南京农业大学生命科学学院生物化学与分子生物学系
- 作品数：35 被引量：236H指数：10
- 相关作者：杨志敏孙新陈海燕姜炜王猷生更多>>
- 相关机构：宜春学院生命科学与资源环境学院常熟高等专科学校生化系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目江苏省基础研究计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学文化科学医药卫生更多>>
- 水稻根尖质膜蛋白质组学研究方法的建立被引量：8
- 2008年
- 以徐稻3号水稻苗期幼嫩根尖为材料，利用葡聚糖／聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90％的质膜组分，使用优化的双向电泳水化液溶解质膜蛋白，通过等电聚焦／十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳（IEF／SDS-PAGE）分离和基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱（MAI-DI—TOF／TOF）分析，鉴定了31个水稻质膜相关蛋白。结果表明IEF／SDSPAGE双向电泳适合分离亲水性相对较高的膜附着蛋白。进一步利用高盐和温和去污剂对纯化的质膜进行洗涤，以降低质膜组分的复杂程度，通过SDS-PAGE单向电泳分离和液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）分析，鉴定了8个质膜蛋白。经洗涤后的质膜组分复杂度显著降低，SDS-PAGE中的蛋白条带只包含1～2种蛋白，且主要为疏水性较强的穿膜蛋白，说明多种生物化学分离方法及不同质谱分析的综合运用，是解决生物膜蛋白质组学难点的有效途径。
- 齐耀程王宁程彦伟徐朗莱张炜
- 关键词：水稻质膜蛋白质组学
- 植物的硫同化及其相关酶活性在镉胁迫下的调节被引量：29
- 2006年
- 植物对土壤中硫的利用包括根系对硫酸盐的吸收、转运、同化、分配等过程,也是由一系列酶和蛋白质参与和调节的代谢过程。近年来的研究表明,在植物体内,硫同化与植物对镉等重金属元素的胁迫反应机制有着密切关系。镉胁迫能调节植物对硫酸盐的吸收、转运、同化,以及半胱氨酸、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和植物螯合肽(phytochelatins,PC)的合成。植物在镉胁迫下通过多种调节机制,增强对硫酸盐的吸收和还原,迅速合成半胱氨酸和谷胱甘肽等代谢物,从而合成足够的PC,以满足植物生理的需要。
- 孙雪梅杨志敏
- 关键词：植物螯合肽镉胁迫
- 盐胁迫及La^(3+)对不同耐盐性水稻根中抗氧化酶及质膜H^+-ATPase的影响被引量：35
- 2007年
- 用盐敏感的武运粳8号和强耐盐的韭菜青两个粳稻品种,比较了盐胁迫条件下根中抗氧化酶类和质膜H+-ATPase活性的变化以及La3+对其变化的影响。结果表明,两个品种根中SOD和APX活性无显著区别,但耐盐品种的CAT和POD活性强于盐敏感品种。盐胁迫不同程度地提高了两者抗氧化酶活性。La3+对其影响最显著的差异出现在高盐条件下(200~300mmolL-1NaCl),对耐盐品种添加La3+可以提高上述4种酶的活力,而对盐敏感品种,La3+的作用不明显。对盐敏感品种,盐胁迫导致其质膜H+-ATPase活性持续下降,添加La3+明显提高其H+-ATPase活性,而对耐盐品种,盐胁迫导致其质膜H+-ATPase活性呈现先降后升的趋势,La3+对其活性影响不大。进一步分析表明,上述H+-ATPase活性变化及La3+对其影响均发生在转录水平上。据此推测,以上2个品种可能具有完全不同的盐胁迫响应机制。
- 陈海燕崔香菊陈熙李建友张炜
- 关键词：水稻盐胁迫抗氧化酶质膜H^+-ATPASE
- 水稻根质膜蛋白质组双向电泳水化液的优化被引量：2
- 2007年
- 以水稻(Oryza sativa L.)苗期幼嫩根尖作为材料,利用葡聚糖-聚乙二醇两相分配法纯化得到纯度达90%的质膜组分,使用4种不同的水化液溶解质膜蛋白,进行IEF/SDS-PAGE双向电泳和MALDI-TOF/TOF质谱分析.结果显示,4种水化液中,以7 mol/L Urea2、mol/L Thiourea、4%CHAPS、20 mmol/L DTE、1%ASB14的条件对膜蛋白的溶解效果和双向电泳分离效果最好;16个被鉴定蛋白中有9个为质膜相关蛋白,5个为未知蛋白,来自其它细胞器的蛋白仅有2个.研究表明,在常用水化液中添加磺基甘氨酸三甲内盐ASB14有利于植物细胞质膜蛋白质组的分析,并且该优化条件下的双向电泳适合分离水稻质膜中亲水性相对较高的膜附着蛋白.
- 王宁齐耀程徐朗莱张炜
- 关键词：水稻质膜双向电泳蛋白质组学去污剂
- 马铃薯花色苷研究进展被引量：12
- 2007年
- 综述了马铃薯花色苷的分布、种类、结构、提取纯化方法、生理功能和应用等方面的研究进展,并介绍了块茎在发育和储藏期间花色苷的变化及光、温等外界因素对马铃薯块茎颜色的影响。
- 卢其能杨清
- 关键词：花色苷马铃薯天然色素
- 中度噬盐菌Bacillus sp.Ⅰ121的质膜蛋白质组学分析被引量：1
- 2010年
- 膜蛋白是连接细胞与外界环境的重要载体,发挥着物质转运、信号传导等作用。通过对一种新分离出来的中度噬盐菌Bacillussp.Ⅰ121进行了质膜蛋白质组学分析,盐胁迫下该菌株主要靠积累脯氨酸来维持细胞渗透压。在对Bacillussp.Ⅰ121在不同盐浓度下的生长情况进行测定的基础上,我们选取了1%,5%,10%,15%(w/v)NaCl4个盐浓度进行细胞培养,并分别提取细菌的质膜,通过5%～20%的梯度凝胶SDS-PAGE电泳将疏水的膜蛋白进行分离,随后对盐胁迫响应的8条不同的蛋白条带进行了ESI-LC-MS/MS质谱分析。将所得结果在NCBI数据库中进行比对,最终成功鉴定出10种蛋白。这些蛋白涉及物质跨膜转运,膜的生物合成以及胁迫信号转导等功能。为膜蛋白在盐胁迫响应过程中的作用方面的研究开辟了新思路。
- 姜炜李亮张炜
- 关键词：盐胁迫膜蛋白蛋白质组学
- 马铃薯花色苷的遗传特性及其分子生物学研究状况被引量：1
- 2007年
- 阐述了马铃薯色素的早期遗传研究、色素遗传理论、色素遗传基因的生化解释、花色苷相关基因的定位和分子标记,介绍了马铃薯花色苷的分子生物学与基因工程研究状况。
- 卢其能杨清江辉
- 关键词：花色苷马铃薯基因
- 盐胁迫诱导水稻根尖细胞程序性死亡过程中线粒体蛋白质组分析(英文)
- 陈熙王莹李建友姜爱良程彦伟张炜
- 马铃薯3GT基因转化拟南芥引起花色苷大量积累被引量：2
- 2009年
- 为了验证马铃薯野生种3GT(UDP-glucose:flavonoid 3-0-glucosyltransferase,类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶)基因的功能,构建了携带CaMV35S启动子的表达载体pG3GT并转化农杆菌GV3101。用菌液浸泡花序法对拟南芥进行遗传转化,在含50mg/LKan的培养基上对T0代种子进行筛选,先后得到4个阳性幼苗,转化率为0.13%。对移栽成活的3株抗性植株进行PCR检测为阳性,Southern blot分析有2株表现为阳性并为单拷贝整合,其中一株的叶片和茎杆颜色变成紫红色;经花色苷含量的测定表明其含量比野生型植株高出7.01倍。
- 卢其能杨清沈春修
- 关键词：马铃薯
- 甘蓝型油菜中镉响应金属转运蛋白基因的注释和鉴定
- 在本研究中，使用生物信息学和高通量测序鉴定了甘蓝型油菜基因组的金属转运蛋白基因;分类、命名;对RNA测序(RNA-seq)库进行分析，筛选出甘蓝型油菜的金属转运蛋白基因，重点对差异表达基因进行分析;通过qRT-PCR验证...
- 张鲜朵杨志敏
- 关键词：甘蓝型油菜镉转录组
