以正常海水(盐度24)为对照,开展香港牡蛎对盐度胁迫的响应研究。结果显示,各实验盐度组糖原含量在盐度胁迫0~8 h 内下降,且盐度胁迫幅度越大糖原含量降幅越大,胁迫8 h 后则无明显的变化规律。腺苷酸激活的蛋白激酶(AMPK)、组蛋白/蛋白去乙酰化酶(SIRT1)和Na^+/K^+-ATP 酶活力的变化规律相似:在0~8 h 内,各实验组酶活力均急剧下降(SIRT1 上升);8~48 h 内,酶活力上升;48~120 h 内,酶活力逐渐趋于平稳状态,总体表现为盐度越高,酶活力越强,并与胁迫前有明显差异,且盐度胁迫幅度越高,差异越明显。总抗氧化能力(T-AOC)总体表现出高盐胁迫下随时间的增加而升高,低盐胁迫下随时间的增加而降低,且盐度胁迫幅度越大, T-AOC 活力的变化幅度越大。实验结果初步表明,香港牡蛎糖原含量与渗透压调节存在一定的关系, AMPK、SIRT1、Na^+/K^+-ATP 酶活力及T-AOC 均与渗透压调节密切相关,且在高盐胁迫下随时间的增加而升高,低盐胁迫下随时间的增加而降低。 佘智彩 贾真 彭业韶 喻达辉关键词:盐度胁迫 生化指标 应用型本科高校贝类学实验课程建设与改革探索 2021年 贝类学实验课程是水产养殖一流学科人才培养的主干课程,其内容涵盖贝类基础解剖知识、分类学知识、苗种培育技术、养殖技术等,并且和养殖生产实践结合紧密。在课程建设上,重点关注课程建设目的,结合应用型本科高校人才培养需求,着力打造符合北部湾海洋特色的贝类学实验课程。在教学改革方面,通过优化实验教学内容、创新教学方法、实验材料准备改革、实验考核4个方面提升课程教学效果,为培育水产养殖学科高素质人才提供支撑。 白丽蓉 喻达辉 王培 严雪瑜关键词:课程建设 教学改革 水产动物疾病学教学案例的实践应用 被引量:1 2024年 水产养殖专业实践性较强,涉及的水产动物疾病学课程知识体系繁多。水产动物疾病学课程是一门与生产密切相关的水产养殖本科专业必修主课程,具有极强的理论性和实践性。应用型大学人才培养突出实践能力,在本科水产动物疾病学授课中引入案例教学,提高了该课程的教学质量,增强了学生的问题分析和解决能力。文章基于案例教学在当前应用型大学教学中的重要性,在水产动物疾病学课程中实时开展案例教学,对实施效果以及存在问题进行了讨论。 蔡小辉 彭银辉 彭亚 张虹 杨绍宇 Tan Kianann 宋静静 胥鹏关键词:水产动物疾病学 案例教学 教学改革 无乳链球菌内化素(Internalin)基因克隆和原核表达优化 2021年 内化素(Internalin)作为细菌表面蛋白是细菌侵入上皮细胞、肝细胞等非吞噬细胞并被宿主细胞内化的重要因子。本研究克隆了无乳链球菌Internalin基因(GenBank登录号:MN265365),该基因全长2160 bp,编码719个氨基酸,理论分子量为80.38 kDa,等电点为6.73,没有信号肽和跨膜结构域,定位在细胞膜上。序列分析发现,该蛋白存在1个组氨酸三聚体超家族、1个LRR超家族结构和1个未知功能的DUF超家族。系统进化树分析显示,鱼源无乳链球菌internalin与链球菌属关系最近,聚为一支。SDS-PAGE电泳结果显示,pET-internalin重组蛋白经IPTG诱导后成功表达,分子量约为100 kDa。对影响表达的诱导时间、IPTG浓度、诱导温度进行了优化,表明在28℃、0.4 mmol/L IPTG诱导6 h时,可大量表达pET-internalin可溶性蛋白。经纯化后重组蛋白条带单一,表明纯化效果较佳。该结果可为进一步制备无乳链球菌internalin多克隆抗体和功能研究奠定基础。 王得原 陈泓霖 陈晗雪 李明汝 欧阳媚 罗彩妹 彭银辉 胥鹏 蔡小辉关键词:无乳链球菌 基因克隆 原核表达