浙江大学化学工程与生物工程学系生物工程研究所
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 相关作者：穆江华李丽更多>>
- 相关机构：江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学理学更多>>
- 丙酸梭菌静息细胞法生物合成丙烯酸被引量：1
- 2012年
- 介绍了丙烯酸生物合成的途径并比较了以不同起始物生物合成丙烯酸的特点。建立了以丙酸为底物的静息细胞生物合成丙烯酸的方法,并优化了生物转化工艺参数,其最优值分别为pH8.5、温度42℃、底物浓度250 mmol/,L、电子受体亚甲基蓝浓度0.2%～0.3%、促进剂L-丙氨酸浓度为20 mmol/L、Zn^(2+)离子浓度为1 mmol/L。通过紫外和硫酸二乙酯复合诱变筛选到一株能耐受丙烯酸浓度为40 mmol/L的突变株,以其静息细胞转化丙酸能获得25.2 mmol/L丙烯酸。
- 罗玮黄磊蔡谨徐志南岑沛霖
- 关键词：丙烯酸生物合成
- 5-氨基乙酰丙酸产生菌的代谢工程改造和放大生产
- 本文从代谢工程的角度出发对ALA生物合成中的关键途径进行调节，为实现ALA的高效生产奠定基础。利用溶源化试剂盒对大肠杆菌MG1655进行改造获得MG1655(DE3)。经研究发现：sdhAB敲除的工程菌使得琥珀酸等前体物...
- 傅维琦林建平岑沛霖
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸发酵法生物合成代谢工程
- 固定化NAD+-依赖型的醇脱氢酶和甲酸脱氢酶耦联体系生产(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
- 本文从Rhodococcus erythropolis DSM 43297(ATCC 17896)克隆ADH基因(1047bp )，用LA Taq聚合酶PCR扩增，直接与T载体pMD 19-T Simple Vector...
- 李丽林建平傅维琦岑沛霖
- 关键词：合成工艺脱氢酶耦联体系
- 反应萃取法从重组大肠杆菌发酵液中分离5-氨基乙酰丙酸
- 本文主要探讨了利用反应萃取法从重组大肠杆菌发酵液中提取5-氨基乙酰丙酸的新工艺。选择磷酸二(2-乙基己基)酯(D2EHPA)为萃取剂、正己醇为稀释剂从发酵液中萃取ALA，研究了D2EHPA浓度、初始水相pH,萃取温度、相...
- 张露露林建平傅维琦岑沛霖
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸大肠杆菌发酵液
- NAD+/NADH循环再生型双重组菌耦合体系的初步研究
- 构建具备NAD+/NADh再生能力的双重组菌耦合体系(表达甲酸脱氢酶的E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-fdh和表达醇脱氢酶的E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-adh),分...
- 李丽林建平周小艳傅维琦岑沛霖
- 关键词：甲酸脱氢酶醇脱氢酶分离纯化
- 文献传递
- 蛋白质在膨胀床吸附层析剂的静态和动态吸附性能被引量：4
- 2001年
- 以牛血清白蛋白 (BSA)为目标蛋白 ,考察膨胀床用离子交换树脂StreamlineDEAE的静态和动态吸附性能 ,并和离子交换树脂DEAESepharoseFF进行比较 ,实验发现两者的静态吸附性能相似 ,而动态吸附性能差别较大。根据动态吸附数据计算出液膜扩散系数和孔内扩散系数。
- 胡洪波姚善泾朱自强
- 关键词：蛋白质膨胀床离子交换牛血清白蛋白
- 过量表达自身hemA基因的重组大肠杆菌发酵生产5-氨基乙酰丙酸的研究被引量：6
- 2005年
- 研究了优化重组大肠杆菌产5-氨基乙酰丙酸(ALA)的条件,提高大肠杆菌发酵生产ALA的产量。在测定重组大肠杆菌GT48的生长曲线的基础上,确定诱导时间,优化摇瓶发酵条件。然后,进一步在5 L发酵罐上进行间歇和流加发酵研究。摇瓶实验表明,细胞培养最佳初始pH为6.5,最佳诱导时间为稳定期前期,最佳接种量为2%,过高的葡萄糖浓度对细胞生长和产物合成均有一定的抑制作用。在5 L发酵罐间歇发酵中,重组菌产ALA能力达到47.8 mg/L。采用流加发酵可以进一步将产物产量提高到63.8 mg/L。构建的过量表达自身的hemA基因的大肠杆菌具有较高的产ALA能力,通过发酵条件优化和采用流加发酵可以提高ALA产量。
- 赵春晖林建平刘晓侠穆江华岑沛霖
- 关键词：5-氨基乙酰丙酸重组大肠杆菌发酵
- 羧酸酯酶BioH的克隆表达及其水解活性的定向进化
- 2013年
- 通过分子克隆手段获得大肠杆菌来源的羧酸酯酶BioH，采用定向进化的方法提高该酶的水解活性以提升其应用价值．通过PCR扩增，从大肠杆菌K12菌株中克隆得到羧酸酯酶BioH基因，目的基因长度为771bp，含256个氨基酸；将其连接到pET30a（＋）质粒上并转入BL21（DE3）宿主细胞中，经诱导表达得到所需的目的蛋白，该蛋白分子质量约为28．2ku．野生型的BioH水解对硝基苯丁酸酯（P—NPB）的活性为18U／mg，且该酶具有良好的热稳定性．以PNPB为底物进行高通量筛选，其水解底物为对硝基苯酚（PNP），在405nm处有最大吸收峰．挑选出水解活性提高的突变体，并通过2轮定向进化过程，成功筛选到7个水解活性提高的优良突变体，它们的活性分别提高了20％～100％．结构分析表明，突变体的突变位点均分布在远离活性中心的位置．
- 徐红娜于洪巍
- 关键词：克隆定向进化水解活性
- 以葡萄糖为原料直接发酵生产γ-聚谷氨酸的研究
- γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是一种可以通过微生物合成的均聚谷氨酸高分子化合物,在食品、医药、水处理和农业中有广泛的应用前景。为了避免在γ-聚谷氨酸的发酵生产中加入L-谷氨酸,本文探讨将谷氨酸的发酵生产与谷氨酸聚合相耦联,实...
- 张慧莉张绪石峰徐志南岑沛霖
- 关键词：Γ-聚谷氨酸原生质体融合葡萄糖直接发酵
- 文献传递
- 丙酮丁醇梭菌对单糖和混合糖的利用
- 本实验对丙丁菌利用六碳糖、五碳糖和纤维二糖的情况进行了研究;通过添加碳酸钙或NaOH,调节产溶剂期pH,提高了丙丁菌对木糖的利用率(由11.2 g/L 增加到27.9 g/L);并通过改变混合糖(葡萄糖、木糖)的比例,同...
- 姜薇林建平闻志强林逸君
- 关键词：丙酮丁醇梭菌木糖PH控制
- 文献传递
