复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系
- 作品数：189 被引量：751H指数：13
- 相关作者：尹隽王敬文郑善良陶菊红高山峨更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所华东理工大学生物工程学院华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 谷氨酸产生菌FM84-415菌株的基本特性被引量：1
- 1989年
- 当前,由于原材料普遍涨价,工厂的成本负担加重,味精行业更是如此,都在千方百计地挖掘潜力,来我校联系FM84-415菌株的厂家也日益增多,为了加强交流,特将FM84-415菌的基本情况和特性简介如下。 FM84-415菌株于1985年3月正式通过技术鉴定,几年来已推广应用几十家工厂。
- 郑善良
- 关键词：味精行业产生菌谷氨酸发酵味精厂玉米浆
- 狂犬病病毒研究进展被引量：19
- 2007年
- 胡志鹏钟江
- 关键词：狂犬病病毒急性传染病中枢神经系统温血动物人畜共患病死率
- 氨基酸二肽甜味剂的开发研究进展被引量：20
- 2002年
- 介绍了以氨基酸为原料生产的二肽甜味剂阿斯巴甜、阿力甜和乐甜的研究开发情况 ,并对这三种甜味剂的应用和市场情况作了概述。
- 范长胜
- 关键词：阿斯巴甜阿力甜
- 田鼠巴贝虫候选诊断抗原的表达和评价被引量：1
- 2017年
- 目的克隆、表达田鼠巴贝虫(Babesia microti)候选诊断抗原,评价其潜在的诊断价值。方法目的基因来自本室前期构建的田鼠巴贝虫cDNA文库,分别是Bm2、Bm4、Bm6、Bm9和Bm15,用生物信息学分析软件对编码其ORF的氨基酸序列进行预测和分析。从阳性克隆的p Bluscript重组质粒中PCR扩增目的基因。将扩增产物连接至p ET28a质粒,构建重组质粒并转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞中,用终浓度为1 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行蛋白表达和可溶性分析。对包涵体表达的蛋白,采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒对目的蛋白进行纯化。用田鼠巴贝虫感染小鼠血清和疟疾患者血清对纯化的重组蛋白进行ELISA分析,评价各重组抗原的敏感性和特异性。结果 5个候选抗原Bm2、Bm4、Bm6、Bm9和Bm15基因经PCR扩增,大小分别约为480、300、750、200和700 bp,与理论值相符。构建的重组质粒经测序鉴定与cDNA文库筛选的阳性克隆的ORF序列一致。Bm4、Bm6和Bm15质粒经IPTG诱导,获得包涵体表达,相对分子质量(Mr)分别为13 000、30 000和30 000。但Bm2和Bm9未能表达成功。3个重组蛋白Bm4、Bm6和Bm15纯化后,经SDS-PAGE电泳分析,获得了单一条带的目的重组蛋白。使用田鼠巴贝虫感染小鼠血清和健康小鼠血清对Bm4、Bm6、Bm15和Bm SA1(参照)重组蛋白的ELISA分析结果显示,重组蛋白Bm4、Bm6、Bm15及Bm SA1的敏感性分别为15.0%、55.0%、80.0%、100.0%,特异性分别为100.0%、100.0%、90.0%、100.0%。Bm4、Bm6及Bm15与疟疾患者血清无交叉反应,Bm SA1与疟疾患者血清有一定的交叉反应(假阳性率为13.3%)。结论表达了3个田鼠巴贝虫候选诊断抗原,初步评价发现Bm15抗原对检测田鼠巴贝虫具有良好的敏感性和特异性。
- 刘秀凤孙嘉慧徐斌陈军虎胡薇
- 昆虫细胞中共表达人糖基转移酶对重组蛋白SEAP表达的影响被引量：1
- 2016年
- 杆状病毒-昆虫细胞表达系统有表达量高及蛋白翻译后修饰较完善等特点,但与哺乳动物相比其缺乏几种关键的糖基转移酶.许多研究表明将哺乳动物的糖基转移酶基因转入昆虫细胞中,能使得昆虫细胞表达蛋白的修饰得到有效改善.本研究通过RT-PCR克隆了人Ⅱ型N-乙酰葡萄糖胺转移酶(β-1,2-N-acetylglucosaminyltransferaseⅡ)和Ⅰ型β-1,4-半乳糖基转移酶(β-1,4-galactosyltransferase)基因,并将它们分别插入重组杆状病毒上,获得了表达GnT2和β4GalT1的重组杆状病毒.以具有糖基化修饰位点的人分泌型碱性磷酸酶(Secreted Alkaline Phosphatase,SEAP)为对象,将表达糖基转移酶的重组杆状病毒和表达SEAP的重组杆状病毒共感染细胞,Western blot分析结果表明共感染时所表达的SEAP蛋白条带分子量明显大于其单独表达时的分子量.结果表明重组病毒共感染对杆状病毒-昆虫细胞表达的SEAP有修饰作用.
- 唐巍玲田苗苗黎健蓓钟江
- 关键词：SEAPBAC-TO-BAC
- 乙型肝炎病毒聚合酶基因在重组腺病毒系统中的表达被引量：1
- 2004年
- 乙型肝炎病毒是一种重要的人类病原,乙肝病毒聚合酶在病毒的复制中具有关键作用.拼接了HBV56的聚合酶全长基因,利用重组腺病毒系统,在HEK293细胞中表达乙肝病毒聚合酶.通过一种半定量PCR方法,检测到所表达的蛋白具有逆转录酶活性.这一研究对深入认识该酶结构与功能的关系,研制抑制病毒复制的药物,有一定的意义.
- 杨国尹隽吕佳清钟江
- 关键词：乙型肝炎病毒乙肝病毒HBV病毒复制HEK293细胞
- 行至半山坡更陡认识合成生物学发展的关键节点被引量：1
- 2021年
- "合成生物学"这个名词,自法国化学家Stéphane Leduc (1853—1939)在其1910年出版的《生命与自然发生的物理化学理论》一书中首创(la biologie synthétique)以来,已经有111岁"高龄"了!当然,在其初生之时,化学与生命科学的交叉融合还极为初浅,由此带来了非科学"比拟(metaphor)"的"先天不足",被冷落了将近半个世纪。
- 赵国屏
- 关键词：合成生物学物理化学
- bglS基因的亚克隆及功能分析被引量：1
- 1991年
- 带有枯草杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因(bglS)7.1kb的EcoRI片段,经亚克隆,将1.5kb的EcoR I-Pst I酶切片段插入pUC19的polylinker上,转化E.coli JM101后合成出β-1,3-1,4葡聚糖酶,它能专一性地降解大麦β-1,3-1,4葡聚糖和地衣多糖,酶的大部分(>50%)留在胞内,其中25%分泌到胞外。根据酶特性分析,大肠杆菌中合成的β-1,3-1,4葡聚糖酶完全与出发菌株枯草杆菌相同。
- 陈永青宋大新黄兴奇江红敖万远郑伟军
- 关键词：基因亚克隆功能分析
- 分娩方式影响婴儿皮肤真菌群落组成被引量：1
- 2016年
- 婴儿出生之前生活在无菌的子宫里,出生以后婴儿皮肤第一次暴露在有大量微生物的环境中,形成了初始的皮肤微生物群落.因此分娩方式的选择,决定了婴儿最初接触的微生物源是母亲的阴道还是周围的环境.本研究对6对出生2-4个月的婴儿和他们母亲的皮肤表面6个部位的样品进行3次重复采样（共计189个达标样品）并通过高通量测序来探究不同的分娩方式对婴儿皮肤表面真菌群落组成的影响.研究发现不同分娩方式会造成2-4个月婴儿皮肤真菌群落的显著差异.孕期女性阴道里常见的念珠菌属（Candida）在顺产婴儿皮肤表面的丰度显著高于剖腹产婴儿.而母亲皮肤上最主要的马拉色菌属（Malassezia）在剖腹产婴儿皮肤表面的丰度比顺产婴儿更高.同时还发现剖腹产的母亲与自己孩子的皮肤真菌群落更相似,而顺产的母婴却没有类似的特征.
- 应时谭渊全哲学
- 关键词：分娩方式皮肤真菌高通量测序群落组成
- 合成生物学的科学问题被引量：6
- 2021年
- 合成生物学不仅推动了生物工程应用的革命性发展,也为生命科学基础研究带来了崭新机遇。该文提出了合成生物学目前的核心科学问题,一方面是解答生命功能跨层次涌现的原理,另一方面是基于涌现性原理解决生命系统的理性设计与构建这一瓶颈问题;总结了在合成生物学研究中,当功能涌现原理已知或未知时的不同研究范式,并讨论了合成生物学的定量研究方法,包括基于"定量表征+数理建模"的白箱模型与基于"自动化+人工智能"的黑箱模型。通过结合自上而下的工程研究范式与定量化、理论化的研究方法,定量合成生物学这一新领域将有望推动基础生命科学与合成生物学的双重变革。
- 罗楠赵国屏赵国屏
- 关键词：合成生物学涌现性研究范式
