兰州大学生命科学学院细胞生物学研究所 作品数:87 被引量:682 H指数:15 相关作者: 王崇英 聂秀菀 郑国錩 潘有福 阮美煜 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学生命科学学院 重庆大学生物医学工程联合学院 甘肃农业大学生命科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省自然科学基金 甘肃省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 核科学技术 更多>>
生物技术在白藜芦醇研究中的应用 被引量:15 2008年 介绍了白藜芦醇的化学结构、发现、分布及合成途径等,总结了生物技术(包括酶工程、基因工程和细胞工程)在白藜芦醇研究中的应用,并展望了其应用前景及开发意义. 张真 李胜 刘媛 李婷 马绍英 张青松 杨广兴 吴媛媛 方艳 罗莉媛关键词:白藜芦醇 细胞工程 酶工程 基因工程 芪合酶基因 DNA指纹技术新进展 被引量:22 2001年 DNA指纹技术从原理上可以分为两大类:即传统的以Southern杂交为基础的RFLP技术和以聚合酶链式反应(PCR)为基础的一系列分子标记技术.RFLP需要样品DNA的量较大,对微量被测样品无能为力.至于与PCR相结合的RAPD、AP-PCR和DAF等技术则由于引物相对较短,对实验条件非常敏感,每一轮实验都需要筛选最合适的反应体系,增加了实验周期和复杂度.近几年新出现的AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)、LPRAPD(Long Primer RAPD)和DALP(DirectAmplification of Length Polymorphism)技术弥补了上述不足. 高欢欢 杨军 郭光沁 郑国锠关键词:DNA指纹技术 AFLP RAPD 少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因突变分析及其真核表达载体的构建 被引量:6 2009年 目的克隆少汗型外胚层发育不良症(HED)eda-A1基因并进行突变分析,同时构建eda-A1基因编码序列突变型(M)和野生型(W)的真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步明析eda基因的功能奠定基础。方法设计含有BamHⅠ和HindⅢ的酶切位点的引物,从HED患者和正常人外周血淋巴细胞中提取总mRNA,利用RT-PCR法克隆eda-A1(M/W)基因cDNA序列;并运用BamHⅠ和HindⅢ双酶切pcDNA3.1(-)载体和eda-A1基因片段,将eda-A1(M/W)插入到pcDNA3.1(-)载体中,从而构建新的真核表达载体,命名为pcDNA3.1(-)-eda-A1-M和pcDNA3.1(-)-eda-A1-W。结果成功克隆少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因,并发现未见报道过的907位A→C错义突变,导致306位编码氨基酸由谷氨酰胺变异为脯氨酸;经PCR法、重组载体双酶切法、DNA测序验证,成功构建了pcDNA3.1(-)-eda-A1-W/M的真核表达载体。结论成功构建少汗型外胚层发育不良症eda-A1基因(突变型和野生型)真核表达载体pcDNA3.1(-)-eda-A1-M/W,为进一步研究该基因在牙齿发育中的生物学作用奠定了实验基础。 雷科 车团结 王锦明 邓旎 张琳 何祥一关键词:突变 真核表达载体 拟南芥新基因Athspr表达及耐逆功能的初步研究 张亮 许声涛 王丽艳 李莎 汪冉冉 李孝影 王新宇 王崇英关键词:拟南芥 逆境胁迫 黑麦小孢子母细胞形成和发育过程中细胞胼胝质壁合成的变化 被引量:6 2001年 结合戊二醛—锇酸固定 ,环氧树脂包埋 ,苯胺蓝 - DAPI染色和荧光显微镜观察 ,研究了黑麦小孢子母细胞的发育过程及其细胞胼胝质壁合成的变化。结果发现 ,黑麦花药中胼胝质的合成最早出现在造孢细胞晚期 ,并首先在小孢子囊中央的造孢细胞中沉积 ,随后向小孢子囊两端的细胞扩展。随着花药的发育 ,胼胝质在小孢子囊中央的造孢细胞中大量积累并解体 ,而且 ,小孢子囊中央的细胞与邻近绒毡层排列的造孢细胞分离并逐渐消失 ,紧靠绒毡层排列的造孢细胞最后转变成花粉母细胞 ,经减数分裂 ,形成小孢子。 李兆勇 王亚男 王新宇关键词:黑麦 小孢子母细胞 胼胝质 植物 细胞壁 洋葱雄性不育系花药在花粉母细胞时期的败育与自噬现象紧密相关 自噬(Autophagy,)是真核细胞在正常发育、衰老或遭受饥饿、生物、非生物胁迫过程中对自身细胞质组分进行降解—再利用的过程,对维持细胞的正常活动至关重要.本课题组此前在研究油菜雄性不育(MS)系时发现,所研究的MS系... 连高山 王新宇关键词:花药败育 自噬 花粉母细胞 自噬体 烟曲霉素生物素标记衍生物的合成及体外测试 2010年 为了深入研究烟曲霉素及其衍生物的作用机理,合成了烟曲霉素的生物素标记衍生物6。化合物6是以辛二胺为连接臂通过酰胺键和氨基甲酸酯键把烟曲霉素的衍生物Fumagillol(compound 2)和生物素连接而成,各中间体和目标化合物均经~1HNMR、^(13)C NMR、MS表征,结构正确。体外活性测试结果表明目标化合物6可以高效的并且细胞选择性的抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖。体外受体结合实验证明化合物6与人甲硫氨酸氨肽酶-2(MetAP2)有很高的亲和力。 刘芳 万军庭 陈少鹏 陆鑫 王新宇 周国春关键词:抗血管生成 白假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖的诱导作用 被引量:2 2011年 目的研究白假丝酵母菌(S.albicans)对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法体外培养ECV304,实验分为S.albicans上清液组、S.albicans灭活菌液组、上清液和灭活菌液混合组、对照组。采用MTT法、细胞计数法、倒置显微镜及流式细胞术分别观察各组对ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。结果在不同浓度、不同时间的培养条件下,4倍稀释的S.albicans上清液在培养48 h能显著促进细胞增殖;倒置显微镜观察发现4倍稀释的S.albicans上清液实验组细胞密度明显增高;上清液和灭活菌液分别作用细胞40h后,上清液组细胞S期、G2/M期所占百分比显著升高,增殖指数(PI)增高,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05)。而灭活菌液组的PI值无显著性差异(P>0.05)。结论 S.albicans的代谢产物可引起ECV304细胞的增殖。 张琳 车团结 史晓艳 何祥一关键词:白假丝酵母菌 增殖 代谢产物 细胞周期 拟南芥Athspr新基因的耐盐功能分析 张亮 杨涛 汪冉冉 李孝影 郝红艳 孙英莉 王新宇 王崇英关键词:拟南芥 耐盐性 用SSH方法构建BTCC患者尿脱落细胞差异表达基因的cDNA消减文库 被引量:1 2008年 目的:应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建膀胱移行细胞癌(BTCC)患者与正常人尿脱落细胞差异表达基因cDNA消减文库。方法:分别从BTCC患者与正常人尿液中提取总mRNA,用SMART技术反转录成cDNA,经过HaeⅢ酶切后将BTCC尿脱落细胞cDNA分为两组并接上接头,再与过量正常膀胱尿脱落细胞cD-NA进行两轮消减杂交及两轮抑制性聚合酶链反应(PCR),使得差异表达的DNA片段得以富集。PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌JM109构建成差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后,随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。结果:PCR鉴定有317个克隆载有主要在200~900bp之间呈随机分布的插入片段,片段插入率达82.6%,证实建库成功。对20个质粒测序结果经同源性比对分析,其中20个片段源于17个已知基因,1个克隆在GenBank中未检索到与其有相似性的基因序列,表明它们可能为BTCC差异表达的新基因。结论:该消减杂交文库质量可靠,其成功构建为进一步筛选、克隆BTCC差异表达基因提供了依据。 郭柏鸿 车团结 张冲 李琳 史葆光 王建伟 陈一戎关键词:膀胱移行细胞癌 基因差异表达 抑制性消减杂交