重庆三杰众鑫生物工程有限公司
- 作品数：44 被引量：57H指数：4
- 相关机构：西南大学贵州省动物疫病预防控制中心上海海关更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项贵州省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学金属学及工艺更多>>
- 鸭呼肠孤病毒及其抗原抗体复合物的制备方法和应用
- 本发明提供了一种鸭呼肠孤病毒SL株，保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:V201970，以解决现有技术中的中兽药对鸭呼肠孤病毒的预防、治疗无明显效果的技术问题。鸭呼肠孤病毒抗原抗体复合物的使...
- 张立武魏思远赵光伟杨晓伟
- 文献传递
- 1株新型鸭呼肠孤病毒(SL株)的全基因组测定分析及其致病性被引量：2
- 2022年
- 为明确我国川渝地区鸭疑似呼肠孤病毒病的致病原,本试验对患病鸭进行病毒的分离、鉴定、全基因组测序分析及致病性试验。首先针对临床肝脾肿大、出血坏死为主要特征的病例,利用鸭胚传代法进行病毒的分离,结合RT-PCR方法鉴定分离毒株;其次利用二代测序技术对分离毒株进行全基因组测序,利用MEGA X软件对序列进行比对和分析;最后将分离毒接种7日龄健康雏鸭,观察其病死率及肝脏、脾脏组织的病理变化。结果发现F6代病毒能够稳定适应鸭胚,RT-PCR鉴定为呼肠孤病毒,对鸭胚的半数致死量(ELD50)为10-5.32/0.2 mL,分离毒命名为SL株。全基因测序显示该毒株全长23580 bp,GC含量49.62%,共分10个节段,分别为L1~L3、M1~M3和S1~S4(GenBank登录号:MW196679~MW196688)。序列分析显示SL株与新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)具有较高的相似性,为87.02%~99.48%;与番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的相似性次之,为80.09%~98.77%;而与鸡源呼肠孤病毒(ARV)相似度最低,为70.04%~91.15%。系统进化树显示SL株10个基因片段均与NDRV位于同一分支,与GX-Y7和XT182个NDRV毒株具有较近的亲缘关系,说明SL株为一新型呼肠孤病毒。同时发现SL毒株中M1片段和L1片段与MDRV也具有较高的进化地位,推测SL株或许存在MDRV和NDRV基因重组现象。致病性试验显示SL株能导致雏鸭死亡,肝脏、脾脏出血肿胀,与临床表现一致。病理组织学观察发现肝细胞以出血、肿胀和空泡变性为主而脾脏以白髓萎缩、淋巴细胞坏死和出现血栓等为特征病变。本试验结果为鸭呼肠孤病毒病的防控及其特异性生物制品的研发提供技术参考。
- 杨晓伟陆婧王凯民庄鸿琨田宇森李俊锋朱盈名刘霞张立武赵光伟
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒全基因组测序系统进化树
- 肉鸭细小病毒灭活疫苗
- 本发明公开了一种肉鸭细小病毒灭活疫苗，涉及疫苗领域，主要包括种毒、抗原制备、抗原的鉴定、灭活疫苗制备和疫苗检验，收集完成抗原之后，进行抗鸭细小病毒特异性血清制备，对抗原进行无菌和病毒含量检测，无菌检验合格，以实现对鸭细小...
- 魏思远赵光伟
- 文献传递
- 一种卵黄抗体卵黄干燥设备
- 本实用新型涉及干燥技术领域，具体涉及一种卵黄抗体卵黄干燥设备，包括箱体和干燥组件，干燥组件包括多个加热管、两个滑轨、托盘、平移部、升降部、安装板和多个搅动杆；将放置有卵黄抗体卵黄的托盘滑入两个滑轨之间，两个滑轨对托盘进行...
- 张立武魏思远赵光伟邵骜骏杨晓伟
- 一例鹅痛风病的诊断被引量：13
- 2019年
- 为了探究河南省某鹅场患病鹅的发病原因,采集患病雏鹅病料进行小鹅瘟病毒和鹅星状病毒的PCR检测,通过序列的测定与比对,发现发病鹅为星状病毒感染,并未检测到小鹅瘟病毒,结合临床剖检病理变化,最终确诊导致痛风病的病原为鹅星状病毒。
- 邵骜骏李阁张思旺赵光伟周宇何洪章何信群李来旭张立武
- 关键词：痛风小鹅瘟PCR
- 一种规模化的卵黄抗体提取方法
- 本发明公开了一种规模化的卵黄抗体提取方法，包括如下步骤：将高免鸡蛋消毒后进行卵黄分离；将分离的卵黄搅拌成糊状后加入注射用水，卵黄与注射水的体积比为1：1.5‑1：3；再将卵黄液体的PH值调整为5.0‑5.2；再加入浓度为...
- 赵光伟
- 文献传递
- DHAV-33D蛋白单克隆抗体制备及其DAS-ELISA检测方法的建立
- 2024年
- 为实现鸭甲型肝炎病毒3型(DHAV-3)的快速检测,本试验首先对DHAV-3的非结构蛋白3D进行原核表达,纯化后免疫BALB/c小鼠,四免后取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合制备单克隆抗体,进而利用单克隆抗体建立双抗夹心ELISA(DAS-ELISA)检测方法,评估其灵敏性、特异性和重复性,最后将所建方法应用于临床样本的检测,并与RT-PCR方法进行符合性验证。结果显示:DHAV-33D蛋白在BL21(DE3)中高效表达,经Western blot验证,纯化后的蛋白其特异性良好;细胞融合后经3次亚克隆,成功筛选到6株杂交瘤细胞,分别命名为1A3、1B6、1C7、1D9、2A1和3A9,抗体亚型鉴定结果显示1A3为IgG2b,1B6为IgG2a,3A9为IgG3,1C7、1D9和2A1均为IgG1;经筛选,将1B6和1A3两株亲和性高的单抗分别作为捕获抗体与检测抗体,建立DAS-ELISA检测方法,优化反应条件后确定捕获抗体1B6最佳包被质量浓度为1×10^(-3) g/L,检测抗体1A3的最佳稀释度为1∶1000,阴阳临界值(cut-off)为0.256;灵敏性试验显示该方法对3D蛋白的最低检测限度为4.0×10^(-4) g/L;重复性试验显示,该方法批内、批间变异系数(Cv)均小于9%,重复性好;特异性试验显示,该方法对鸭腺病毒(DAdV)、番鸭细小病毒(MDPV)、鸭圆环病毒(DuCV)、鸭瘟病毒(DPV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、鸭疫里默氏杆菌(RA)病原无特异性反应,但与鸭甲型肝炎病毒1型(DHAV-1)具有交叉反应,可以同时检测出DHAV-3与DHAV-1病原;应用该试验建立的DASELISA方法与RT-PCR检测方法同时对186份临床样本进行检测,DAS-ELISA方法可同时识别DHAV-1和DHAV-3,且与RT-PCR检测方法的符合率为98.9%。结果表明,本试验建立的DAS-ELISA方法重复性好、灵敏性高,可用于DHAV-1与DHAV-3的诊断,为我国鸭甲型肝炎的流行病学调查及防控提供了技术支撑。
- 冯旭东伍琳楠陈天泽赵梦茹刘言言周学慧杨晓伟郁蕾张立武赵光伟
- 关键词：单克隆抗体DAS-ELISA
- 治疗关节炎的中药组合物、药酒以及药酒的制备方法
- 本发明公开了治疗关节炎的中药组合物、药酒以及药酒的制备方法，其中，中药组合物的原料由以下组分组成：杜仲10‑25份、补骨脂10‑25份、骨碎补20‑35份、血竭10‑25份、当归10‑25份、川芎10‑30份、秦艽15‑...
- 张立武魏思远
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌与PCV3混合感染的实验室诊断及分析被引量：3
- 2022年
- 为确定重庆市某患病猪场的致病原并探究其生物学特性及分子进化特性,首先利用PCR方法对组织病料进行检测,结果发现副猪嗜血杆菌(Hps)和圆环病毒3型(PCV3)两种病原场为阳性。然后进行细菌分离,通过形态、培养特征和16S rDNA测序对分离菌株进行鉴定,并分析其血清型、药物敏感性、耐药基因以及生长曲线等主要生物学特性。经鉴定确定致病菌株为Hps血清5型,分离菌株对头孢他啶、苯唑西林、新霉素、卡那霉素、氯霉素、米诺环素、多黏菌素B和四环素表现为耐药,共检测到9种耐药基因;对PCV3通过分段扩增、拼接获得完整的基因组序列,通过生物学软件分析其基因结构以及基因型,经测序分析发现PCV3基因组全长2 000 bp,GC含量为50.45%,基因型为PCV3a,与广西MH823221株和美国最早报道的KT869077株具有较高的亲缘关系。本研究确定了患病猪的致病原及其主要生物学特性及分子进化特性,为临床有效防控Hps和PCV3混合感染提供了依据。
- 赵自亮田宇森庄鸿琨李婕朱桓奕刘霞杨晓伟张立武赵光伟
- 关键词：副猪嗜血杆菌生物学特性
- 鸡包涵体肝炎的卵黄抗体及其制备方法
- 本发明提出了鸡包涵体肝炎的卵黄抗体及其制备方法，卵黄抗体为含有鸡包涵体肝炎病毒株，所述病毒为禽腺病毒I群血清4型病毒，命名为SDJ15‑8，其保藏号为CCTCC NO:V201636，保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心...
- 魏思远
- 文献传递
