山东师范大学生命科学学院省动物抗性生物学实验室
- 作品数：151 被引量：653H指数：12
- 相关作者：何成强丁乃峥刘树真涂文利杜会芹更多>>
- 相关机构：山东农业大学动物科技学院山东大学医学院北京师范大学资源学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征
- 2013年
- 分离培养肿瘤坏死因子α(TNF-α)缺失与野生(WT)型小鼠前脂肪细胞,诱导其成脂分化,观察成脂相关蛋白的时序性变化,探讨TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞成脂分化特征。结果表明,TNF-α缺失小鼠前脂肪细胞诱导后第14 d,油红O染色阳性细胞显著多于WT小鼠细胞(p<0.05);成脂分化过程中,脂联素与过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平逐渐上调,且TNF-α缺失小鼠前脂肪及成熟脂肪细胞表达量高于WT小鼠细胞。提示TNF-α缺失可上调前脂肪细胞分化过程中脂联素与PPARγ的表达,促进其成脂分化。
- 范正伟张晾潘杰
- 关键词：前脂肪细胞成脂分化脂联素PPARΓ
- 鳗弧菌铁吸收系统的毒力作用研究进展被引量：5
- 2006年
- 王雪安利国袁金铎
- 关键词：鳗弧菌弧菌病
- 肥胖与非肥胖小鼠间充质干细胞成脂分化被引量：1
- 2013年
- 分离培养瘦素受体基因突变型(db/db)和野生型(Wild Type,WT)小鼠原代间充质干细胞(Mesenchymal StemCells,MSCs);采用油红O染色和异丙醇萃取法分析不同分化时期细胞中脂质积累和成脂诱导率;免疫印迹检测PPARγ和脂联素蛋白水平。结果表明,db/db小鼠MSCs通过下调脂联素和PPARγ的表达抑制成脂分化过程;db/db小鼠和WT小鼠的脂肪细胞分化过程存在差异。
- 李亚红潘杰
- 关键词：肥胖间充质干细胞原代培养肥胖小鼠
- 尼古丁对小鼠应激性胃溃疡影响的研究被引量：5
- 2010年
- 探讨尼古丁对小鼠应激性胃溃疡的影响。采用预先尼古丁处理后应激性胃溃疡造模法和先造模后尼古丁处理法,观察经腹腔注射生理盐水和1 mg/kg、3 mg/kg、9 mg/kg三种不同剂量的尼古丁对应激3 h后胃粘膜的预防保护作用及应激3 h后腹腔注射生理盐水和1 mg/kg3、mg/kg9、mg/kg三种不同剂量的尼古丁恢复2 h后对应激后胃粘膜的治愈作用。尼古丁对应激性胃溃疡的预防保护作用:与对照组相比,1 mg/kg尼古丁组溃疡指数降低,但无显著性差异;3 mg/kg尼古丁组胃溃疡指数显著降低(P<0.05);9 mg/kg尼古丁组胃溃疡指数显著增加。尼古丁对应激性胃溃疡的治疗作用:与对照组相比,尼古丁处理组胃溃疡指数显著降低。说明在一定浓度范围内,急性尼古丁处理能明显抑制束缚应激诱发的胃粘膜损伤,促进胃粘膜损伤的修复和治愈作用。
- 李霞李文文张雪萍陆长亮孙海基
- 关键词：尼古丁应激性胃溃疡溃疡指数抑制率
- BVDV Singer_Arg株全基因组克隆及其感染性RNA制备
- 2022年
- 克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获得其感染性RNA。将病毒基因组分段克隆后再拼接成全长cDNA;通过巨细胞病毒即早期启动子控制病毒cDNA转录,5'-UTR上游的锤头状核酶和3'-UTR下游的丁肝病毒核酶控制转录产物5'-UTR和3'-UTR的完整性和准确性,以获得不经体外转录,直接转染细胞产生病毒感染性RNA的反向遗传操作系统;并通过Western blot、RT-PCR技术、免疫荧光等方法对子代病毒进行了一系列鉴定与遗传稳定性分析。获得了Singer_Arg株全基因组序列并通过反向遗传拯救出该毒株。成功构建了基于Singer_Arg株的BVDV反向遗传操作系统,为BVDV疫苗研发和基础研究提供了技术平台。
- 秦春雪宋现梅王洪梅丁乃峥何洪彬何成强
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒反向遗传学全基因组克隆
- 牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
- 2022年
- 【目的】应用大肠杆菌表达系统表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白,纯化后免疫小鼠制备E0蛋白多克隆抗体用于BVDV的检测技术研究。【方法】采用PCR扩增BVDV的E0基因,将其连接至pET-28a(+)构建重组表达载体pET28a-E0。将重组质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导、亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定E0蛋白的表达情况。将纯化的E0蛋白免疫小鼠制备BVDV E0多克隆抗体,并通过Western blotting、细胞免疫荧光试验、ELISA等试验检测该多克隆抗体的特异性和效价,以及在BVDV检测中的应用。【结果】成功构建原核表达载体pET28a-E0,表达并纯化E0蛋白,制备的BVDV E0多克隆抗体可特异性识别纯化的E0蛋白及pET28a-E0在BL21中表达的总蛋白。进一步Western blotting、细胞免疫荧光试验、双抗夹心法ELISA证明制备的E0多克隆抗体可用于BVDV的检测。间接ELISA结果表明,E0多克隆抗体效价高于1∶64000。【结论】制备的BVDV E0多克隆抗体效价高、抗原结合特异性强,为BVDV E0蛋白的生物学功能研究及BVDV的检测提供了材料支持。
- 王炜韩慧慧丁乃峥何成强
- 关键词：E0基因原核表达多克隆抗体
- 腺相关病毒在大鼠丘脑纹状体通路中的应用被引量：2
- 2020年
- 目的探讨腺相关病毒(AAV2/9-GFP)在丘脑束旁核-纹状体通路中的神经元投射及其对组织的影响.方法成年雄性Wistar大鼠136只,立体定位实验随机分为丘脑束旁核(PF)组(n=64)、背外侧纹状体(DLS)组(n=64)、PF对照组(n=4)和DLS对照组(n=4);在立体定位实验的基础上进行行为学实验,分为PF行为学组(n=12)和行为学对照组(n=4);立体定位实验结束后进行神经元计数实验,分为PF计数组(n=16)、DLS计数组(n=16)、PF计数对照组(n=4)和DLS计数对照组(n=4).将不同剂量的AAV2/9-GFP立体定位注射至PF组和DLS组,转染不同时间,分析AAV2/9-GFP在PF和DLS内的转染效率,筛选出最佳剂量和转染时间.观察PF和DLS被转染的神经元以及两核团之间的神经元投射通路.分析大鼠行为学变化以及神经元的数量和形态变化.采用SPSS Statistics 21.0软件进行统计学分析.结果随着转染剂量和时间的增加,PF光密度值增大(F剂量=55.617,P<0.001;F时间=65.288,P<0.001)、转染面积增加(F剂量=202.443,P<0.001;F时间=224.064,P<0.001),呈上升趋势.随着转染剂量和时间的增加,DLS光密度值增大(F剂量=117.062,P<0.001;F时间=155.792,P<0.001)、转染面积增加(F剂量=240.422,P<0.001;F时间=304.571,P<0.001),呈上升趋势.病毒转染PF的最佳剂量为0.4μL,最佳时间为4周;转染DLS的最佳剂量为0.6μL,最佳时间为4周.AAV2/9-GFP注射至PF时,可见投射至背外侧纹状体、运动皮层、岛叶;注射至DLS时,可见投射至运动皮层、底丘脑核、束旁核、黑质.AAV2/9-GFP对神经元有损伤,表现为神经元数量减少(P<0.05),形态不规则,胞体变大,核仁及尼氏小体染色变浅.结论丘脑束旁核(PF)与背外侧纹状体(DLS)存在着密切的纤维联系,并且与皮层、底丘脑核和黑质等联系广泛.AAV2/9-GFP是一种有效的神经示踪剂但对神经元有一定程度的损伤,提示临床应用时应谨慎.
- 何天齐李敏王雪楠王亚楠李玉川孙爽赵海龙王皓陈大典朱梅佳王晓军王敏李秀华
- 关键词：腺相关病毒丘脑束旁核通路
- 黄鳝外周血细胞显微结构的观察被引量：3
- 2009年
- 本实验主要研究黄鳝外周血细胞的形态特征,并对白细胞进行分类统计,探讨黄鳝的血液学及免疫学特性。经瑞氏染色后,从外周血细胞涂片中可以区分出红细胞,淋巴细胞,单核细胞,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞和血栓细胞。对白细胞进行分类统计发现,淋巴细胞最多,嗜酸性粒细胞最少,没有发现嗜碱性粒细胞,这与黄鳝的底栖生活密切相关。
- 王磊张圣强杨桂文
- 关键词：黄鳝血细胞显微结构
- 马尾松花粉硫酸酯化多糖对大鼠主动脉平滑肌细胞[Ca^(2+)]_i调控及增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究马尾松花粉多糖PPM60-A及其硫酸酯化物SPPM60-A对大鼠动脉平滑肌细胞[Ca2+]i调控及增殖的影响。方法常规水提醇沉法制备马尾松花粉多糖,Sephacryl S-400HR色谱分离得PPM60-A,氯磺酸-吡啶法得硫酸酯化物SPPM60-A,酯化度为1.28。酶解法分离制备大鼠动脉平滑肌细胞,测定酯化前后多糖对其胞内[Ca2+]i和细胞增殖的影响。结果 PPM60-A和SPPM60-A均可以降低[Ca2+]i,抑制高K+和去甲肾上腺素(NE)诱导的钙离子升高,降低高K+引起的钙离子水平上升,对NE诱导的血管主动脉平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用。PPM60-A作用效果好于SPPM60-A。结论PPM60-A及SPPM60-A均能抑制细胞外Ca2+内流,抑制血管平滑肌细胞增殖。
- 耿越赵红
- 关键词：松花粉动脉平滑肌细胞钙离子增殖
- 油菜花粉超临界CO2萃取物对小鼠免疫的影响
- 目的:验证油菜花粉CO2 超临界萃取物FA 对小鼠免疫因子及对类风湿关节炎小鼠(CIA 小鼠)免疫 的影响。方法:三个剂量（LPE 0.56G /KG×D, MPE 1.4G /KG×D, HPE2.8G/KG×D)连续...
- 关键词：油菜花粉超临界CO2免疫细胞因子
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