第四军医大学药学系全军基因诊断技术应用研究所
- 作品数：235 被引量：843H指数：14
- 相关作者：阎小君张文红段杰王琰冯永强更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院海南医学院科学实验中心西安交通大学医学院公共卫生学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术理学更多>>
- 几种药用植物DNA提取与纯化方法的比较被引量：18
- 2002年
- 目的 :优化适于中医学院实验室条件下开展药用植物DNA提取与纯化的实验方法。方法 :①标准操作 ,②优化简易操作 ,③wizadTM clean -upsystem试剂盒方法。结果与讨论 :优化简易操作省时、经济。
- 李军郭晏海党琳
- 关键词：药用植物DNA提取纯化
- 幽门螺杆菌cagA基因的克隆表达及其产物的应用被引量：4
- 1998年
- 目的体外表达ＣａｇＡ蛋白，发展快速而简便的检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的免疫学方法．方法用ＰＣＲ技术克隆ｃａｇＡ基因５端片段（８５４ｂｐ）于ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α中温度诱导表达Ｍｒ３８０００的单体ＦＣａｇＡ，复性后分别作阴离子交换及凝胶柱层析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＦＣａｇＡ的抗原性．以重组ＦＣａｇＡ为抗原，通过制备胶体金及免疫胶体金，建立了斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法．结果ＦＣａｇＡ具有抗原性．以该抗原所建立的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法仅需２ｍｉｎ～３ｍｉｎ可完成，无需特殊设备，并可单人份操作．经过与ＥＩＡ法对比检测２６２例患者血清，本方法的特异性为９８５％，敏感度为９６８％．结论具有抗原活性的ＦＣａｇＡ蛋白的表达及ＤＩＧＦＡ检测抗ＣａｇＡ抗体方法的建立。
- 韩锋产阎小君苏成芝
- 关键词：螺杆菌感染幽门螺杆菌PCRCAGA蛋白
- 模板指导末端延伸法检测内皮型一氧化氮合酶基因多态性研究被引量：4
- 2004年
- 焦凯江华张菊王香玲
- 关键词：内皮型一氧化氮合酶基因多态性研究ENOS基因TDI-FP
- 胃溃疡患者血清胃动素、肽YY、IgG和铁蛋白的研究被引量：1
- 1998年
- 为探讨胃溃疡患者血清胃动素(MTL)、肽YY(PYY)、免疫球蛋白G(IgG)及铁蛋白(FRT)含量及变化的临床意义,选胃溃疡患者18例,男11例,女7例,平均46.6岁。均经纤维胃镜检查和X线钡餐检查确诊,并排除胃肠道肿瘤和内分泌疾病。病变部位:胃窦部12例、胃底部3例、胃体部3例。按胃壁分布:胃小弯14例、胃大弯2例、前壁1例和后壁1例。按胃溃疡的病期分为活动期(A期)13例和愈合期(H期)5例。另选健康对照者26例,男17例,女9例,平均44.4岁。均于确诊后3日内的上午07∶00时空腹采血,用放射免疫法测定血清MTL、PYY、IgG和FRT。与对照者比较,胃溃疡患者血清MTL(207.32±98.45对316.29±98.36ng/L,P<0.01),PYY(1.09±0.64对1.71±0.84pmol/L,P<0.01)和IgG(13.06±6.97对25.31±10.08g/L,P<0.01)明显升高,而FRT(98.37±41.52对127.12±64.06μg/L,P>0.05)升高不明显。MTL与PYY升高呈正相关(r=0.4436,P<0.05)。胃溃疡发生部位之间上述血清各值无明显差异(P>0.05),A期血清MTL和PYY较H期高,但无统计学差异(P>0.05)。10例胃溃疡患者临床治愈后复查,仅IgG下降(P<0.05),而FRT、MTL和PYY无明显变化。结果提示胃溃疡时患者血清MTL、PYY、IgG和FRT可以发生改变,测定这些物质对研究胃溃疡时的内分泌变化有一定参考价值。
- 任春江许昌泰王奕
- 关键词：胃溃疡促胃动素免疫球蛋白G铁蛋白
- 宫颈癌与HLA等位基因DQB1＊03、DR15的相关性研究被引量：9
- 2004年
- 目的 :探讨我国陕西地区宫颈癌的发生与人类白细胞抗原 (HLA) DQB1 0 3、DR15等位基因的相关性 .方法 :采用序列特异性引物的聚合酶链式反应 (PCR SSP)方法 ,扩增HLA等位基因DQB1 0 3、DR15的目的DNA片段 (分别为 79、197bp) ,分析两对等位基因在陕西地区宫颈癌患者和正常人中分布频率的差异 .结果 :4 5名宫颈癌患者组中DQB1 0 3等位基因频率显著高于 5 0名健康对照组 ,DR15等位基因频率在两组中的分布无显著差异 .结论 :HLA等位基因DQB1 0 3可能与宫颈癌的发生具有相关性 ,DR15可能与宫颈癌的发生不存在关联 .
- 夏琳张菊陈中灿白玉杰罗进杨浩阎小君
- 关键词：宫颈肿瘤HLA抗原
- NDRG2蛋白的毕赤酵母可溶表达与纯化被引量：1
- 2003年
- 目的 :酵母表达并纯化可溶性NDRG2蛋白 .方法 :从 pRSET A ndrg2重组质粒中扩增出 6his ndrg2融合基因 ,克隆入酵母表达载体 pPIC3.5K ;酵母重组表达载体pPIC3.5K 6his ndrg2电转化入毕赤酵母GS115 ,并进行营养缺陷筛选和G4 18抗性筛选 ;对高拷贝整合的重组酵母表达菌株诱导表达 ,可溶性表达产物经Ni NTA亲合层析纯化 .结果 :构建得到酵母融合重组表达载体 pPIC3.5K 6his ndrg2 ;经G4 18浓度梯度筛选得到串联整合 16个重组表达载体以上的重组酵母表达菌株 ;诱导后表达得到 6his NDRG2融合蛋白 ,并成功纯化得到可溶性表达产物 .结论 :表达并纯化得到可溶性NDRG2蛋白 ,为进一步研究NDRG2的结构与功能打下了必要的基础 .
- 张文红刘新平王琰韩月恒药立波
- 关键词：毕赤酵母基因表达
- 利用荧光偏振技术检测耐异烟肼结核分枝杆菌KatG315点突变被引量：12
- 2004年
- 目的 应用模板指导的荧光染料终止物掺入反应 荧光偏振检测技术 (template directeddye terminatorincorporationwithfluorescencepolarizationdetection ,TDI FP)分析结核分枝杆菌KatG 315点突变与异烟肼耐药性的关系 ,并建立一种准确、快速的诊断结核分枝杆菌异烟肼耐药性的新方法。方法 对临床 82例耐多药结核病患者所感染的结核分枝杆菌菌株进行常规培养和药敏实验 ;提取结核分枝杆菌DNA ,并经聚合酶链反应 (PCR)扩增 2 71bp的KatG基因片段 ,PCR产物经消化处理清除残余dNTPs和引物 ,进行TDI反应 ,应用Victor2测定荧光偏振值 ,分析所有样品的KatG基因 315位点的基因型。结果 2 9例异烟肼高度耐药患者的结核分枝杆菌中有 15例发生KatG 315的G→C突变 ,其中 4例为KatG 315突变和未突变的混合感染 ,突变率为 5 2 % ;32例异烟肼低度耐药患者的结核分枝杆菌中有 15例为KatG 315突变和未突变的混合感染 ,突变率为 4 7% ;2 1例异烟肼敏感患者的结核分枝杆菌未发现KatG 315突变。结论 KatG 315突变与结核分枝杆菌对异烟肼产生耐药性密切相关 ;应用TDI FP技术检测KatG 315突变具有准确、快速、简便以及高通量等优点 。
- 王琰张文红赵锦荣罗明张增贤白玉杰阎小君
- 关键词：药物耐受性
- p73基因在肝细胞癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2005年
- 背景:p73基因是新发现的一种抑癌基因,其在肿瘤发生、发展中的作用尚不明确。目的:探讨p73基因在肝细胞癌中的表达、突变程度及其与临床预后的关系。方法:采用定量逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测35例肝细胞癌和配对癌旁组织,以及10例转移淋巴结和10例正常淋巴结组织中p73基因的表达;采用内含子PCR产物StyⅠ酶切分析法调查标本的杂合性;采用PCR鄄单链构象多态性(SSCP)检测p73基因的突变情况。结果:35例肝细胞癌组织中有26例p73mRNA呈高表达,癌旁组织则呈低表达,两者表达率有显著差异(P<0.01);20例中高分化癌组织中有13例p73mRNA呈中高表达,15例低分化癌组织中有13例p73mRNA呈中高表达,两者阳性率之间有显著差异(P<0.01);18例Ⅰ～Ⅱ期肝细胞癌标本中有9例p73mRNA呈中高表达,17例Ⅲ～Ⅳ期肝细胞癌标本中p73mRNA均呈中高表达,两者阳性率之间有显著差异(P<0.05)。10例转移淋巴结组织中p73mRNA均呈高表达,而10例正常淋巴结组织中均呈低表达,两者之间有显著差异(P<0.01)。12例杂合性肝细胞癌组织标本中,有10例p73基因存在G/C:A/T双等位基因表达,在癌旁组织中则均为G/C表达,未见A/T表达。肝细胞癌和癌旁组织中未见p73基因突变。结论:p73基因的表达与肝细胞癌的分化程度、临床分期和预后有关,突变可能不是p73基因起作用的主要方式。
- 李永奇崔大祥金桂秋郭晏海陈勇
- 关键词：P73基因肝细胞癌基因表达抑癌基因聚合酶链反应单链构象
- 荧光偏振检测血清中HBV多聚酶基因突变被引量：1
- 2003年
- 目的 建立简便、多重HBV多聚酶基因序列中拉米呋啶耐药性相关的基因突变的检测方法。方法 采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测。对HBV多聚酶基因进行PCR扩增 ,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交 ,使探针的 3′可以在DNA聚合酶的作用下 ,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP ,然后检测该 3′端带有荧光素的探针 ,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度判定待测点是何种核苷酸。结果 该方法可以检测出HBV多聚酶基因序列中特定位置的核苷酸类型 ,能检测 1× 1 0 1 个拷贝的模板量。对 30例经过 6个月以上拉米呋啶治疗的患者血清进行检测 ,检测出其中有 3例是甲硫氨酸 (M)密码子ATG中的A→G变异 ;2例是ATG中的G→C变异 ;1例是ATG中的G→T。
- 郭晏海吕贯庭赵锦荣张菊白玉洁闫小君
- 关键词：荧光偏振血清HBV多聚酶基因突变乙型肝炎
- 宫颈癌组织高危HPV18 L1基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2006年
- 目的克隆和分析人乳头瘤病毒18型晚期表达基因L1序列,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研制提供基础。方法采用PCR技术扩增了1例HPV18阳性宫颈腺癌患者癌组织中HPV18L1基因,并对其进行了克隆及全序列分析。结果本例宫颈癌临床标本HPV18L1基因与GenBank收录的原型比较有12个碱基变异,推导其编码的氨基酸也发生了变化。结论本例中国人宫颈癌HPV18L1基因有一定的变异。
- 高艳娥杨会平张菊郭金珠刘宁侠阎小君
- 关键词：人乳头瘤病毒18型L1基因宫颈癌
