杭州宝晶生物股份有限公司 作品数:21 被引量:19 H指数:2 相关机构: 浙江大学 宁波荣智自动化科技有限公司 浙江省食品药品检验研究院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 化学工程 医药卫生 生物学 更多>>
一种苹果酸转运蛋白突变体及其应用 本发明提供了一种苹果酸转运蛋白突变体、表达该突变体的基因工程菌及其应用。 刘龙 张建国 陈坚 张天敏 吕雪芹 谢志鹏 刘延峰 孙利 陶荣哨一种鞘氨醇杆菌及其在催化合成L(+)-酒石酸或其盐中的应用及方法 本发明公开了一种鞘氨醇杆菌及其在催化合成L(+)‑酒石酸或其盐中的应用及方法。所述鞘氨醇杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.18074,命名为:鞘氨醇杆菌BK99。本发明鞘氨醇... 黄美娟 谢志鹏 潘海峰 孙伟荣 张建国现代菌种鉴定技术在药品控制菌检查中的比较 被引量:9 2015年 目的探索药品控制菌检查中适合的菌种鉴定方法。方法采用VITEK 2 Compact全自动微生物生化鉴定系统和3500 Micro Seq全自动微生物基因分型鉴定系统,对控制菌检查中常见的32株菌进行生化反应鉴定和16S r DNA测序鉴定,并对鉴定结果为沙门菌的菌株进行血清分型。结果 2种方法鉴定结果基本一致,部分菌株生化反应鉴定只能至属,而16S r DNA测序可以鉴定至种甚至亚种水平,沙门菌的分型需采用血清学鉴定。结论药品控制菌检查可结合16S r DNA测序和生化鉴定,选择不同控制菌适合的鉴定方法。 郑小玲 杨丹燕 李珏 王知坚关键词:菌种鉴定 控制菌检查 生化鉴定 韩国假单胞菌及其制备内消旋酒石酸或其盐的方法 本发明提供一种韩国假单胞菌BK-9,具有如SEQIDNO:1所示的16SrDNA序列,命名为韩国假单胞菌Pseudomonaskoreensis,已保藏于CGMCC,保藏登记号为CGMCCNo.8395。本发明提供的一种... 张建国 谢志鹏 张振红 潘海峰 鲍文娜文献传递 工业用 DL-酒石酸 出芽短梗霉产聚苹果酸发酵条件的优化 被引量:5 2018年 【背景】出芽短梗霉可发酵葡萄糖生成聚苹果酸,但存在转化率和转化效率低等瓶颈,阻碍其实现商业化生产。【目的】通过优化发酵培养条件,提高出芽短梗霉的聚苹果酸产量、糖酸转化率和生产强度。【方法】采用单因素试验优化适宜出芽短梗霉BK-10菌株产生聚苹果酸的培养条件,通过Plackett-Burman法对培养基组分筛选显著性影响因素,并对其培养基中无机盐进行正交试验优化,最后进行5 L发酵罐验证。【结果】最优培养基配方和培养条件:100 g/L葡萄糖,1.5 g/L尿素,0.20 g/L KH_2PO_4,0.20 g/L ZnSO_4,0.05 g/L MgSO_4,0.75 g/L KCl,30 g/L CaCO_3,0.01%吐温-80,发酵温度26°C,250 mL摇瓶装液量50 mL。【结论】通过优化,聚苹果酸的糖酸转化率达到0.71 g/g,生产强度达到0.89 g/(L·h),较优化前分别提高了18.33%和71.15%,为发酵葡萄糖合成聚苹果酸进而生产L-苹果酸工艺的工业化生产奠定经济性基础。 陈曦 鲍文娜 黄美娟 李怡辉 潘海峰 谢志鹏 张建国关键词:出芽短梗霉 聚苹果酸 发酵条件 食品添加剂 L(+)-酒石酸 一种双头菌及其生产L(+)-酒石酸或其盐的方法 本发明提供一种双头菌(<i>Labrys</i><i></i>sp.BK-8),该菌株的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物... 张建国 鲍文娜 潘海峰 谢志鹏 张振红文献传递 一种双头菌及其生产L(+)-酒石酸或其盐的方法 本发明提供一种双头菌(Labryssp.BK-8),该菌株的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCCNo.7396,命名为:双头菌(Labryssp.)BK... 张建国 鲍文娜 潘海峰 谢志鹏 张振红文献传递 定向进化和半理性设计改造顺式环氧琥珀酸水解酶 被引量:1 2023年 【背景】D(-)-酒石酸是非天然有机酸,在保健品、食品和肿瘤药物合成等行业具有重大应用潜力,目前主要通过生物转化法生产,即顺式环氧琥珀酸水解酶[cis-epoxysuccinic acid hydrolase,CESH(D)]水解顺式环氧琥珀酸(cis-epoxysuccinic acid,ESH)生成D(-)-酒石酸。该法简单温和,但存在CESH(D)酶活转化效率低下的瓶颈问题。【目的】通过基因工程改造,提高CESH(D)的酶活力、温度和pH稳定性。【方法】利用定向进化和半理性设计体外改造CESH(D),高通量筛选出正向突变体;然后对其进行酶学性质研究,包括比酶活、温度和pH对酶催化效率的影响、酶的温度稳定性、pH稳定性及酶促动力学分析;最后通过分子对接等手段分析突变位点影响催化活性的初步机制。【结果】筛选获得4个正向突变体L231P/N226S、V77I、D183E和T223S。与野生型相比,4个突变体的比酶活分别提高2.2、1.6、1.5和1.4倍。其中,L231P/N226S的温度稳定性和pH稳定性较野生型均有显著提高,55℃时催化活性为野生型的1.6倍,pH 6.0时催化活性为野生型的1.2倍。动力学分析发现,突变体L231P/N226S和T223S对底物ESH的亲和力有明显提升,Km值分别为20 mmol/L和21 mmol/L,较野生型分别降低18%和16%。分子对接研究表明,突变位点主要通过改变底物结合口袋促进酶与底物的相互作用,从而影响酶活。【结论】获得了温度和pH稳定性好、催化活性明显提高的CESH(D)突变体,初步分析突变位点影响酶活的机制,为进一步研究CESH(D)的结构-功能关系及深入改造提供指导。 王国桧 谢志鹏 张建国关键词:顺式环氧琥珀酸水解酶 定向进化